一、基本信息

1. 产品编号：HY-I254

2. 细胞名称：人原代真皮成纤维细胞

3. 英文名称：Human Dermal Fibroblasts

4. 种属来源：人

5. 组织来源：皮肤组织真皮层

6. 生长特性：贴壁生长

7. 产品规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶

8. 细胞形态：成纤维细胞样（梭形、星形扁平状）

二、细胞特征

1. 形态特征：刚分离时呈圆形，30分钟开始贴壁伸出伪足；6小时后伸展成梭形，胞核清晰，分布均匀；5-7天达融合状态，细胞排列紧密，呈网状分布。

2. 生物学特性：细胞标志物：Vimentin免疫荧光鉴定阳性

3. 细胞纯度：＞90%

4. 功能性特征：具有合成和分泌细胞外基质能力，参与组织损伤修复

5. 安全性：不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等

三、培养条件

1. 专用培养基：人真皮成纤维细胞完全培养基

2. 消化液：0.25%胰蛋白酶

3. 制备方法：先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法

4. 培养环境：37℃、5% CO₂、饱和湿度

5. 传代比例：1:2传代

6. 传代特性：可传5代左右（3代以内状态最佳）

7. 换液频率：每2-3天换液一次

四、主要应用

1. 皮肤生物学研究：皮肤老化机制研究、创伤愈合过程分析。

2. 组织工程研究：皮肤组织构建、再生医学应用。

3. 化妆品测试：护肤产品功效评价、原料安全性测试。

五、产品优势

1. 技术优势：采用中性蛋白酶和胰蛋白酶-胶原酶两步消化法，差速贴壁技术纯化细胞。

2. 质量保证：严格的Vimentin免疫荧光鉴定和质量检测

六、培养方法

1. 复苏操作：收到细胞后静置3-4小时稳定细胞状态

2. 传代操作：80-90%融合度时使用0.25%胰蛋白酶消化

3. 实验准备：实验器皿需进行包被处理（鼠尾胶原Ⅰ、PLL或明胶）

4. 培养建议：使用配套专用培养基维持最佳细胞状态

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。