一、基本信息

1. 产品编号：HY-J042

2. 产品名称：大鼠原代肝窦内皮细胞

3. 英文名称：Rat Liver Sinusoidal Endothelial Cells (SEC)

4. 种属来源：大鼠

5. 组织来源：肝脏组织

6. 生长特性：贴壁生长

7. 细胞形态：内皮细胞样

8. 传代特性：可传1-2代

9. 传代比例：1:2

10. 产品规格：5×10⁵ cells/瓶

二、细胞特征

1. 细胞类型：肝窦内皮细胞

2. 分离方法：采用混合酶灌流消化法

3. 纯化方法：反复低速离心结合密度梯度离心法

4. 筛选方法：通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备

5. 鉴定方法：经CD31或CD14免疫荧光鉴定

6. 纯度标准：细胞纯度可达90%以上

7. 无菌检测：不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等

三、培养条件

1. 专用培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

2. 包被条件：PLL（0.1mg/mL）或明胶（0.1%）

3. 消化液类型：0.25%胰蛋白酶

4. 培养环境：温度：37℃；气相：空气95%，CO₂ 5%；湿度：饱和湿度

5. 换液周期：每2-3天换液一次

四、产品应用

1. 肝脏疾病研究：肝纤维化、肝硬化机制探讨

2. 药物代谢研究：肝脏药物代谢功能分析

3. 肝窦毛细血管化研究：肝病发病前期机制研究

4. 免疫学研究：肝脏免疫耐受与抗原提呈功能分析

5. 物质转运研究：肝窦内皮细胞通透性研究

6. 组织工程应用：肝脏组织修复与再生研究

五、产品优势

1. 高纯度保证：经CD31/CD14免疫荧光鉴定纯度>90%

2. 专业技术：采用混合酶灌流消化结合密度梯度离心

3. 质量可靠：严格的质量控制和全面的无菌检测

4. 功能特性：保持肝窦内皮细胞特有的窗孔结构和高度通透性

六、培养方法

1. 收货处理流程：T25瓶用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% CO₂培养箱静置3-4小时，观察细胞贴壁状态，记录细胞生长情况。

2. 细胞传代步骤：吸出T25瓶中原培养基，加PBS清洗细胞一次，加1ml 0.25%胰蛋白酶消化液，37℃消化1-3分钟，待细胞回缩变圆后，加5ml完全培养基终止消化，轻轻吹打混匀，按1:2比例传代，补充新鲜完全培养基至5ml，继续培养。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。