一、基本信息

1. 产品编号：HY-A176

2. 细胞名称：WM266-4（人黑素瘤细胞）

3. 英文名称：WM266-4 Human Melanoma Cell Line

4. 来源物种：人（Homo sapiens）

5. 组织来源：皮肤，转移性黑素瘤（淋巴结转移）

6. 疾病特征：恶性黑素瘤

7. 细胞形态：上皮样/成纤维细胞样

8. 生长特性：贴壁生长

9. 推荐培养基：DMEM + 10% FBS + 1% 双抗

10. 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管

11. 生物安全等级：BSL-1

12. 培养条件：37°C，5% CO₂，95%湿度

13. 传代比例：1:3 至 1:6

14. 传代频率：每2-3天

15. 冻存条件：无血清细胞冻存液，液氮储存

16. 支原体检测：阴性

二、细胞特征

1. 病理特征：来源于转移性黑素瘤（淋巴结转移），具有高度侵袭和转移特性，BRAF V600E突变阳性。

2. 形态学特征：混合形态（上皮样和成纤维细胞样），贴壁生长，形态不规则，细胞质丰富，核大明显。

3. 分子特征：BRAF V600E突变典型模型，表达黑素瘤相关标志物，适用于靶向药物研究。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM（高葡萄糖）

2. 血清补充：10%胎牛血清（FBS）

3. 抗生素：1%青霉素-链霉素溶液

4. 培养温度：37°C恒温培养箱

5. 气体环境：5% CO₂，95%空气

6. 传代时机：80-90%融合度

7. 消化时间：0.25%胰蛋白酶消化2-4分钟

8. 换液频率：每2-3天更换新鲜培养基

四、产品应用

1. 黑素瘤研究：黑素瘤发生发展机制、肿瘤转移机制研究、BRAF信号通路研究。

2. 药物研发：BRAF抑制剂筛选、免疫治疗研究、联合用药方案评估。

3. 转化医学：个体化治疗模型、耐药机制研究、生物标志物发现。

五、产品优势

1. 突变明确：BRAF V600E突变明确

2. 转移特性：具有淋巴结转移背景

3. 研究价值：黑素瘤研究的金标准细胞系之一

六、培养方法

1. 细胞复苏：37°C水浴快速解冻（1分钟内），1000rpm离心3-5分钟，重悬后接种于预温培养基，37°C培养箱静置培养。

2. 常规传代：PBS清洗细胞层1-2次，加入适量胰蛋白酶消化，显微镜下观察细胞脱落，完全培养基终止消化，按比例接种传代。

3. 细胞冻存：对数生长期细胞消化收集，无血清冻存液重悬细胞，细胞密度1×10⁶/mL，程序降温后液氮储存。

七、注意事项

1. BRAF突变验证：建议定期进行突变状态验证

2. 形态观察：注意细胞形态变化，防止分化

3. 消化控制：避免过度消化影响细胞活性

4. 无菌操作：严格无菌操作防止污染

5. 冻存备份：建议早期冻存多批细胞备份

6. 科研用途：仅限于科学研究使用