一、基本信息

1. 产品编号：HY-A402

2. 细胞名称：永生化人胰腺肿瘤成纤维细胞

3. 英文名称：Immortalized Human Pancreatic Cancer-Associated Fibroblasts

4. 细胞别称：胰腺癌相关成纤维细胞、PCAFs

5. 种属来源：人

6. 组织来源：胰腺肿瘤组织

7. 疾病特征：胰腺癌肿瘤微环境

8. 细胞类型：永生化肿瘤相关成纤维细胞

9. 细胞形态：纺锤形，成纤维细胞样

10. 生长特性：贴壁细胞

11. 生物安全等级：BSL-2

12. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

二、细胞特征

1. 永生化特性：通过慢病毒转导hTERT基因永生化，保持原代细胞的生物学特性，具有无限增殖能力。

2. 功能特征：高表达α-SMA、纤维连接蛋白等基质标志物，具有细胞外基质重塑能力，分泌多种细胞因子和生长因子。

3. 标志物表达：α-SMA、Vimentin、FAP阳性

4. 遗传稳定性：经过STR鉴定和核型分析

5. 功能验证：具有促进肿瘤细胞侵袭和迁移的能力

6. 无菌检测：细菌、真菌、支原体检测均为阴性

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM/F12培养基

2. 血清添加：10%胎牛血清（FBS）

3. 添加剂：1%非必需氨基酸，1%谷氨酰胺

4. 生长因子：适量添加bFGF（可选）

5. 抗生素：1%青霉素-链霉素双抗

6. 培养环境：37°C，5% CO₂，95%湿度

7. 传代比例：1:2至1:4

8. 传代频率：3-4天传代一次

9. 冻存条件：90%FBS+10%DMSO

10. 保存条件：液氮长期储存

四、产品应用

1. 肿瘤微环境研究：胰腺癌肿瘤基质相互作用、肿瘤微环境信号通路分析、基质细胞与肿瘤细胞串扰研究。

2. 药物研发：抗纤维化药物筛选、肿瘤微环境靶向药物评价、联合治疗策略开发。

3. 机制研究：上皮-间质转化研究、细胞外基质重塑机制、肿瘤转移机制探索。

五、产品优势

1. 模型经典：国际公认的肿瘤研究标准细胞系

2. 特性明确：经过多个机构验证，STR鉴定清晰

3. 应用广泛：适用于多个研究领域

4. 研究可靠：细胞生长稳定，实验结果重复性好

六、培养方法

1. 细胞复苏：37°C水浴快速解冻（1分钟内），1000rpm离心5分钟，完全培养基重悬接种。

2. 常规传代：细胞融合度80-90%时传代，0.25%胰酶消化2-3分钟，按1:2-1:4比例接种传代。

3. 功能维持：定期进行功能标志物检测，避免过度传代（建议≤15代），适时添加生长因子维持功能。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。