Product Center
产品中心
1. 产品编号：HY-A308
2. 产品名称：EBC-1 人肺腺癌细胞
3. 英文名称：Human Lung Adenocarcinoma Cells
4. 种属来源：人
5. 组织来源：肺
6. 疾病类型：癌症（肺腺癌）
7. 细胞类型：上皮细胞样
8. 生长特性：贴壁生长
9. 细胞形态：上皮细胞样
10. 细胞代数：10代以内
11. 生物安全等级：1级
12. 产品规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶 或 1 mL冻存管包装
13. 支原体检测：阴性
14. 保藏机构：ATCC; CRL-2884
15. 培养基：DMEM + 10% FBS + 1% 青霉素-链霉素双抗
16. 培养条件：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳
17. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
18. 运输方式：复苏发货（T25瓶，免运输费）；冻存发货（冻存管，需加干冰运输费）
19. 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
1. 形态特征：典型的上皮细胞样形态，细胞呈扁平多角形或不规则形，贴壁生长，细胞间连接较为紧密。
2. 来源背景：EBC-1细胞源自人肺腺癌组织，是非小细胞肺癌（NSCLC） 研究中的重要细胞模型之一，尤其代表肺腺癌亚型。
3. 应用定位：广泛应用于肺癌的基础生物学研究、药物敏感性测试、信号通路探索及肿瘤微环境相互作用研究。
1. 基础培养基：DMEM（高糖）
2. 血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)
3. 抗生素：1% 青霉素-链霉素双抗
4. 培养环境：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳
5. 生长模式：贴壁生长
1. 肺癌基础生物学研究：用于研究肺腺癌细胞的增殖、凋亡、周期阻滞、迁移、侵袭、克隆形成等基本生物学行为及相关分子机制。
2. 抗肺癌药物筛选与评估：作为体外模型，用于筛选和评估针对非小细胞肺癌（尤其是腺癌）的化疗药物（如顺铂、吉西他滨）、靶向药物（如EGFR-TKIs、ALK抑制剂）及免疫疗法的体外敏感性。
3. 肺癌相关信号通路研究：用于研究与肺癌发生发展密切相关的信号通路，如EGFR、ALK、ROS1、KRAS、PI3K/Akt/mTOR、MAPK等通路在EBC-1细胞中的活性、突变状态及其功能。
4. 肿瘤耐药机制研究：可用于建立获得性耐药细胞模型，研究肺癌对靶向药物或化疗药物产生耐药的分子机制。
5. 肿瘤微环境与免疫逃逸：可与免疫细胞、成纤维细胞等共培养，模拟肿瘤微环境，研究肿瘤细胞与基质细胞、免疫细胞的相互作用。
1. 经典肺腺癌模型：EBC-1是非小细胞肺癌（NSCLC） 研究中广泛使用和认可的人肺腺癌细胞系之一，文献支持丰富，研究结论可比性强。
2. 培养条件通用：使用常规的DMEM+10%FBS培养基，培养成本较低，操作简便，易于在大多数实验室推广使用。
3. 来源权威：源自ATCC等国际权威细胞库，细胞背景清晰，质量有保障。
4. 应用范围广：适用于从基础机制探索到临床前药物筛选的多个研究层面。
1. 收货与复苏处理：
（1）T25瓶（复苏发货）：收到细胞后，观察细胞瓶是否完好，用75%酒精消毒瓶壁。将T25瓶置于37℃、5% CO₂培养箱中静置2-4小时，以便稳定细胞状态。之后可更换为新鲜的完全培养基（DMEM+10%FBS+1%双抗），继续培养。
（2）冻存管（冻存发货）：收到细胞后，应立即转入液氮冻存或直接复苏。复苏时，将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。加入4 mL完全培养基混合均匀。1000 rpm离心3分钟，弃去上清液。加入1-2 mL新鲜完全培养基重悬细胞。将细胞悬液加入含适量完全培养基的T25瓶或10cm培养皿中，置于培养箱培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2. 传代操作（贴壁细胞）：【注意：该细胞消化方法为“消化液浸润后弃去，再孵育”】
时机判断：当细胞密度达到80%-90%，细胞融合成片时进行传代。
洗涤：弃去旧培养上清，用不含钙、镁离子的PBS轻轻润洗细胞1-2次。
特殊消化步骤：加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA），使之浸润所有细胞。弃去消化液（此步骤关键，不同于常规保留消化液的方法）。将培养瓶置于37℃培养箱中消化约1分钟。
观察与终止：在显微镜下观察，待大部分细胞变圆并开始脱落时，迅速拿回操作台，轻敲瓶壁使细胞脱落，加入少量（如2-3 mL） 完全培养基终止消化。
收集细胞：按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻吹打均匀，将细胞悬液转移至无菌离心管，1000 rpm离心4分钟，弃去上清。
重悬与接种：加入1-2 mL新鲜完全培养基重悬细胞，按1:2的比例接种到含8 mL新鲜完全培养基的新培养瓶中。
培养：置于37℃、5% CO₂培养箱中继续培养。
3. 冻存操作：
收集细胞：按上述传代方法收集处于良好生长状态（对数生长期）的细胞。
洗涤与计数：离心后弃上清，用PBS清洗一遍，弃尽PBS。加入1 mL血清或完全培养基重悬细胞并进行计数。
配制冻存液：根据细胞数量加入预冷的无血清细胞冻存液，使细胞密度达到5×10⁶ ~ 1×10⁷ cells/mL，轻轻混匀。
分装：将细胞悬液分装至冻存管，每管1 mL，并做好清晰标识。
程序冻存：将冻存管放入程序降温盒或直接放入-80℃冰箱，24小时后转入液氮中长期储存。
1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。
2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。
3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。
4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。
5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。
6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。
7. 用途限制：仅限于科研用途。
