一、基本信息

1. 产品编号：HY-A346

2. 英文名称：Immortalized Human Cerebral Microvascular Endothelial Cells HCMEC/D3

3. 细胞别称：人脑微血管内皮细胞系

4. 种属来源：人

5. 组织来源：脑微血管组织

6. 疾病背景：正常人脑组织

7. 细胞类型：永生化内皮细胞

8. 细胞形态：鹅卵石样，铺路石状排列

9. 生长特性：贴壁生长

10. 背景描述：HCMEC/D3细胞是通过转染SV40大T抗原获得的水生化人脑微血管内皮细胞系，保留血脑屏障关键特性，是研究血脑屏障功能的经典模型

11. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

12. 支原体检测：阴性

二、细胞特征

1. 形态特征：典型内皮细胞鹅卵石样形态；接触抑制生长特性；形成紧密的单层细胞。

2. 功能特性：表达血脑屏障特异性标志物；保持屏障功能完整性；具有选择性通透性。

3. 分子特征：表达紧密连接蛋白（ZO-1，occludin）；表达特异性转运蛋白；保留内皮细胞功能特性。

三、培养条件

1. 基础培养基：内皮细胞专用培养基

2. 培养基配方：内皮细胞培养基 + 5% FBS + 1%内皮细胞生长添加剂 + 1% P/S

3. 血清添加：5%胎牛血清

4. 生长因子：内皮细胞生长添加剂

5. 抗生素：1%青霉素-链霉素

6. 培养环境：37°C，5% CO₂

7. 传代比例：1:3至1:4

8. 传代时机：细胞融合度达80-90%

9. 消化时间：3-5分钟

10. 冻存条件：90% FBS + 10% DMSO

四、产品应用

1. 血脑屏障研究：血脑屏障通透性机制、药物跨屏障转运研究

2. 脑血管疾病：脑卒中机制研究、神经血管单元功能

3. 药物开发：中枢神经系统药物筛选、纳米药物递送系统评估

五、产品优势

1. 模型权威：国际公认的血脑屏障研究模型

2. 功能完整：保留血脑屏障关键功能特性

3. 应用广泛：适用于多种神经血管研究领域

六、培养方法

1. 细胞复苏：37℃水浴快速解冻（1分钟内），1000rpm离心5分钟，专用培养基重悬接种。

2. 常规传代：PBS清洗细胞2次，0.05%胰酶-EDTA消化3-5分钟，完全培养基终止消化，按1:3至1:4比例传代

3. 细胞冻存：对数生长期收集细胞，冻存液重悬（1×10⁶ cells/mL），程序降温后液氮保存。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。