一、基本信息
1. 产品编号:U251(人胶质瘤细胞)
2. 英文名称:Human Glioblastoma Cell Line U251
3. 细胞别称:U-251 MG;U-251-MG;U251-MG;人神经胶质细胞瘤细胞
4. 种属来源:人
5. 年龄性别:75岁/男性
6. 组织来源:脑组织
7. 疾病背景:胶质母细胞瘤
8. 细胞类型:肿瘤细胞
9. 细胞形态:成纤维细胞样,贴壁生长
10. 生长特性:贴壁细胞
11. 背景描述:U251细胞系源自一位75岁男性患者的胶质母细胞瘤组织,通过外植体技术分离获得,是最常见的恶性原发性脑肿瘤研究模型
12. 细胞规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
13. 支原体检测:无污染
14. 保藏机构:ECACC;09063001
15. 细胞代数:10代以内
16. 致瘤特性:在裸鼠中具有致瘤性
17. 生物安全等级:1级
二、细胞特征
1. 形态特征:典型的成纤维细胞样形态;贴壁生长特性稳定。
2. 细胞纯度:高于90%。
3. 特性验证:经鉴定细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。
4. 生物学特性:细胞倍增时间约24小时;保持胶质母细胞瘤恶性特征;适合体外肿瘤模型建立。
三、培养条件
1. 基础培养基:DMEM培养基
2. 培养基配方:89% DMEM + 10% FBS + 1% P/S
3. 血清添加:10%优质胎牛血清
4. 抗生素:1%青霉素-链霉素溶液
5. 培养环境:37°C,5% CO₂,95%空气
6. 湿度条件:饱和湿度
7. 传代比例:1:2至1:4
8. 换液频率:每周2-3次
9. 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
10. 复苏存活率:≥90%
四、产品应用
1. 胶质瘤研究:胶质母细胞瘤发病机制研究、肿瘤干细胞提取与鉴定
2. 药物开发:抗癌药物筛选、靶向治疗药物评价
3. 机制研究:Pax6相关的Dkk3表达机制、JARID1B在神经胶质瘤发病机制中的作用
4. 基础研究:基因编辑研究、信号通路分析
五、产品优势
1. 模型经典:国际公认的肿瘤研究标准细胞系
2. 特性明确:经过多个机构验证,STR鉴定清晰
3. 应用广泛:适用于多个研究领域
4. 研究可靠:细胞生长稳定,实验结果重复性好
六、培养方法
1. 细胞复苏:37℃水浴快速解冻,1000rpm离心3-5分钟,完全培养基重悬接种,37℃培养过夜后观察。
2. 常规传代:PBS润洗细胞1-2次,0.25%胰蛋白酶消化1-2分钟,完全培养基终止消化,按1:2至1:4比例分瓶培养。
3. 细胞冻存:收集对数生长期细胞,无血清冻存液重悬,程序降温后液氮储存。
七、注意事项
1. 无菌操作:所有操作在生物安全台内进行。
2. 传代时机:细胞密度达80%-90%时传代。
3. 消化控制:胰蛋白酶消化时间不宜过长。
4. 密度维持:保持适宜细胞生长密度。
5. 定期鉴定:建议定期进行STR鉴定。
6. 代次控制:建议使用低代次细胞进行实验。
7. 用途限制:仅限于科研用途。