Product Center
产品中心
1. 产品编号：HY-A394
2. 产品名称：HPASMC-SV40T 人肺动脉平滑肌细胞（永生化）
3. 英文名称：Human Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells (Immortalized)
4. 种属来源：人
5. 组织来源：正常肺动脉组织
6. 细胞类型：平滑肌细胞
7. 生长特性：贴壁生长
8. 细胞形态：长梭状细胞
9. 永生化方法：通过慢病毒转染携带SV40大T抗原 (SV40T) 基因
10. 筛选标记：嘌呤霉素 (Puromycin) 抗性
11. 细胞鉴定：平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫荧光染色为阳性
12. 细胞代数：10代以内
13. 生物安全等级：1级
14. 产品规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶 或 1 mL冻存管包装
15. 支原体检测：阴性
16. 专用培养基：HPASMC-SV40T细胞专用培养基
17. 培养条件：温度：37℃
气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳
18. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
19. 运输方式：复苏发货（T25瓶，免运输费）
冻存发货（冻存管，需加干冰运输费）
20. 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
1. 形态特征：典型的平滑肌细胞形态，呈长梭状，贴壁生长良好。
2. 功能鉴定：已通过平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫荧光染色鉴定，结果为阳性，证实其平滑肌细胞身份。
3. 永生化特性：通过导入SV40大T抗原基因，克服了原代细胞复制衰老的局限性，获得了体外持续增殖能力，为长期、稳定的体外研究提供了细胞资源。
4. 应用优势：相比原代肺动脉平滑肌细胞，此永生化细胞株具有增殖能力强、性状稳定、易于培养的优点，同时保留了关键的平滑肌细胞表型和功能特征。培养时建议使用含嘌呤霉素的培养基以维持筛选压力。
1. 专用培养基：HPASMC-SV40T细胞专用培养基（含必要生长因子，建议维持嘌呤霉素筛选压力）
2. 培养环境：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳
3. 生长模式：贴壁生长
1. 肺动脉高压（PAH）研究：作为核心体外模型，用于研究PAH发病机制中肺动脉平滑肌细胞的异常增殖、迁移、表型转化（收缩型向合成型转化） 及细胞外基质重塑。
2. 血管生物学与药理学：用于研究血管张力调节、血管壁重构、血管活性物质（如内皮素、一氧化氮）的作用及信号通路。
3. 药物筛选与评估：用于筛选和评估靶向肺动脉平滑肌细胞增殖、迁移的潜在治疗药物，如肺动脉高压靶向药物（前列环素类似物、内皮素受体拮抗剂、磷酸二酯酶-5抑制剂等）的药效与机制。
4. 基因功能研究：通过基因编辑或过表达/干扰技术，研究特定基因在肺动脉平滑肌细胞功能调控中的作用。
5. 疾病建模：可与其他细胞（如内皮细胞、成纤维细胞）共培养，构建更复杂的体外血管疾病模型。
1. 永生化、无限增殖：克服原代细胞传代次数有限的瓶颈，提供稳定、可持续的细胞来源，适合需要大量细胞的长期研究项目。
2. 表型稳定可靠：经过α-SMA免疫荧光鉴定，确保其平滑肌细胞特性和功能标志物的稳定表达。
3. 专用培养体系：配套优化的HPASMC-SV40T细胞专用培养基，为细胞提供最佳生长环境，简化实验操作。
4. 研究重复性好：永生化细胞株批次间差异小，实验数据可比性和重复性高。
5. 肺动脉高压研究的理想工具：是模拟和研究肺动脉高压血管重构病理过程的关键体外细胞模型。
1. 收货与复苏处理：
（1）T25瓶（复苏发货）：收到细胞后，观察细胞瓶是否完好，用75%酒精消毒瓶壁。将T25瓶置于37℃、5% CO₂培养箱中静置2-4小时，以便稳定细胞状态。之后可更换为新鲜的HPASMC-SV40T细胞专用培养基，继续培养。
（2）冻存管（冻存发货）：收到细胞后，应立即转入液氮冻存或直接复苏。复苏时，将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。加入4 mL专用培养基混合均匀。1000 rpm离心3分钟，弃去上清液。加入1-2 mL新鲜专用培养基重悬细胞。将细胞悬液加入含适量专用培养基的T25瓶或10cm培养皿中，置于培养箱培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2. 传代操作（贴壁细胞）：
时机判断：当细胞密度达到80%-90%，细胞融合成片时进行传代。
洗涤：弃去旧培养上清，用不含钙、镁离子的PBS轻轻润洗细胞1-2次。
消化：加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA），使之浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3分钟（具体时间视细胞贴壁紧密程度而定）。
观察与终止：在显微镜下观察，待大部分细胞变圆并开始脱落时，迅速拿回操作台，轻敲瓶壁使细胞脱落，加入2-3 mL专用培养基终止消化。
收集细胞：轻轻吹打均匀，将细胞悬液转移至无菌离心管，1000 rpm离心5分钟，弃去上清。
重悬与接种：加入1-2 mL新鲜专用培养基重悬细胞，按1:2的比例接种到含8 mL新鲜专用培养基的新培养瓶中。
培养：置于37℃、5% CO₂培养箱中继续培养。
3. 冻存操作：收集细胞：按传代方法收集处于良好生长状态（对数生长期）的细胞。
洗涤与计数：离心后弃上清，用PBS清洗一遍，弃尽PBS。加入1 mL血清或专用培养基重悬细胞并进行计数。
配制冻存液：根据细胞数量加入预冷的无血清细胞冻存液，使细胞密度达到5×10⁶ ~ 1×10⁷ cells/mL，轻轻混匀。
分装：将细胞悬液分装至冻存管，每管1 mL，并做好清晰标识。
程序冻存：将冻存管放入程序降温盒或直接放入-80℃冰箱，24小时后转入液氮中长期储存。
1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。
2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。
3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。
4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。
5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。
6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。
7. 用途限制：仅限于科研用途。
