一、基本信息

1. 产品编号：HY-A442

2. 产品名称：iheESCs 永生化人子宫内膜在位基质细胞

3. 英文名称：Human Endometrial Stromal Cells (Immortalized)

4. 细胞别称：Human telomerase reverse transcriptase (hTERT)-induced immortalized cells (iheESCs)

5. 种属来源：人

6. 组织来源：子宫（在位内膜）

7. 细胞类型：基质/间质细胞

8. 生长特性：贴壁生长

9. 细胞形态：成纤维细胞样

10. 永生化方法：通过导入人端粒酶逆转录酶 (hTERT) 基因诱导永生化

11. 细胞鉴定：已通过STR鉴定及免疫荧光鉴定

12. 细胞代数：10代以内

13. 生物安全等级：1级

14. 产品规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶 或 1 mL冻存管包装

15. 支原体检测：阴性

16. 培养基：D/F12 + 10% FBS + 双抗 (PS)

17. 培养条件：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳

18. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

19. 细胞货期：现货，1周左右

20. 运输方式：复苏发货（T25瓶，免运输费）；冻存发货（冻存管，需加干冰运输费）

21. 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

二、细胞特征

1. 形态特征：典型的成纤维细胞样形态，贴壁生长，形态均一。

2. 永生化特性：通过hTERT基因诱导永生化，克服了原代子宫内膜基质细胞（ESCs）体外复制衰老的限制，获得了无限增殖能力，同时保持了基质细胞的基本特性。

3. 功能验证：

STR鉴定：提供完整STR鉴定报告，确保细胞身份唯一性和准确性。

免疫荧光鉴定：可表达子宫内膜基质细胞相关标志物。

蜕膜化能力：经孕酮和环磷酸腺苷（cAMP）诱导后，可成功发生蜕膜化反应，模拟胚胎植入时子宫内膜的生理变化，是研究子宫内膜容受性和蜕膜化的关键功能验证。

应用优势：提供了性状稳定、可大量扩增的子宫内膜基质细胞来源，是生殖医学、子宫内膜疾病研究的理想工具细胞。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM/F12 (1:1)

2. 添加物：10% 胎牛血清 (FBS) + 1% 青霉素-链霉素双抗 (PS)

3. 培养环境：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳

4. 生长模式：贴壁生长

四、产品应用

1. 子宫内膜容受性与胚胎植入研究：核心模型，用于研究胚胎植入过程中子宫内膜基质细胞的蜕膜化过程、相关基因表达调控及信号通路（如cAMP/PKA, MAPK）。

2. 子宫内膜相关疾病研究：用于研究子宫内膜异位症、子宫腺肌症、子宫内膜癌等疾病中基质细胞的功能异常、与上皮细胞或免疫细胞的相互作用。

3. 生殖内分泌学研究：用于研究雌、孕激素等甾体激素对子宫内膜基质细胞增殖、分化和功能的调控机制。

4. 药物筛选与毒性评估：用于评估影响女性生殖系统或胚胎发育的药物、环境化合物的潜在效应。

5. 组织工程与再生医学：作为构建体外子宫内膜模型或类器官的种子细胞。

五、产品优势

1. 永生化、无限增殖：解决了原代ESCs来源有限、扩增能力差的问题，提供稳定、可持续的细胞资源。

2. 功能完整：保留了原代ESCs关键的蜕膜化能力，功能验证充分，研究价值高。

3. 身份确证：提供STR鉴定报告，确保细胞系身份的真实性和实验数据的可靠性。

4. 培养简单：使用常规的D/F12+10%FBS培养基，无需复杂因子，培养成本相对较低。

六、培养方法

1. 收货与复苏处理：

（1）T25瓶（复苏发货）：收到细胞后，观察细胞瓶是否完好，用75%酒精消毒瓶壁。将T25瓶置于37℃、5% CO₂培养箱中静置2-4小时，以便稳定细胞状态。之后可更换为新鲜的完全培养基（D/F12+10%FBS+PS），继续培养。

（2）冻存管（冻存发货）：收到细胞后，应立即转入液氮冻存或直接复苏。复苏时，将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。加入4 mL完全培养基混合均匀。1000 rpm离心3分钟，弃去上清液。加入1-2 mL新鲜完全培养基重悬细胞。将细胞悬液加入含适量完全培养基的T25瓶或6cm培养皿中，置于培养箱培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2. 传代操作（贴壁细胞）：

时机判断：当细胞密度达到80%-90% 时进行传代。

洗涤：弃去旧培养上清，用不含钙、镁离子的PBS轻轻润洗细胞1-2次。

消化：加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA），使之浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2分钟。

观察与终止：在显微镜下观察，待大部分细胞变圆并脱落时，迅速拿回操作台，轻敲瓶壁使细胞脱落，加入2-3 mL完全培养基终止消化。

收集细胞：轻轻吹打均匀，将细胞悬液转移至无菌离心管，1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

重悬与接种：加入1-2 mL新鲜完全培养基重悬细胞，按1:2至1:3的比例接种到新的含8 mL新鲜培养基的培养瓶中。

培养：置于37℃、5% CO₂培养箱中继续培养，建议每周传代2-3次。

3. 冻存操作：

收集细胞：按传代方法收集处于良好生长状态（对数生长期）的细胞。

洗涤与计数：离心后弃上清，用PBS清洗一遍，弃尽PBS。加入1 mL血清重悬细胞并进行计数。

配制冻存液：根据细胞数量加入预冷的无血清细胞冻存液，使细胞密度达到5×10⁶ ~ 1×10⁷ cells/mL，轻轻混匀。

分装：将细胞悬液分装至冻存管，每管1 mL，并做好清晰标识。

程序冻存：将冻存管放入程序降温盒或直接放入-80℃冰箱，24小时后转入液氮中长期储存。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。