一、基本信息

1. 产品编号：HY-A567

2. 产品名称：BxPC-3-Luc（人胰腺腺癌荧光素酶标记细胞）

3. 英文名称：BxPC-3-Luc Human Pancreatic Adenocarcinoma Luciferase Reporter Cell Line

4. 细胞别称：BxPC3-Luc、BxPC-3-LUC、BxPC-3荧光素酶标记细胞

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：61岁；女性

7. 组织来源：胰腺（原位腺癌）

8. 疾病背景：胰腺腺癌

9. 细胞类型：荧光素酶报告基因稳定细胞系

10. 宿主细胞：BxPC-3

11. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁生长

12. 生长特性：贴壁生长

13. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

14. 传代代数：10代以内

15. RRID：CVCL_0236

16. 保藏机构：ATCC; CRL-1687

17. 抗性标记：嘌呤霉素（Puromycin）抗性

18. 生物安全等级：BSL-1

19. 质量检测：无菌检测合格，无支原体污染，STR鉴定正确

二、细胞特征

1. 背景介绍：BxPC-3-Luc 由经典人胰腺癌细胞系 BxPC-3 经慢病毒稳定转染萤火虫荧光素酶构建，带嘌呤霉素抗性。宿主 BxPC-3 源自 61 岁女性胰腺腺癌患者（ATCC CRL-1687），是胰腺癌研究中被广泛引用的经典细胞系——胰腺癌约 90% 携带 KRAS 突变，而 BxPC-3 为 KRAS 野生型，在胰腺癌分子机制与靶向研究中常作为 KRAS 野生型对照模型使用（与 PANC-1、MIA PaCa-2 等 KRAS 突变株构成对照体系）。

2. 发光性能：组成型表达荧光素酶，发光信号与活细胞数量正相关，适合活体成像实时追踪胰腺癌原位/皮下模型的体内生长、转移及药物反应——弥补野生型 BxPC-3 无法体内示踪的短板。

3. 形态与生长：上皮细胞样，贴壁生长，成片/岛状融合，增殖稳定，传代性能好。

三、培养条件

1. 基础培养基：RPMI-1640

2. 培养基配方：89% RPMI-1640 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 筛选维持：可添加嘌呤霉素维持 Luc 表达稳定（常规培养亦可不加）

4. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

5. 推荐传代比例：1:2–1:4

6. 推荐换液频率：2–3 次/周

7. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-EDTA

8. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

9. 倍增时间：约24–48小时

四、产品应用

1. 胰腺癌活体成像：原位/皮下胰腺癌模型的生长与转移实时无创监测

2. KRAS 通路研究：KRAS 野生型背景下的胰腺癌分子机制、KRAS 依赖性对比研究

3. 化疗耐药研究：吉西他滨等一线化疗药物敏感性及获得性耐药机制研究

4. 靶向药物筛选：抗胰腺癌候选药物的体内外活性评价、联合用药方案研究

5. 报告基因检测：荧光素酶活性检测阳性对照、启动子活性分析

五、产品优势

1. 宿主权威：ATCC CRL-1687 保藏，胰腺癌研究引用广泛

2. 模型稀缺：KRAS 野生型胰腺癌稀有对照模型——对照实验价值高

3. 发光稳定：慢病毒稳定整合，带嘌呤霉素抗性便于筛选维持

4. 质量可靠：无菌检测合格，无支原体污染，STR鉴定正确

六、培养方法

1. 细胞复苏：将完全培养液置 37℃ 水浴预热 30 分钟；从液氮取出冻存管暂放 -80℃ 让残余液氮挥发；复苏时稍稍甩动去除残留干冰和液氮，迅速用镊子夹住盖子放入 37℃ 水浴快速晃动（水不能没过盖子），约 1 分钟完全融化；超净台内酒精棉球擦拭消毒，将细胞悬液转入含 6–7 mL 预温完全培养基的 15 mL 离心管，1100 rpm室温离心 4 分钟；弃上清，1 mL 新鲜完全培养基重悬至单细胞悬液，转入装有 4 mL 完全培养基的 T25 培养瓶（或 6 cm 皿），37℃、5% CO₂ 饱和湿度培养。注意：请勿直接复苏到 T75 培养瓶或 10 cm 培养皿。

2. 细胞传代：细胞汇合度达80%–90%时，尽量吸净原培养基，加 2 mL 左右 PBS 轻轻晃动润洗后吸弃；加入 1 mL 左右 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 轻轻晃动浸润所有细胞，放入培养箱消化——显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时即可终止（全程不要拍打培养瓶）；加入 3 mL 含血清培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并反复吹打成尽量单颗细胞悬液；收集细胞悬液 1200 rpm离心3分钟，弃上清，加新鲜培养基混匀，按比例接种新瓶，补足培养基，拧松瓶盖或用透气瓶盖培养。

3. 细胞冻存：无血清冻存液重悬细胞，程序降温后液氮长期保存；建议在较低代次冻存备份。

注意事项：本产品仅供科学研究使用，不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。

七、相关产品

1. 相关产品：PANC-1-Luc（人胰腺癌荧光素酶细胞）、MIA PaCa-2-Luc（人胰腺癌荧光素酶细胞）、BxPC-3（人胰腺癌细胞）