一、基本信息

1. 产品编号：HY-A117

2. 产品名称：Calu-3 人肺腺癌细胞

3. 英文名称：Human Lung Adenocarcinoma Cell Line

4. 细胞别称：CaLu-3; CALU-3; Calu 3; Calu3; CALU3

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：25岁，男性

7. 组织来源：肺；转移灶；胸水腺癌

8. 疾病背景：肺腺癌

9. 细胞类型：上皮细胞样

10. 生长特性：贴壁生长

11. 细胞形态：上皮细胞样

12. 染色体核型：56~63，XX，有若干染色体易位

13. 细胞代数：10代以内

14. 生物安全等级：1级

15. 产品规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶 或 1 mL冻存管

16. 支原体检测：阴性

17. 保藏机构：ATCC (HTB-55)；BCRJ (0264)

18. 倍增时间：约35-45小时

19. 致瘤性：是，在裸鼠体内可形成分化良好的I级腺癌。

20. 抗原/基因表达：血型A型；Rh阳性

21. STR鉴定：已通过STR鉴定（位点信息见说明），提供鉴定图片。

22. 运输方式：复苏发货（T25瓶，免运输费）

                        冻存发货（冻存管，需加干冰运输费）

23. 供应限制：仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

二、细胞特征

1. 形态特征：典型的贴壁上皮细胞样形态。

2. 来源背景：从一名25岁白人男性肺腺癌患者的胸水中分离建系，该患者曾接受过环磷酰胺、博来霉素、阿霉素治疗。

3. 生长特性：细胞容易成团，贴壁时间较长，生长速度相对较慢，此为其固有特性，属正常现象。

4. 功能特性：具有腺癌细胞特征，接种至裸鼠可成瘤；也可作为转染宿主用于基因功能研究。

三、培养条件

1. 基础培养基：MEM

2. 完全培养基：90% MEM + 10% 胎牛血清 (FBS) + 1% 青霉素-链霉素双抗溶液 (PS)

3. 培养环境：温度：37℃

                      气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳

4. 生长模式：贴壁生长

三、产品应用

1. 肺癌基础与转化研究：研究肺腺癌的细胞生物学、分子机制、信号通路、药物耐药性及转移特性。

2. 药物筛选与药效学：用于评估化疗药物、靶向药物、免疫疗法及新型化合物对肺腺癌细胞的增殖抑制、凋亡诱导和细胞周期影响。

3. 肿瘤模型构建：利用其裸鼠致瘤性，构建体内肺腺癌移植瘤模型，用于临床前药效评价。

4. 基因功能与转染研究：可作为转染宿主，用于基因过表达、干扰或基因编辑研究。

5. 呼吸道上皮功能研究：常用于研究气道黏液分泌、离子转运及上皮屏障功能。

四、产品优势

1. 经典且特性明确：Calu-3是肺腺癌研究中广泛使用且特征明确的经典细胞系，背景信息清晰（包括STR图谱、致瘤性、治疗史）。

2. 高质量保证：提供10代以内的细胞，确保遗传稳定性；经过STR鉴定和支原体检测，品质可靠。

3. 应用场景多样：兼具体外研究（药物筛选、基因功能）和体内建模（裸鼠成瘤）的应用价值。

4. 发货灵活：提供复苏和冻存两种发货方式，方便不同实验室需求。

五、培养方法

1. 收货与复苏处理：

（1）T25瓶（复苏发货）：收到细胞后，观察细胞瓶是否完好，用75%酒精消毒瓶壁。将T25瓶置于37℃、5% CO₂培养箱中静置2-4小时，以稳定细胞状态。之后可更换新鲜完全培养基，继续培养。

（2）冻存管（冻存发货）：收到细胞后，应立即转入液氮冻存或直接复苏。复苏时，将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。加入4 mL完全培养基混合均匀。1000 rpm离心3分钟，弃去上清。加入1-2 mL新鲜完全培养基重悬细胞。将细胞悬液接种至含适量培养基的T25瓶或10cm培养皿中，置于培养箱培养过夜。第二天更换新鲜培养基并检查细胞密度。

2. 传代操作（以T25瓶为例）：时机判断：当细胞密度达到80%-90% 时进行传代。

                                                洗涤：弃去旧培养上清，用不含钙、镁离子的PBS轻轻润洗细胞1-2次。

                                                消化：加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA），使之浸润所有细胞，然后弃去消化液（不同于常规保留少量消化液的方法），将培养瓶置于37℃培养箱中消化约1分钟。

                                                 观察与终止：在显微镜下观察，待大部分细胞变圆并脱落时，迅速拿回操作台，轻敲瓶壁使细胞脱落，加入少量完全培养基终止消化。

                                                 收集细胞：将细胞悬液转移至无菌离心管，1000 rpm离心4分钟，弃去上清。

                                                 重悬与接种：加入1-2 mL新鲜完全培养基重悬细胞，按1:2的比例（即1个T25瓶传至2个新的T25瓶或2个6cm培养皿）接种到含8 mL新鲜培养基的新培养瓶中。

                                                 静置培养：接种后24小时内尽量不要移动培养瓶，以利于细胞贴壁。

                                                 培养观察：置于37℃、5% CO₂培养箱中继续培养，定期观察。

3. 冻存操作：收集细胞：按传代方法收集处于良好生长状态的细胞。

                      计数与重悬：离心后弃上清，用PBS清洗一遍，弃尽PBS。用1 mL血清重悬细胞并进行计数。

                      配制冻存液：根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度达到5x10⁶ ~ 1x10⁷ cells/mL，轻轻混匀。

                      分装：将细胞悬液分装至冻存管，每管1 mL，并做好标识。

                      冻存：将冻存管放入程序降温盒或直接放入-80℃冰箱，24小时后转入液氮中长期储存。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。