一、基本信息

1. 产品编号：HY-A025

2. 产品名称：COLO320 HSR 人结直肠腺癌细胞

3. 英文名称：Human Colorectal Adenocarcinoma Cell Line

4. 细胞别称：COLO320 HSR

5. 种属来源：人

6. 组织来源：结直肠

7. 疾病背景：结直肠腺癌

8. 细胞类型：上皮细胞样

9. 生长特性：贴壁生长

10. 细胞形态：上皮细胞样

11. 产品规格：1x10⁶ cells/T25培养瓶 或 1 mL冻存管

12. 细胞代数：10代以内

13. 支原体检测：阴性

14. 运输方式：复苏发货（T25瓶，免运输费）

                        冻存发货（冻存管，需加干冰运输费）

15. 供应限制：仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

二、细胞特征

1. 形态特征：典型的贴壁上皮细胞样形态。

2. 遗传背景：该细胞系源自人结直肠腺癌组织，是研究结直肠癌的常用模型。

3. 功能特性：具有腺癌细胞的生长和增殖特性，适用于癌症相关研究。

三、培养条件

1. 基础培养基：RPMI 1640 + 10% 胎牛血清 (FBS) + 1% 青霉素-链霉素双抗溶液 (PS)

2. 专用培养基：COLO320HSR细胞专用培养基（货号：HY-CSC-176）

3. 培养环境：温度：37℃

                      气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳

4. 生长模式：贴壁生长

四、产品应用

1. 结直肠癌基础研究：研究结直肠癌的细胞生物学、分子机制、信号通路和遗传改变。

2. 药物筛选与药效评估：用于测试化疗药物、靶向药物、中药提取物或新型化合物对结直肠癌细胞的增殖抑制、凋亡诱导和耐药性影响。

3. 癌症转移与侵袭研究：作为模型研究结直肠癌细胞的迁移、侵袭和转移潜能。

4. 基因功能研究：可用于基因过表达、敲低或敲除实验，研究特定基因在结直肠癌发生发展中的作用。

五、产品优势

1. 经典模型：COLO320 HSR是结直肠癌研究领域公认的经典细胞系之一，应用广泛，数据可比性强。

2. 状态保证：提供10代以内的细胞，确保细胞活力和遗传背景的稳定性。

3. 无支原体污染：经过严格检测，确保无支原体污染。

4. 发货灵活：提供复苏（T25瓶）和冻存（冻存管）两种发货方式，满足不同实验需求。

5. 现货供应：缩短实验准备时间。

六、培养方法

1. 收货与复苏处理：

（1）T25瓶（复苏发货）：收到细胞后，观察细胞瓶是否完好，用75%酒精消毒瓶壁。将T25瓶置于37℃、5% CO₂培养箱中静置2-4小时，以稳定细胞状态。之后可更换新鲜完全培养基，继续培养或进行传代。

（2）冻存管（冻存发货）：收到细胞后，应立即转入液氮冻存或直接复苏。复苏时，将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。加入4 mL完全培养基混合均匀。1000 rpm离心3分钟，弃去上清。加入1-2 mL新鲜完全培养基重悬细胞。将细胞悬液接种至含适量培养基的T25瓶或10cm培养皿中，置于培养箱培养过夜。第二天更换新鲜培养基并检查细胞密度。

2. 传代操作（以T25瓶为例）：时机判断：当细胞密度达到80%-90%时进行传代。

                                                  洗涤：弃去旧培养上清，用不含钙、镁离子的PBS轻轻润洗细胞1-2次。 

                                                  消化：加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA），使之浸润所有细胞，然后弃去大部分消化液，保留少量覆盖瓶底。

                                                  孵育：将培养瓶置于37℃培养箱中消化约1分钟。

                                                  观察与终止：在显微镜下观察，待大部分细胞变圆并脱落时，迅速拿回操作台，轻敲瓶壁使细胞脱落，加入少量完全培养基终止消化。

                                                  收集细胞：将细胞悬液转移至无菌离心管，1000 rpm离心4分钟，弃去上清。

                                                  重悬与接种：加入1-2 mL新鲜完全培养基重悬细胞，按1:2的比例（即1个T25瓶传至2个新的T25瓶或2个6cm培养皿）接种到含8 mL新鲜培养基的新培养瓶中。

                                                  培养：置于37℃、5% CO₂培养箱中继续培养。

3. 冻存操作：收集细胞：按传代方法收集处于良好生长状态的细胞。

                      计数与重悬：离心后弃上清，用PBS清洗一遍，弃尽PBS。用少量血清重悬细胞并进行计数。

                      配制冻存液：根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度达到5x10⁶ ~ 1x10⁷ cells/mL，轻轻混匀。

                      分装：将细胞悬液分装至冻存管，每管1 mL，并做好标识。

                      冻存：将冻存管放入程序降温盒或直接放入-80℃冰箱，24小时后转入液氮中长期储存。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。