一、基本信息

1. 产品编号：HY-A039

2. 细胞名称：Hep G2.2.15（人肝癌细胞）

3. 英文名称：Human Hepatocellular Carcinoma Cell Line Hep G2.2.15

4. 种属来源：人

5. 组织来源：15岁男性肝母细胞瘤组织

6. 疾病特征：乙型肝炎病毒阳性肝癌

7. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁生长

8. 生长特性：贴壁生长，有堆叠特性

9. 培养基：EMEM(MEM+NEAA) + 10% FBS + 1% P/S + 0.4mg/mL G418

10. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

11. 生物安全等级：BSL-2

12. STR鉴定：提供完整鉴定报告

二、细胞特征

1. 病毒特征：稳定整合HBV D型基因组，含有HBV D型基因组的两个首尾二聚体，持续分泌HBV病毒颗粒。

2. 分子特征：对G418具有抗性，表达双皮质素（DCX）标志物，具有稳定的HBV表达特性。

3. 生物学特性：比亲代HepG2细胞增殖活性较低，裸鼠致瘤性较低，保持肝细胞分化特性。

三、培养条件

1. 基础培养基：EMEM（MEM添加非必需氨基酸）

2. 血清添加：10%胎牛血清

3. 选择性抗生素：0.4mg/mL G418

4. 常规抗生素：1%青霉素-链霉素双抗

5. 培养环境：37℃，5% CO₂，95%空气

6. 传代比例：1:2至1:5

7. 传代时机：细胞密度达80%-90%

8. 传代频率：3-4天传代一次

9. 换液频率：每2-3天更换新鲜培养基

四、产品应用

1. 病毒学研究：乙型肝炎病毒复制机制、HBV生命周期研究。

2. 药物筛选：抗HBV药物体外筛选、抗肝癌药物疗效评价。

3. 肝病研究：HBV相关肝癌发病机制、肝细胞对干扰素应答研究。

4. 转化医学：病毒致癌机制探讨、新型治疗策略开发。

五、产品优势

1. 病毒模型专一性：稳定表达完整HBV基因组

2. 研究价值突出：HBV相关肝病研究的黄金标准

3. 稳定性好：长期稳定分泌病毒抗原

4. 应用广泛：全球最常用的HBV研究模型之一

5. 功能完整：能够分泌HBsAg、HBeAg和Dane颗粒

六、培养方法

1. 复苏操作：37℃水浴快速解冻，1000rpm离心5分钟，重悬于EMEM完全培养基，37℃培养过夜，次日换液。

2. 传代流程：PBS缓冲液润洗细胞1-2次，0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化，按1:2至1:5比例接种传代。

3. 冻存条件：冻存液：完全培养基+10% DMSO

                      程序冻存：-80℃过夜→液氮储存

七、注意事项

1. 生长特性：注意细胞有堆叠生长特点

2. 消化控制：消化后需2天才能完全贴壁摊开

3. 抗生素维持：必须持续添加G418维持选择性压力

4. 生物安全：BSL-2等级，需在相应实验室操作

5. 污染防控：严格无菌操作，定期支原体检测

6. 培养基专用：必须使用含G418的选择性培养基

7. 状态监测：密切观察病毒抗原分泌情况