Product Center
产品中心
1. 产品编号：HY-B012
2. 产品名称：PC-12（低分化）大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞
3. 英文名称：Rat Adrenal Pheochromocytoma Cells (Undifferentiated)
4. 细胞别称：PC12低分化
5. 种属来源：大鼠
6. 年龄性别：雄性
7. 组织来源：肾上腺嗜铬细胞瘤
8. 生长特性：贴壁/悬浮混合生长
9. 细胞形态：成团状悬浮、半贴壁；小的形状不规则细胞
10. 细胞代数：10代以内
11. 使用权限：A类
12. 生物安全等级：1级
13. 产品规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶 或 1 mL冻存管包装
14. 支原体检测：阴性
15. 保藏机构：中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心
16. 培养基：RPMI-1640 + 5% FBS + 10% 马血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗
17. 培养条件：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳
18. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
19. 运输方式：复苏发货（T25瓶，免运输费）；冻存发货（冻存管，需加干冰运输费）
20. 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
1. 形态特征：独特的贴壁/悬浮混合生长模式。大部分细胞以成团状悬浮生长，伴有少量松散贴壁的细胞。细胞体积较小，形状不规则。
2. 背景介绍：来源于能移植的雄性大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤。
3. 分化状态与特性：为低分化（未分化/去分化）表型。
3. 神经生长因子（NGF）响应：细胞表达NGF受体，NGF可诱导其向神经元样细胞分化，长出神经突，是研究神经分化的经典模型。
4. 儿茶酚胺分泌：不合成肾上腺素，但保留嗜铬细胞瘤细胞分泌其他儿茶酚胺类物质（如多巴胺）的能力。
5. 培养特性：操作需特别小心，因其生长方式特殊，易在换液、传代过程中丢失。
1. 基础培养基：RPMI-1640
2. 血清添加：5% 胎牛血清 (FBS) + 10% 马血清
3. 抗生素：1% 青霉素-链霉素双抗
4. 培养环境：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳
5. 生长模式：贴壁/悬浮混合生长（以悬浮成团为主）
1. 神经分化与发育研究：经典模型，用于研究神经生长因子（NGF） 诱导的神经分化机制、神经突生长、神经元特异性基因表达及信号通路（如TrkA, MAPK, PI3K/Akt）。
2. 神经毒性学与神经保护研究：用于评估环境毒素、药物对神经细胞的毒性作用，以及筛选具有神经保护作用的化合物。
3. 神经退行性疾病研究：作为体外模型，用于研究帕金森病等与多巴胺能神经元相关的疾病机制及药物筛选。
4. 儿茶酚胺代谢与分泌研究：用于研究嗜铬细胞/神经内分泌细胞的儿茶酚胺合成、储存、释放及调控机制。
5. 细胞凋亡与自噬研究：用于研究各种刺激（如氧化应激、营养剥夺）诱导的神经细胞凋亡与自噬过程。
1. 经典的神经细胞模型：是神经科学领域应用最广泛、最经典的可诱导分化神经细胞系之一，文献支持丰富。
2. 明确的NGF响应性：对NGF诱导分化反应明确、可重复，是研究神经营养因子作用的理想工具。
3. 独特的生长与分化特性：同时具备增殖（低分化状态）和分化（NGF诱导后）两种可研究的状态，应用灵活。
4. 来源可靠：源自权威保藏机构，细胞背景清晰。
1. 收货与复苏处理：
（1）T25瓶（复苏发货）：收到细胞后，观察细胞瓶是否完好，用75%酒精消毒瓶壁。将T25瓶置于37℃、5% CO₂培养箱中静置2-4小时，以便稳定细胞状态。静置后，在显微镜下观察细胞状态（悬浮团块及贴壁细胞）。
（2）冻存管（冻存发货）：收到细胞后，应立即转入液氮冻存或直接复苏。复苏时，将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。加入4 mL完全培养基混合均匀。1000 rpm离心3分钟，弃去上清液。加入1-2 mL新鲜完全培养基重悬细胞。将细胞悬液加入含适量完全培养基的T25瓶或6cm培养皿中，置于培养箱培养。第三天换液并检查细胞密度和生长状态。
2. 传代操作（贴壁/悬浮混合细胞）【需特别小心】
时机判断：当悬浮细胞团块增多、培养基颜色变黄或贴壁细胞密度达80%-90%时进行传代。
收集悬浮细胞：小心地将培养瓶中的培养基和悬浮的细胞团块全部吸出，转移至离心管中。1000 rpm离心5分钟，弃上清，细胞重悬于少量新鲜培养基中备用。此步骤至关重要，避免丢失悬浮细胞。
处理贴壁细胞：瓶内剩余少量贴壁细胞，用不含钙、镁离子的PBS极其轻柔地润洗1次（润洗液也会含有脱落的细胞，需回收至上述离心管中）。
消化：加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA），覆盖瓶底，37℃消化1-3分钟。
观察与终止：显微镜下观察，见大部分细胞变圆脱落时，立即加入少量完全培养基终止消化，并轻轻吹打瓶底使细胞脱落。
合并与收集：将消化下来的细胞悬液与步骤2中收集的悬浮细胞合并，1000 rpm离心5分钟，弃上清。
重悬与接种：加入1-2 mL新鲜完全培养基重悬所有细胞。按1:2至1:3的比例，将细胞悬液接种到含6-8 mL新鲜完全培养基的新培养瓶中。
培养：置于37℃、5% CO₂培养箱中静置培养，定期观察。
3. 冻存操作：
收集细胞：按上述传代方法中的步骤1-6，收集处于良好生长状态的所有细胞（悬浮+贴壁）。
洗涤与计数：离心后弃上清，用PBS清洗一遍，弃尽PBS。加入1 mL血清重悬细胞并进行计数。
配制冻存液：根据细胞数量加入预冷的无血清细胞冻存液，使细胞密度达到5×10⁶ ~ 1×10⁷ cells/mL，轻轻混匀。
分装：将细胞悬液分装至冻存管，每管1 mL，并做好清晰标识。
程序冻存：将冻存管放入程序降温盒或直接放入-80℃冰箱，24小时后转入液氮中长期储存。
1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。
2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。
3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。
4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。
5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。
6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。
7. 用途限制：仅限于科研用途。
