一、基本信息
1. 产品编号:HY-C023
2. 英文名称:Mouse Dendritic Cells, DC2.4
3. 细胞别称:DC2.4;小鼠骨髓来源树突状细胞
4. 种属来源:小鼠(C57BL/6)
5. 组织来源:骨髓
6. 细胞类型:树突状细胞
7. 生长特性:半贴壁半悬浮混合生长
8. 细胞形态:上皮样
9. 支原体检测:无支原体污染
10. 背景介绍:通过用表达鼠GM-CSF和myc、raf癌基因的逆转录病毒载体转导C57BL/6小鼠骨髓分离物而产生的永生化鼠树突细胞
二、细胞特征
1. 形态特征:上皮样细胞,半贴壁半悬浮混合生长
2. 功能特性:具有吞噬和呈递MHC I类和II类分子上抗原的能力
3. 特异性标记:表达树突细胞特异性标记
4. 免疫功能:调节适应性免疫反应和先天免疫反应
5. 稳定性:永生化细胞系,长期培养仍保持树突细胞特性
三、培养条件
1. 基础培养基:RPMI-1640
2. 添加成分:RPMI-1640 + 10% FBS + 1% PS + 10ng/mL murine GM-CSF
3. 培养环境:温度:37℃;气相:5% CO₂ + 95%空气;湿度:70%-80%
4. 传代比例:1:2至1:5
5. 冻存条件:90%血清 + 10% DMSO
四、产品应用
1. 免疫学研究:树突细胞功能和抗原呈递机制研究
2. 疫苗开发:新型疫苗佐剂和递送系统研究
3. 肿瘤免疫:肿瘤免疫治疗和免疫检查点研究
4. 自身免疫:自身免疫性疾病发病机制研究
5. 感染免疫:病原体感染免疫应答研究
6. 药物筛选:免疫调节药物筛选平台
7. 免疫调节:Toll样受体和先天免疫调节研究
五、产品优势
1. 永生化特性:克服了原代树突细胞难以体外维持的困难
2. 功能完整:保持树突细胞的吞噬和抗原呈递功能
3. 应用广泛:在免疫学多个研究领域均有重要应用价值
4. 技术成熟:培养和实验技术体系完善
六、培养方法
1. 收货处理:T25瓶:75%酒精消毒瓶壁,37℃培养箱静置2-4小时;冻存管:收到后立即转入液氮冻存或直接复苏。
2. 复苏操作:37℃水浴中迅速摇晃解冻冻存管,加入4-6mL完全培养基混合均匀,1000rpm离心3-5分钟,完全培养基重悬细胞,接种至培养瓶。
3. 传代操作(特殊注意事项):先收集悬浮细胞到离心管中,PBS润洗细胞(PBS也要回收),使用细胞刮刀刮拭培养表面收集贴壁细胞,合并所有细胞,离心重悬,按1:2-1:5比例接种。
4. 冻存操作:按照细胞传代过程收集细胞,调整细胞密度至1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL,程序降温:4℃→-20℃→-80℃→液氮。
七、注意事项
1. 无菌操作:所有操作在生物安全台内进行。
2. 传代时机:细胞密度达80%-90%时传代。
3. 消化控制:胰蛋白酶消化时间不宜过长。
4. 密度维持:保持适宜细胞生长密度。
5. 定期鉴定:建议定期进行STR鉴定。
6. 代次控制:建议使用低代次细胞进行实验。
7. 用途限制:仅限于科研用途。