一、基本信息

1. 产品编号：HY-C028

2. 英文名称：Mouse Embryonic Osteoblast Cells

3. 细胞别称：MC3T3-E1；小鼠胚胎成骨细胞前体细胞

4. 种属来源：小鼠

5. 年龄性别：新生小鼠

6. 组织来源：胚胎组织

7. 细胞类型：成骨细胞前体细胞

8. 生长特性：贴壁生长

9. 细胞形态：成纤维细胞样

10. 细胞代数：建议10代以内使用

11. 支原体检测：无支原体污染

12. 生物安全等级：1级

13. 背景介绍：MC3T3-E1细胞有多个亚克隆，可作为体外研究成骨细胞分化的良好模型

14. 保藏机构：ATCC CRL-2595

15. 致瘤性：在免疫抑制小鼠中可形成骨样小体

16. 染色体数：60~70

二、细胞特征

1. 形态特征：典型成纤维细胞样，长梭形

2. 功能特性：具有成骨细胞分化潜能

3. 基因表达：表达胶原蛋白等骨基质成分

4. 分化能力：可作为研究ECM信号通路作用的模型

5. 稳定性：遗传背景稳定，分化特性明确

三、培养条件

1. 基础培养基：MEMα

2. 添加成分：90% MEMα + 10% FBS + PS

3. 培养环境：温度：37℃；气相：5% CO₂ + 95%空气；湿度：饱和湿度。

4. 培养基体积：T25瓶：8mL；10cm皿：适量；换液周期：根据细胞生长情况。

5. 传代密度：80%-90%进行传代；传代比例：1:2至1:3。

6. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

四、产品应用

1. 成骨分化：成骨细胞分化机制研究

2. 骨代谢：骨代谢相关信号通路研究

3. 药物筛选：骨质疏松治疗药物评价

4. 组织工程：骨组织工程和再生医学研究

5. 基因功能：成骨相关基因功能分析

6. 疾病模型：骨相关疾病发病机制研究

7. 发育生物学：骨骼发育过程研究

8. 细胞治疗：骨缺损修复细胞治疗研究

五、产品优势

1. 分化模型：成骨细胞分化的经典研究模型

2. 应用成熟：技术路线成熟，实验结果可靠

3. 信号通路：特别适合ECM信号通路作用研究

4. 功能稳定：长期培养仍保持成骨分化特性

六、培养方法

1. 收货处理：T25瓶：75%酒精消毒瓶壁，37℃培养箱静置2-3小时；冻存管：收到后立即转入液氮冻存或直接复苏。

2. 传代操作：弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次，加1mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA），浸润所有细胞后弃去消化液，37℃培养箱消化1-3分钟，显微镜下观察细胞消化情况，加入少量培养基终止消化，离心重悬后按1:2比例分装。

3. 冻存操作：收集细胞及培养液，离心4分钟，PBS清洗后，加1mL血清重悬细胞，加入无血清细胞冻存液，调整细胞密度，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，-80℃冰箱24小时后转入液氮储存。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。