一、基本信息
1. 产品编号:HY-C034
2. 英文名称:Alpha Mouse Liver 12
3. 细胞别称:AML-12;小鼠肝细胞系
4. 种属来源:小鼠
5. 组织来源:肝脏组织
6. 细胞类型:肝实质细胞
7. 生长特性:贴壁生长
8. 细胞形态:上皮样细胞
9. 细胞代数:建议15代以内使用
10. 支原体检测:无支原体污染
11. 生物安全等级:1级
12. 背景介绍:AML12细胞来源于转染人TGFα基因的CD1小鼠肝细胞
13. 保藏机构:ATCC CRL-2254
二、细胞特征
1. 形态特征:典型上皮样细胞形态,多边形排列紧密
2. 功能特性:保持肝细胞特异性功能,表达白蛋白
3. 代谢能力:具有肝细胞典型的代谢功能
4. 分化状态:分化良好的肝细胞系
5. 基因表达:表达肝细胞特异性标志物
6. 稳定性:遗传背景稳定,适合长期研究
三、培养条件
1. 基础培养基:DMEM/F12
2. 添加成分:DMEM/F12 + 10% FBS + 1% ITS(胰岛素-转铁蛋白-硒) + 40ng/mL地塞米松 + 1% P/S
3. 培养环境:温度:37℃;气相:5% CO₂ + 95%空气;湿度:饱和湿度
4. 培养基体积:T25瓶:8-10mL;10cm皿:12-15mL;换液周期:2-3天
5. 传代比例:1:3至1:4;传代频率:每周2-3次
6. 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
四、产品应用
1. 肝脏毒性:药物肝毒性评价和筛选
2. 代谢研究:肝脏代谢功能和机制研究
3. 肝病模型:肝脏疾病发生发展研究
4. 药物研发:肝脏相关药物代谢研究
5. 基因功能:肝脏特异性基因功能分析
6. 信号通路:肝细胞信号转导机制研究
7. 蛋白质合成:肝脏蛋白质合成功能研究
8. 体外模型:肝脏生理和病理体外模型
五、产品优势
1. 功能完整:保持肝细胞主要生理功能
2. 稳定性好:长期培养仍保持肝细胞特性
3. 应用广泛:肝生物学研究的优选模型
4. 技术成熟:培养条件稳定可靠
六、培养方法
1. 收货处理:T25瓶:表面消毒后,37℃培养箱静置2-4小时;冻存管:直接放入液氮或-80℃保存。
2. 传代操作:弃去培养上清,用PBS轻轻润洗细胞,加入适量胰酶消化液,37℃消化2-4分钟,显微镜下观察细胞变圆脱落,加入完全培养基终止消化,收集细胞悬液,1000rpm离心5分钟,重悬细胞,按适当比例分装至新培养瓶,补足培养基,继续培养。
3. 冻存操作:消化收集细胞,离心获得细胞沉淀,加入配置好的冻存液重悬细胞,调整细胞密度至合适浓度,分装至冻存管,程序降温后液氮储存。
七、注意事项
1. 无菌操作:所有操作在生物安全台内进行。
2. 传代时机:细胞密度达80%-90%时传代。
3. 消化控制:胰蛋白酶消化时间不宜过长。
4. 密度维持:保持适宜细胞生长密度。
5. 定期鉴定:建议定期进行STR鉴定。
6. 代次控制:建议使用低代次细胞进行实验。
7. 用途限制:仅限于科研用途。