一、基本信息

1. 产品编号：HY-G002

2. 产品名称：A72（犬癌细胞）

3. 英文名称：A72 Canine Cancer Cells

4. 细胞别称：A72; 犬癌细胞

5. 种属来源：狗（犬）

6. 组织来源：癌组织

7. 细胞规格：1×10⁶ cells/T25 培养瓶或 1 mL 冻存管

8. 生长特性：贴壁生长

9. 细胞形态：成纤维细胞样

10. 传代代数：10 代以内

11. 支原体检测：阴性

12. 鉴定方式：种属鉴定

二、细胞特征

1. 背景介绍：A72 犬癌细胞是从小犬癌组织中分离建立的贴壁细胞系，经种属鉴定确认为犬源细胞。该细胞呈成纤维细胞样形态，是研究犬类肿瘤发生发展机制、抗肿瘤药物筛选及比较肿瘤学（comparative oncology）的重要体外模型。A72 细胞在犬癌研究、兽医药理及人犬肿瘤相似性研究中具有重要应用价值。

2. 细胞类型：肿瘤细胞

3. 肿瘤类型：犬癌细胞

4. 种属鉴定：已进行种属鉴定，确认为犬源

5. 生物安全等级：BSL-2

6. 质量检测：种属鉴定正确，支原体检测阴性

三、培养条件

1. 基础培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（青霉素-链霉素）

2. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

3. 推荐传代比例：1:2

4. 推荐换液频率：2–3 次/周

5. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA

6. 消化时间：1 分钟

7. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

四、产品应用

1. 犬类肿瘤发生发展机制研究

2. 比较肿瘤学及人犬肿瘤相似性研究

3. 兽用抗肿瘤药物筛选与药效评价

4. 犬癌转移与侵袭机制探索

5. 肿瘤免疫治疗及疫苗开发研究

6. 犬类肿瘤分子标志物鉴定

7. 肿瘤微环境及血管生成研究

五、产品优势

1. 种属鉴定明确：经种属鉴定确认为犬源细胞，确保细胞身份准确无误

2. 犬癌研究标准模型：国际公认的犬癌细胞系，广泛用于比较肿瘤学及兽医药理研究

3. 成纤维样形态典型：细胞形态清晰，贴壁生长稳定，易于观察与操作

4. 应用价值高：适用于犬癌机制、药物筛选及人犬肿瘤转化医学等多领域研究

5. 质控严格：经支原体检测阴性，培养状态稳定，批次一致性佳

六、培养方法

1. 收货处理：T25 瓶：75% 酒精消毒瓶壁，37℃ 培养箱放置 2–4 小时稳定细胞状态；冻存管：收到后立即转入液氮或直接复苏。

2. 细胞复苏：37℃ 水浴快速解冻，加入预温培养基稀释，1000 rpm 离心 3 分钟，弃去上清液，加 1–2 mL 培养基后吹匀，将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

3. 细胞传代：细胞密度达 80%–90% 时进行传代，弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1–2 次，加入 1 mL 消化液（0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA），37℃ 培养箱中消化 1 分钟，显微镜下观察细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲培养瓶后加少量培养基终止消化，轻轻打匀后按 6–8 mL/瓶补加培养基，装入无菌离心管中，1000 rpm 离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1–2 mL 培养液后吹匀，按 1:2 比例分到新的含 8 mL 培养基的新皿中或瓶中，置于培养箱中培养。

七、注意事项

1. 运输培养基处理：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

2. 消化控制：胰蛋白酶消化时间约 1 分钟，视细胞情况而定，避免过度消化损伤细胞。

3. 传代比例：首次传代建议 1:2 传代，即 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或 2 个 6 cm 皿。

4. 冻存管收货：收到细胞后需立即转入液氮冻存或直接复苏，以保证细胞高存活率。

5. 状态记录：建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态，所拍照片将作为后续服务依据。

6. 培养条件一致：仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，确保细胞培养条件一致。

7. 定期鉴定：建议定期进行种属鉴定。

8. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

9. 用途限制：仅限于科研用途。