一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-225
2. 产品名称： NCI-H1299细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL (125mL x 4) / 125mL
6. 培养基成分： 89% RPMI-1640 + 10% FBS + 1% Penicillin-Streptomycin
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： NCI-H1299细胞专用培养基已包含 NCI-H1299细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于NCI-H1299细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

NCI-H1299（NCI-H1299细胞系）是肿瘤学，特别是非小细胞肺癌（NSCLC）研究领域中一个极其重要、应用广泛且特征明确的人源细胞模型，代表了肺腺癌这一主要亚型。该细胞系来源于淋巴结转移的肺腺癌组织，是研究肺癌转移、耐药机制、凋亡通路及信号转导的关键工具。NCI-H1299细胞以其独特的遗传背景（p53基因完全缺失）而闻名，这使得它成为研究p53非依赖性凋亡通路、细胞周期调控以及探索p53缺失肿瘤治疗策略的“黄金标准”模型。该细胞系具有肺腺癌的特征，可能表达相关的腺癌标志物，并携带NSCLC常见的遗传学改变（如KRAS突变等）。由于缺乏p53介导的凋亡通路，NCI-H1299细胞在研究DNA损伤反应、化疗药物诱导的p53非依赖性细胞死亡以及评估靶向替代凋亡通路（如BCL-2家族蛋白抑制剂）的药物方面具有不可替代的价值。与其它具有野生型p53的肺癌细胞系（如A549）相比，它为研究肿瘤异质性、不同遗传背景下药物的疗效差异以及探索克服p53突变/缺失所致治疗抵抗的新策略提供了至关重要的对照和研究平台。其核心应用包括：评估常规化疗药物（如顺铂、依托泊苷）及新型靶向药物（如针对KRAS、MEK、BCL-2等靶点）在p53缺失背景下的疗效；深入研究凋亡抵抗、自噬、DNA损伤修复等分子机制；探索上皮-间质转化（EMT）与肿瘤转移的调控网络；作为基因功能研究的理想模型（尤其适用于p53相关通路研究）；以及广泛用于建立体内转移模型，进行临床前药效学与转移机制评价。NCI-H1299细胞为深入理解肺癌，特别是p53缺陷型肺腺癌的生物学特性与治疗挑战，提供了标准化且应用广泛的实验工具。

NCI-H1299细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为肺腺癌细胞，特别是其p53缺失背景下的标准化培养与高要求实验需求而进行科学优化。NCI-H1299细胞是一种贴壁生长的肿瘤细胞，其体外培养需要提供稳定、营养均衡且能支持其高速增殖的环境，以维持其作为重要研究模型的典型特征。本产品经过精心配比，以广泛适用于多种肿瘤细胞培养的RPMI 1640培养基为基础（占89%），添加了能有效支持NCI-H1299细胞生长和贴壁的关键优化成分：即提供必需生长因子、激素和附着因子的优质胎牛血清（FBS，终浓度10%），以及用于提供更强抗菌保护的青霉素-链霉素双抗溶液（终浓度1%，高于常规浓度）。该“89% RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 双抗”的配方是针对NCI-H1299细胞培养优化后的可靠方案，其提高的抗生素浓度有助于在长期培养或复杂实验中更好地预防污染，这对于进行基因操作、药物长期处理等高通量或长时间实验尤为重要。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持NCI-H1299细胞以典型的贴壁方式快速、健康地生长，为后续的药物筛选、分子机制探索、基因功能分析或体内实验提供状态稳定且高度可靠的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可重复性，尤其是在进行涉及p53通路的精密研究或大规模药物筛选时至关重要。它为肺癌研究，特别是针对p53缺陷型肺腺癌的机制探索与治疗开发，提供了一个稳定、高效且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行配制。其主要成分如下：
1. 基础培养基： RPMI 1640培养基，占总体积的89%。
2. 血清： 优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为10%。
3. 抗生素： 青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin），终浓度为1%。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。该优化配方旨在为NCI-H1299细胞提供充足营养的同时，提供更高水平的抗菌保护，以满足其在各类复杂、长期的实验中对培养环境稳定性的高要求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。
                                     冷冻保存： -20℃避光保存，保质期可延长至12个月。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入推荐的保存温度（2-8℃或-20℃）下，避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理：可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持成分稳定。若选择-20℃保存，可根据日常实验用量进行分装，分装后也需严格避光保存。

使用前准备：使用前，请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，不影响产品正常使用。

无菌操作：所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程。尽管本产品含有较高浓度的抗生素，但严格的灭菌操作仍是避免污染（尤其是支原体污染）的关键。

培养条件：NCI-H1299细胞使用本产品时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长，通常增殖较快，需定期在显微镜下观察其形态和生长密度。

细胞传代：当细胞融合度达到80-90%时，即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后，用本专用培养基完全中和胰酶，离心收集细胞，用新鲜预热的本专用培养基重悬，并按适当比例（通常较高，如1:3至1:6）接种到新的培养容器中。

换液频率：根据细胞生长速度快的特点，通常每2-3天更换一次新鲜培养基。

实验应用：若用于药物敏感性测试（如CCK-8、MTT、克隆形成实验）、凋亡检测（Annexin V/PI流式）、细胞周期分析、基因功能研究（如siRNA/质粒转染，尤其适用于p53相关研究）、迁移/侵袭实验（Transwell）或长期耐药性诱导实验，建议在实验前将细胞用新鲜培养基换液，并确保细胞处于对数生长期且状态良好。

抗生素浓度注意：本产品含有1%双抗，高于常规浓度。在进行某些转染实验时，可能需要根据转染试剂的要求，在转染前后短暂使用不含抗生素的培养基进行处理。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持NCI-H1299这一重要研究模型的纯净性，以及确保涉及长期培养或基因操作的复杂实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均使用标准的NCI-H1299细胞进行生长验证试验。验证结果表明，细胞在本专用培养基中贴壁良好，增殖活力旺盛，细胞形态典型，确保了产品能够有效支持该细胞的最佳生长状态，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持高活力与稳定表型以进行可靠的机制研究和药物筛选至关重要，是保证肺癌研究，特别是p53相关研究实验结果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。

2. 外观检查：使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后，可能会有少量絮状物析出，不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。

3. 污染防控：为保持产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。虽然抗生素浓度较高，但仍不能替代严格的无菌操作。开封后重新保存时，务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明：本产品含有血清（10% FBS）和较高浓度的抗生素（1% 青霉素-链霉素），如无特别需要不用额外再添加血清和双抗，可以直接使用。若用于某些特定的无抗生素实验（如某些转染或病毒感染），需要提前换用无抗生素的培养基。

5. 细胞特性：NCI-H1299细胞为p53缺失的肺腺癌细胞系，具有肿瘤细胞的特性且增殖较快。需定期观察细胞形态和生长速度，建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用，避免因长期传代导致遗传漂变或表型改变。

6. 形态观察：定期在显微镜下观察细胞形态。健康的NCI-H1299细胞应贴壁良好，形态均一。如出现大量漂浮、异常颗粒或生长停滞，应排查污染或培养条件问题。

7. 生物安全：NCI-H1299细胞来源于人肿瘤组织，属于潜在生物危害材料。操作时应遵守实验室生物安全规范，在生物安全柜内进行，废弃物应按照感染性医疗废物标准进行处理。

8. 用途限制：NCI-H1299细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。