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NCI-H358细胞专用培养基

货号:HY-CSC-214

NCI-H358细胞专用培养基(货号HY-CSC-214)是即用型RPMI-1640完全培养基,专为KRAS突变肺癌培养基优化。维持细支气管肺泡癌恶性表型,适用于靶向药物筛选及信号通路机制研究,2-8℃避光保存。

一、产品详情

1. 货号:HY-CSC-214
2. 产品名称: NCI-H358细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.2-7.4
5. 产品规格: 500mL (125mL x 4) / 125mL
6. 培养基成分: RPMI-1640 + 10% FBS + 1% Penicillin-Streptomycin
7. 细菌检测: 阴性
8. 真菌检测: 阴性
9. 支原体检测: 阴性
10. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
11. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
12. 产品简介: NCI-H358细胞专用培养基已包含 NCI-H358细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于NCI-H358细胞的培养。
13. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
14. 运输条件: 冰袋冷藏运输
15. 有效期: 3个月
16. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

NCI-H358(NCI-H358细胞系)是肺癌研究,特别是细支气管肺泡癌(BAC,腺癌的一种亚型)和KRAS突变相关肺癌研究中一个具有代表性且应用广泛的细胞模型。该细胞系来源于一名男性细支气管肺泡癌患者的肺组织,是一种具有上皮细胞特性的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系。NCI-H358细胞最显著的特征是其携带特定的致癌驱动突变(如KRAS突变),同时缺失p53抑癌基因功能,这使其成为研究KRAS驱动型肺癌生物学特性、信号通路异常以及探索靶向治疗策略的“重要体外模型”。该细胞系代表了肺癌中具有特定分子特征的亚群,是研究肿瘤发生发展机制、药物敏感性及耐药性的宝贵工具。由于其来源明确、分子特征清晰且生长特性稳定,NCI-H358细胞被广泛视为模拟特定基因型肺癌病理生理过程、进行靶向药物筛选、研究细胞信号转导网络以及探索肿瘤代谢重编程的关键平台。其核心应用包括:研究KRAS等驱动基因突变在肺癌发生、增殖和存活中的作用机制;筛选和评估针对KRAS信号通路下游效应分子或合成致死靶点的抑制剂;探索肺癌细胞对化疗药物及靶向药物的敏感性或耐药机制;建立体内肿瘤模型以评估新型疗法的疗效;以及研究肺癌细胞的代谢适应性(如谷氨酰胺代谢)。由于其明确的遗传背景和稳定的生长特性,NCI-H358细胞为连接肺癌分子生物学、精准医学和靶向药物研发提供了一个可靠且标准化的研究平台。

NCI-H358细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为细支气管肺泡癌细胞(腺癌亚型)的标准化培养与特定分子表型维持需求而进行科学优化。NCI-H358细胞是一种贴壁生长、具有特定致癌基因依赖性的恶性肿瘤细胞,其体外培养需要提供均衡且丰富的营养支持,以维持其稳定的增殖能力和独特的分子特征。本产品经过精心配比,采用广泛适用于上皮细胞和肿瘤细胞培养的RPMI 1640培养基作为基础,并添加了能有效支持NCI-H358细胞稳健生长和维持其肿瘤特性的优化成分:即提供关键生长因子、激素和附着因子的优质胎牛血清(FBS,终浓度10%),以及用于预防细菌污染的青霉素-链霉素双抗溶液(终浓度1%)。该“RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 双抗”的配方是培养NCI-H358细胞及其应用于肺癌分子机制研究的通用且经典的标准方案,其成分均衡、效果稳定可靠。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持NCI-H358细胞以典型的上皮样形态贴壁生长,增殖活力良好,细胞边界清晰,为后续的基因功能研究、药物敏感性测试、信号通路分析或体内成瘤性评估提供状态一致且可靠的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可重复性,特别是在进行基于特定基因型的靶向药物筛选或机制研究中尤为重要。它为肺癌研究,尤其是针对特定分子亚型的研究,提供了一个稳定、高效且标准化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基,其配方经过优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行配制。其主要成分如下:
1. 基础培养基: RPMI 1640培养基,占总体积的主要部分。
2. 血清: 优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),终浓度为10%。
3. 抗生素: 青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin),终浓度为1%。
注:以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。该标准化配方旨在为NCI-H358细胞提供充足且均衡的营养支持与抗菌保护,满足其作为具有特定基因型肺癌细胞的生长需求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期:常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。
                                     冷冻保存: -20℃避光保存,保质期可延长至12个月。
3. 使用建议:

收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入推荐的保存温度(2-8℃或-20℃)下,避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理:可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持成分稳定。若选择-20℃保存,可根据日常实验用量进行分装,分装后也需严格避光保存。

使用前准备:使用前,请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度(若为冷冻保存,需先完全解冻)。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意,冻融后可能会有少量絮状物析出,此为正常现象,不影响产品正常使用。

无菌操作:所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程,这对于避免珍贵的肿瘤细胞系污染至关重要。

培养条件:NCI-H358细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长,形态为典型的上皮样,增殖速度适中。

细胞传代:当细胞融合度达到80-90%时,即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后,用本专用培养基完全中和胰酶,离心收集细胞,用新鲜预热的本专用培养基重悬,并按适当比例(通常为1:3至1:4)接种到新的培养容器中。

换液频率:根据细胞生长速度,通常每2-3天更换一次新鲜培养基。

实验应用:若用于药物敏感性测试(如CCK-8)、信号通路抑制剂研究、基因敲除/过表达后的表型分析或转染实验,建议在实验前将细胞用新鲜培养基换液,并确保细胞处于对数生长期且状态良好。对于某些需要无血清或低血清条件的短期刺激实验,可能需要临时更换培养基。

体内实验:如需用于裸鼠皮下成瘤等体内实验,建议在接种前确保细胞状态最佳,并进行充分的胰酶消化和活细胞计数。

开封后保存:产品开封后,若需再次储存,务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染,并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险,这2. 对于维持肿瘤细胞系的纯净性和实验结果的可靠性至关重要。
3. 理化指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.2-7.4)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合高质量细胞培养的标准。同时,对抗生素的有效浓度进行准确标定。
4. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的NCI-H358细胞进行生长验证试验。验证结果表明,细胞在本专用培养基中贴壁良好,增殖活力正常,细胞形态典型,确保了产品支持该细胞最佳生长状态的有效性,并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持稳定生长特性和特定分子表型的研究至关重要,是保证肺癌分子机制研究和靶向药物筛选实验结果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效:请务必在推荐的温度条件(2℃~8℃)下避光保存产品,并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。

2. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后,可能会有少量絮状物析出,不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常,请勿使用。

3. 污染防控:为保持产品的最佳使用效果,不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。谨慎操作,避免污染。开封后重新保存时,务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明:本产品含有血清(10% FBS)和抗生素(青霉素-链霉素),如无特别需要不用额外再添加血清和双抗,可以直接使用。若用于某些特定的功能实验(如转染、无血清刺激),可能需要临时更换为相应的实验用培养基。

5. 细胞特性:NCI-H358细胞为具有特定致癌基因突变(如KRAS)的肺癌细胞系,其生长和药物反应可能受此影响。需定期观察细胞形态,防止因支原体污染导致基因表达或药物敏感性发生改变。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用。

6. 形态观察:定期在显微镜下观察细胞形态。健康的NCI-H358细胞贴壁牢固,形态均一,呈上皮样。如出现大量漂浮、颗粒增多或形态异常,应排查污染或培养条件问题。

7. 生物安全:NCI-H358细胞来源于人肿瘤组织,属于潜在生物危害材料。操作时应遵守实验室生物安全规范,在生物安全柜内进行,废弃物应按照感染性医疗废物标准进行处理,防止对操作者和环境造成风险。

8. 用途限制:NCI-H358细胞专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。

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