1. 货号:HY-CSC-254
2. 产品名称: SK-BR-3细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.2-7.4
5. 产品规格: 500mL
6. 培养基成分: 90% McCoy's 5A + 10% FBS + 青霉素-链霉素双抗
7. 细菌检测: 阴性
8. 真菌检测: 阴性
9. 支原体检测: 阴性
10. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
11. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
12. 产品简介: SK-BR-3细胞专用培养基已包含 SK-BR-3细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于SK-BR-3细胞的培养。
13. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
14. 运输条件: 冰袋冷藏运输
15. 有效期: 3个月
16. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。
SK-BR-3细胞系是一种人源乳腺癌细胞系,是研究乳腺癌生物学、HER2阳性乳腺癌靶向治疗、药物耐药机制以及肿瘤免疫学的最重要和广泛使用的体外模型之一。该细胞系来源于一位43岁女性乳腺癌患者的胸腔积液,属于HER2/ERBB2基因扩增型乳腺癌,不表达雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR),即典型的HER2+/HR-亚型。SK-BR-3细胞在乳腺癌研究中具有标志性地位,是探索HER2信号通路、评估抗HER2靶向药物(如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、拉帕替尼、T-DM1)疗效、研究获得性耐药机制以及探索新型联合治疗策略的核心工具。其核心应用包括:作为体外模型研究HER2过表达对乳腺癌细胞增殖、存活、迁移和侵袭的驱动作用;评估抗HER2单克隆抗体、小分子酪氨酸激酶抑制剂(TKI)以及抗体偶联药物(ADC)对HER2阳性乳腺癌细胞的杀伤效应和敏感性;研究药物耐药的分子机制,如HER2信号通路的代偿性激活、下游PI3K/AKT/mTOR通路突变、以及细胞周期检查点的改变;探索肿瘤细胞的免疫原性和与免疫细胞(如NK细胞、巨噬细胞)的相互作用,用于评估抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)等免疫效应;用于基因功能研究,通过基因敲除、敲低或过表达来探索与HER2信号协同或拮抗的基因功能;模拟肿瘤微环境,研究细胞外基质或共培养细胞对药物反应的影响;以及作为建立HER2阳性乳腺癌异种移植瘤模型或进行体内药效学研究的标准细胞来源。SK-BR-3细胞因其明确的HER2高表达特征、稳定的生长特性以及在乳腺癌靶向治疗研究中的关键作用,成为乳腺癌研究领域,尤其是HER2阳性亚型研究中不可或缺的标准化金标准模型。
SK-BR-3细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为HER2阳性乳腺癌细胞的标准化培养与实验需求而进行科学优化。SK-BR-3细胞是一种贴壁生长、对培养条件相对敏感的肿瘤细胞,其体外培养需要提供能稳定支持其生长并维持HER2相关生物学特性的营养环境。本产品经过精心配比,以广泛适用于多种原代细胞和肿瘤细胞系、营养成分丰富且缓冲能力强的McCoy's 5A培养基为基础,并添加了能有效支持SK-BR-3细胞贴壁和增殖的关键优化成分:即提供必需生长因子、激素和附着因子的优质胎牛血清(FBS,终浓度10%),以及常规浓度的青霉素-链霉素双抗(PS)以预防细菌污染。该“90% McCoy's 5A + 10% FBS + PS”的配方是针对SK-BR-3这一特定且重要的细胞系长期培养的经典且可靠的标准方案。McCoy's 5A培养基含有丰富的氨基酸、维生素和代谢中间产物,其配方特别优化以支持多种困难培养的细胞类型,对乳腺癌细胞具有良好的适应性。10%的血清浓度为细胞提供了充足的营养和促生长因子。与一些其他产品不同,本产品已预先添加了抗生素,为用户提供了开瓶即用的便利性,特别适合常规的细胞维持培养和大多数实验,有效降低了因操作引入污染的风险,保证了细胞培养的纯净性,这对于进行长期药物处理、稳定转染或需要高度无菌条件的实验尤为重要。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持SK-BR-3细胞以典型的贴壁生长方式良好增殖,细胞形态均一(通常为上皮样),为后续的药物敏感性测试、信号通路研究、耐药机制探索或体内模型构建提供状态可靠且反应一致的细胞来源。这保证了实验结果的准确性和可重复性,特别是在进行涉及关键靶向药物疗效评估、高通量筛选或分子机制验证等至关重要的研究时。它为HER2阳性乳腺癌及其他乳腺癌亚型研究领域,提供了一个稳定、高效、即用且经过优化的专用培养解决方案。
本产品为即用型完全培养基,其配方经过优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下:
1. 基础培养基: McCoy's 5A培养基,占比90%。
2. 血清: 优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),终浓度为10%。
3. 抗生素: 青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin, PS),常规工作浓度(通常为100 U/mL青霉素和100 µg/mL链霉素)。
注:以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。该配方旨在为SK-BR-3细胞提供均衡的营养支持并有效预防细菌污染,以满足其常规培养和大多数实验研究的需求。
1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期:常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。
冷冻保存: -20℃避光保存,保质期可延长至12个月。
3. 使用建议:
收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入推荐的保存温度(2-8℃或-20℃)下,避免长时间在常温或较高温度环境中保存。
储存管理:可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持血清中生长因子活性及成分稳定。若选择-20℃保存,可根据日常实验用量进行分装,分装后也需严格避光保存。
使用前准备:使用前,请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度(若为冷冻保存,需先完全解冻)。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意,冻融后可能会有少量絮状物析出,此为正常现象,不影响产品正常使用。
无菌操作:虽然本产品已含有抗生素,但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程,以最大程度降低污染风险。
特殊实验需求:对于某些特定的实验,如转染、某些病毒感染研究或需要无抗生素条件的长期药物处理,用户可根据需要自行评估并选择使用不含抗生素的培养基版本或采用其他处理方式。
培养条件:SK-BR-3细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长,需定期在显微镜下观察其形态(典型的上皮样,铺路石状)和融合度。
细胞传代:当细胞融合度达到80-90%时,即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后,用本专用培养基(或含血清的培养基)完全中和胰酶,离心收集细胞,用新鲜预热的本专用培养基重悬,并按适当比例(通常1:3至1:6)接种到新的培养容器中。
换液频率:根据细胞生长速度,通常每2-3天更换一次新鲜培养基。
药物敏感性测试(MTT/CCK-8等):是评估抗HER2靶向药物及其他化疗药物活性的核心方法。建议在处理前将细胞用新鲜培养基换液,并使用处于对数生长期的细胞。
信号通路研究:常用于检测药物处理后HER2、PI3K/AKT、MAPK等信号通路蛋白的磷酸化水平变化。
耐药性研究:可用于通过长期低剂量药物暴露来诱导和建立获得性耐药细胞株。
免疫效应研究:可用于与免疫细胞共培养,评估ADCC效应等。
体内模型准备:SK-BR-3是建立HER2阳性乳腺癌异种移植瘤模型的常用细胞系,可用于准备细胞悬液。
开封后保存:产品开封后,若需再次储存,务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染,并建议尽快使用完毕。
为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险。这对于维持SK-BR-3这一关键的癌症研究模型的纯净性,以及确保涉及长期药物处理、分子机制探索或体内外药效学评价等关键研究结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.2-7.4)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的SK-BR-3细胞进行生长验证试验。验证结果表明,细胞在本专用培养基中贴壁良好,增殖活力稳定,细胞形态典型(上皮样),确保了产品能够有效支持该重要乳腺癌细胞的稳定且健康的生长,并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持一致的生长速率、HER2表达水平和药物反应性以进行可靠的靶向治疗研究至关重要,是保证乳腺癌研究实验结果准确性和可比性的基础。
1. 储存与时效:请务必在推荐的温度条件(2℃~8℃)下避光保存产品,并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。
2. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后,可能会有少量絮状物析出,不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常,请勿使用。
3. 污染防控:虽然本产品已含有抗生素,但为保持产品的最佳使用效果,仍不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时,严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时,务必采取密封措施以避免污染。
4. 即用型说明:本产品含有血清(10% FBS)和抗生素(PS),可以直接使用。如无特别需要,不需要额外添加任何成分。
5. 细胞特性:SK-BR-3细胞为贴壁生长的乳腺癌细胞系,增殖速度中等。需定期观察细胞形态,确保其保持典型的上皮样。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用。
6. 药物处理:进行抗HER2药物(如曲妥珠单抗)测试时,需注意药物的配制和使用方法,可能需要与不含血清的培养基配合使用进行短期处理。
7. 冻存与复苏:建议使用专用的细胞冻存液进行冻存,并采用标准的慢冻快融方法,以保持细胞活力和特性。
8. 生物安全:SK-BR-3细胞来源于人肿瘤组织,属于潜在生物危害材料,具有致瘤性。操作时应遵守实验室生物安全规范,在生物安全柜内进行,所有接触过细胞的器皿和废弃物应按照生物危害废物标准进行处理,操作者需做好个人防护。
9. 交叉污染:需特别注意避免与其他细胞系(尤其是其他乳腺癌细胞系)发生交叉污染,定期进行STR鉴定是推荐做法。
10. 用途限制:SK-BR-3细胞专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。