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L428细胞专用培养基

货号:HY-CSC-227

L428细胞专用培养基(货号HY-CSC-227)是即用型RPMI-1640完全培养基,专为霍奇金淋巴瘤培养基优化。适用于悬浮HRS细胞模型,含1%高浓度双抗,维持CD30+/CD15+经典免疫表型,支持Brentuximab vedotin等CD30靶向药物筛选,2-8℃避光保存。

一、产品详情

1. 货号:HY-CSC-227
2. 产品名称: L428细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.2-7.4
5. 产品规格: 500mL (125mL x 4)
6. 培养基成分: RPMI-1640 + 10% FBS + 1% Penicillin-Streptomycin
7. 细菌检测: 阴性
8. 真菌检测: 阴性
9. 支原体检测: 阴性
10. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
11. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
12. 产品简介: L428细胞专用培养基已包含 L428细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于L428细胞的培养。
13. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
14. 运输条件: 冰袋冷藏运输
15. 有效期: 3个月
16. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

L428细胞系是血液肿瘤研究,特别是霍奇金淋巴瘤(Hodgkin Lymphoma, HL)研究领域中一个极为重要且特征明确的经典人源细胞模型。该细胞系来源于一名33岁女性霍奇金淋巴瘤患者的淋巴结组织,是研究霍奇金淋巴瘤细胞(尤其是霍奇金和Reed-Sternberg细胞,简称HRS细胞)的生物学特性、发病机制、免疫逃逸及治疗反应的关键工具。作为经典霍奇金淋巴瘤(cHL)研究中使用最广泛的细胞系之一,L428细胞因其稳定性、代表性以及作为HRS细胞体外模型的价值而被全球实验室广泛采纳。该细胞系具有cHL的典型免疫表型特征,通常表达CD30(强阳性)、CD15(可变),而缺乏B细胞标志物如CD19、CD20等,这模拟了体内HRS细胞的特征。L428细胞在研究霍奇金淋巴瘤的增殖信号通路(如NF-κB、JAK/STAT通路异常活化)、细胞因子网络(如产生多种细胞因子和趋化因子)、与肿瘤微环境中免疫细胞(如T细胞)的异常相互作用以及免疫检查点分子(如PD-L1)的表达调控方面具有不可替代的价值。与其它淋巴瘤细胞系相比,它为深入研究cHL这一独特类型的淋巴瘤(其肿瘤细胞仅占肿瘤组织的极少部分,且高度依赖微环境)的病理生物学提供了核心体外模型。其核心应用包括:评估传统化疗方案(如ABVD方案中的药物)及新型靶向药物(如抗CD30的抗体药物偶联物Brentuximab vedotin、免疫检查点抑制剂)对HRS细胞的疗效;研究HRS细胞的生存信号、凋亡抵抗机制以及药物耐药性;探索HRS细胞与微环境细胞的串扰机制;用于基因功能研究(如siRNA筛选、CRISPR编辑)以阐明驱动霍奇金淋巴瘤发生发展的关键基因;以及建立体内模型进行临床前药效学评价。L428细胞为深入理解霍奇金淋巴瘤,特别是HRS细胞的生物学,以及开发针对性的治疗策略提供了标准化且至关重要的研究平台。

L428细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为悬浮生长的霍奇金淋巴瘤细胞的标准化培养与实验需求而进行科学优化。L428细胞是一种悬浮生长的淋巴瘤细胞,其体外培养需要提供稳定、营养均衡且能支持其在悬浮状态下持续增殖的环境,以维持其作为HRS细胞模型的代表性特征和活力。本产品经过精心配比,以广泛适用于多种血液及免疫细胞培养的RPMI 1640培养基为基础,并添加了能有效支持L428细胞生长和维持的关键优化成分:即提供必需生长因子、激素和营养的优质胎牛血清(FBS,终浓度10%),以及用于提供有效抗菌保护的青霉素-链霉素双抗溶液(终浓度1%)。该“RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 双抗”的配方是针对L428等悬浮淋巴瘤细胞培养的通用且可靠的标准方案。其提高的抗生素浓度(1%)有助于在长期培养中更好地预防污染,这对于进行需要持续培养的药物处理、细胞因子刺激或长期观察实验尤为重要。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持L428细胞以典型的悬浮方式良好生长,增殖活力正常,细胞聚集成小团块的形态典型,为后续的药物敏感性测试、信号通路分析、细胞因子检测、基因功能研究或体内实验提供状态稳定且高度可靠的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可重复性,特别是在进行针对霍奇金淋巴瘤的靶向治疗或免疫治疗研究时至关重要。它为淋巴瘤研究,特别是霍奇金淋巴瘤的机制探索与治疗开发,提供了一个稳定、高效且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基,其配方经过优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行配制。其主要成分如下:
1. 基础培养基: RPMI 1640培养基。
2. 血清: 优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),终浓度为10%。
3. 抗生素: 青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin),终浓度为1%。
注:以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。该优化配方旨在为L428细胞提供充足的营养支持,同时提供较高水平的抗菌保护,以满足其在各类实验中对培养环境稳定性的要求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期:常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。
                                     冷冻保存: -20℃避光保存,保质期可延长至12个月。
3. 使用建议:

收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入推荐的保存温度(2-8℃或-20℃)下,避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理:可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持成分稳定。若选择-20℃保存,可根据日常实验用量进行分装,分装后也需严格避光保存。

使用前准备:使用前,请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度(若为冷冻保存,需先完全解冻)。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意,冻融后可能会有少量絮状物析出,此为正常现象,不影响产品正常使用。

无菌操作:所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程。尽管本产品含有较高浓度的抗生素,但严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。

培养条件:L428细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为悬浮生长,通常以单个细胞或小细胞团的形式存在。需定期观察培养基颜色和细胞密度。

细胞传代与维持:由于是悬浮细胞,无需消化。当细胞密度达到较高水平(通常为0.8-1.5 x 10^6 cells/mL)且培养基颜色变黄时,即可进行传代或换液。传代时,只需将细胞悬液轻柔吹打均匀后,取适量细胞悬液加入到含有新鲜预热培养基的新培养瓶中,稀释至适当的起始密度(通常为2-5 x 10^5 cells/mL)。

换液频率:若细胞密度增长不快,可通过离心(轻柔,如1000 rpm,5分钟)收集细胞,弃去部分旧培养基,用新鲜预热培养基重悬细胞后继续培养。

实验应用:若用于药物敏感性测试(如CCK-8、MTT)、凋亡检测(Annexin V/PI流式)、细胞周期分析、细胞因子分泌检测、信号通路蛋白检测(如Western Blot分析NF-κB、STAT蛋白)、基因功能研究(如siRNA/质粒转染,悬浮细胞转染需用特定方法)或与免疫细胞共培养实验,建议在实验前将细胞用新鲜培养基调整至合适密度并换液,确保细胞处于对数生长期且状态良好。

细胞聚集:L428细胞在培养中可能出现不同程度的聚集,这属于正常现象。进行细胞计数或实验前,可轻柔吹打或用细胞筛网过滤以获得单细胞悬液。

开封后保存:产品开封后,若需再次储存,务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染,并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险。这对于维持L428这一重要淋巴瘤研究模型的纯净性,以及确保涉及长期培养或细胞因子等分泌产物分析的实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.2-7.4)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的L428细胞进行生长验证试验。验证结果表明,细胞在本专用培养基中以悬浮方式生长良好,增殖活力正常,细胞形态(包括可能的细胞团块形态)典型,确保了产品能够有效支持该细胞的最佳生长状态,并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持高活力与稳定表型以进行可靠的机制研究和药物筛选至关重要,是保证霍奇金淋巴瘤研究实验结果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效:请务必在推荐的温度条件(2℃~8℃)下避光保存产品,并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。

2. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后,可能会有少量絮状物析出,不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常,请勿使用。

3. 污染防控:为保持产品的最佳使用效果,不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。虽然抗生素浓度较高,但仍不能替代严格的无菌操作。开封后重新保存时,务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明:本产品含有血清(10% FBS)和较高浓度的抗生素(1% 青霉素-链霉素),如无特别需要不用额外再添加血清和双抗,可以直接使用。若进行某些特定的转染实验,可能需要根据转染试剂要求,在转染前后短暂使用不含抗生素的培养基。

5. 细胞特性:L428细胞为悬浮生长的霍奇金淋巴瘤细胞系。需定期在显微镜下观察细胞形态、活力和聚集程度。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用。

6. 细胞计数与传代:由于细胞悬浮生长并可能聚集,准确的细胞计数对于实验至关重要。传代时避免过度稀释或过度密集,保持合适的细胞密度有利于细胞持续健康生长。

7. 生物安全:L428细胞来源于人淋巴瘤组织,属于潜在生物危害材料。操作时应遵守实验室生物安全规范,在生物安全柜内进行,废弃物应按照感染性医疗废物标准进行处理。

8. 用途限制:L428细胞专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。

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