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Y79细胞专用培养基

货号:HY-CSC-231

Y79细胞专用培养基(货号HY-CSC-231)是即用型RPMI-1640完全培养基,含20%高浓度血清,专为视网膜母细胞瘤培养基优化。支持悬浮神经球样生长,维持pRb通路失活特性,适用于儿童眼内肿瘤化疗药物筛选与RB1基因研究,2-8℃避光保存。

一、产品详情

1. 货号:HY-CSC-231
2. 产品名称: Y79细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.2-7.4
5. 产品规格: 500mL (125mL x 4)
6. 培养基成分: RPMI-1640 + 20% FBS + Penicillin-Streptomycin
7. 细菌检测: 阴性
8. 真菌检测: 阴性
9. 支原体检测: 阴性
10. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
11. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
12. 产品简介: Y79细胞专用培养基已包含 Y79细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于Y79细胞的培养。
13. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
14. 运输条件: 冰袋冷藏运输
15. 有效期: 3个月
16. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

Y79细胞系是眼科肿瘤学、视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma, RB)研究以及神经母细胞瘤模型领域中一个历史悠久、特征明确且至关重要的经典人源细胞模型。该细胞系来源于一名2岁女性视网膜母细胞瘤患者的眼球摘除标本,是研究这种儿童最常见眼内恶性肿瘤的核心体外工具。作为视网膜母细胞瘤研究中应用最广泛的细胞系之一,Y79细胞因其能够模拟RB肿瘤细胞的许多关键特性而被全球实验室广泛采纳。该细胞系具有典型的未分化神经母细胞形态,通常呈悬浮生长的细胞团块(神经球样),但在特定条件下也可贴壁生长并表现出一定的分化迹象。Y79细胞保留了RB肿瘤的关键分子特征,如视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)通路的功能失活(通常由于RB1基因的双等位突变),这对于研究细胞周期失控、凋亡抵抗以及肿瘤发生机制至关重要。它在研究RB的侵袭转移机制、血管生成、对化疗药物(如卡铂、依托泊苷、长春新碱)及放疗的敏感性/耐药性方面具有不可替代的价值。此外,Y79细胞也常被用作研究神经元分化、光感受器细胞标记物表达以及Notch、Hedgehog等发育信号通路在肿瘤中作用的模型。与其它实体瘤细胞系相比,它为深入研究这种具有独特遗传背景(RB1基因突变)和细胞起源(起源于视网膜前体细胞)的恶性肿瘤的病理生物学提供了核心体外模型。其核心应用包括:评估传统化疗方案及新型靶向/免疫疗法对RB细胞的疗效;研究RB细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移机制;探索RB肿瘤微环境及血管生成;用于基因功能研究(如siRNA/CRISPR筛选以寻找合成致死靶点)以阐明驱动RB发生发展的关键基因;建立体内异种移植模型进行临床前药效学评价;以及作为研究视网膜发育和分化的肿瘤细胞模型。Y79细胞为深入理解视网膜母细胞瘤的生物学特性、开发针对性的治疗策略以及探索视网膜细胞命运决定提供了标准化且至关重要的研究平台。

Y79细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为悬浮/半贴壁生长的视网膜母细胞瘤细胞的标准化培养与实验需求而进行科学优化。Y79细胞是一种具有独特生长特性的细胞,既可以悬浮生长形成细胞团,也可以在特定条件下(如经多聚赖氨酸包被的培养表面)贴壁生长,其体外培养需要提供高营养、能支持其快速增殖并维持其肿瘤细胞特性的环境。本产品经过精心配比,以广泛适用于多种血液及悬浮细胞培养的RPMI 1640培养基为基础,并添加了能有效支持Y79细胞生长和维持的关键优化成分:即提供高浓度必需生长因子、激素和营养的优质胎牛血清(FBS,终浓度20%),以及用于提供有效抗菌保护的青霉素-链霉素双抗溶液(终浓度常规添加)。该“RPMI-1640 + 20% FBS + 双抗”的配方是针对Y79等视网膜母细胞瘤细胞培养的常用且可靠的标准方案。显著提高的血清浓度(20%)旨在满足这种快速增殖的肿瘤细胞对生长因子和附着因子的更高需求,尤其有助于其在悬浮状态下形成团块并维持活力。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持Y79细胞以典型的悬浮细胞团块方式良好生长,增殖活力旺盛,为后续的药物敏感性测试、凋亡分析、细胞周期研究、基因功能研究或体内实验提供状态稳定且高度可靠的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可重复性,特别是在进行针对视网膜母细胞瘤的化疗药物评估或新型疗法开发时至关重要。它为视网膜母细胞瘤及眼科肿瘤研究,提供了一个稳定、高效且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基,其配方经过优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行配制。其主要成分如下:
1. 基础培养基: RPMI 1640培养基。
2. 血清: 优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),终浓度为20%。
3. 抗生素: 青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin),常规添加。
注:以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。该高血清配方旨在为Y79细胞提供充足的营养支持,以满足其在各类实验中对快速增殖的需求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期:常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。
                                     冷冻保存: -20℃避光保存,保质期可延长至12个月。
3. 使用建议:

收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入推荐的保存温度(2-8℃或-20℃)下,避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理:可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持血清中生长因子活性及成分稳定。若选择-20℃保存,可根据日常实验用量进行分装,分装后也需严格避光保存。

使用前准备:使用前,请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度(若为冷冻保存,需先完全解冻)。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意,冻融后可能会有少量絮状物析出,此为正常现象,不影响产品正常使用。

无菌操作:所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程。尽管本产品含有抗生素,但严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。

培养条件:Y79细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞通常以悬浮细胞团块的形式生长,但也可能部分贴壁。需定期观察培养基颜色和细胞团块密度。

细胞传代与维持:由于细胞主要以悬浮团块形式生长,无需消化。当细胞密度达到较高水平(通常培养基颜色变黄,细胞团块增多)时,即可进行传代。传代时,只需将细胞悬液轻柔吹打均匀(必要时可用移液器吹散大团块),取适量细胞悬液加入到含有新鲜预热培养基的新培养瓶中,稀释至适当的起始密度。

换液频率:若细胞密度增长不快,可通过离心(轻柔,如1000 rpm,5分钟)收集细胞,弃去部分旧培养基,用新鲜预热培养基重悬细胞后继续培养。

实验应用:若用于药物敏感性测试(如CCK-8、MTT)、凋亡检测(Annexin V/PI流式)、细胞周期分析、侵袭迁移实验(需诱导其贴壁或使用Transwell)、基因功能研究(如siRNA/质粒转染,悬浮细胞转染需用特定方法)或体内成瘤实验,建议在实验前将细胞用新鲜培养基调整至合适密度并换液,确保细胞处于对数生长期且状态良好。

细胞聚集:Y79细胞在培养中极易形成大小不一的细胞团块,这属于其正常生长特性。进行细胞计数或实验前,可轻柔吹打或用细胞筛网过滤以获得较为均匀的细胞悬液,但完全分散为单细胞可能较困难。

开封后保存:产品开封后,若需再次储存,务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染,并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险。这对于维持Y79这一重要视网膜母细胞瘤研究模型的纯净性,以及确保涉及长期培养或药物处理实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.2-7.4)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的Y79细胞进行生长验证试验。验证结果表明,细胞在本专用培养基中以悬浮团块方式生长良好,增殖活力旺盛,细胞形态(细胞团块)典型,确保了产品能够有效支持该肿瘤细胞的最佳生长状态,并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持高活力与恶性表型以进行可靠的药物筛选和机制研究至关重要,是保证视网膜母细胞瘤研究实验结果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效:请务必在推荐的温度条件(2℃~8℃)下避光保存产品,并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。

2. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后,可能会有少量絮状物析出,不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常,请勿使用。

3. 污染防控:为保持产品的最佳使用效果,不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。虽然含有抗生素,但仍不能替代严格的无菌操作。开封后重新保存时,务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明:本产品含有高浓度血清(20% FBS)和抗生素,如无特别需要不用额外再添加血清和双抗,可以直接使用。若进行某些特定的转染实验,可能需要根据转染试剂要求,在转染前后短暂使用不含抗生素的培养基。

5. 细胞特性:Y79细胞为悬浮/半贴壁生长的视网膜母细胞瘤细胞系,极易聚集成团。需定期在显微镜下观察细胞团块形态、大小和活力。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用。

6. 细胞计数与传代:由于细胞以团块形式生长,准确的细胞计数具有挑战性。可采用台盼蓝染色结合轻柔吹打或酶消化(如胰酶短暂处理)的方法进行估算。传代时避免过度稀释,保持合适的细胞密度有利于细胞持续快速生长。

7. 生物安全:Y79细胞来源于人肿瘤组织,属于潜在生物危害材料。操作时应遵守实验室生物安全规范,在生物安全柜内进行,废弃物应按照感染性医疗废物标准进行处理。

8. 用途限制:Y79细胞专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。


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