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U266细胞专用培养基

货号:HY-CSC-236

U266细胞专用培养基(货号HY-CSC-236)是即用型RPMI-1640完全培养基,专为多发性骨髓瘤培养基优化。含15%高浓度FBS支持IgE-κ型骨髓瘤悬浮生长,适用于硼替佐米等蛋白酶体抑制剂筛选,2-8℃避光保存。

一、产品详情

1. 货号:HY-CSC-236
2. 产品名称: U266细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.2-7.4
5. 产品规格: 500mL
6. 培养基成分: 85% RPMI-1640 + 15% FBS + Penicillin-Streptomycin
7. 细菌检测: 阴性
8. 真菌检测: 阴性
9. 支原体检测: 阴性
10. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
11. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
12. 产品简介: U266细胞专用培养基已包含 U266细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于U266细胞的培养。
13. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
14. 运输条件: 冰袋冷藏运输
15. 有效期: 3个月
16. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

U266细胞系是多发性骨髓瘤(MM)研究领域中最经典、应用最广泛的人源细胞模型之一。该细胞系来源于一名患有IgE-κ型多发性骨髓瘤的53岁男性患者的骨髓,是一个浆细胞样/骨髓瘤细胞系。U266细胞是研究多发性骨髓瘤生物学特性、发病机制、药物筛选、耐药性以及评估新型免疫疗法(如蛋白酶体抑制剂、免疫调节剂、单克隆抗体、CAR-T细胞疗法等)疗效的“金标准”体外工具。该细胞系保留了骨髓瘤细胞的关键特征,包括分泌单一类型的免疫球蛋白(IgE,κ轻链),表达浆细胞表面标志物(如CD38、CD138),以及依赖于骨髓微环境提供的生长因子和粘附分子相互作用来维持其生存和增殖。U266细胞通常以悬浮或轻微贴壁的方式生长,形成单个或小团细胞,是研究骨髓瘤细胞与骨髓基质细胞相互作用、细胞因子(如IL-6、VEGF、TNF-α)介导的生长与存活信号、以及细胞粘附介导的耐药(CAM-DR)现象的理想模型。其核心应用包括:作为体外模型评估治疗多发性骨髓瘤的各类药物(如硼替佐米、卡非佐米、来那度胺、地塞米松、抗CD38抗体达雷妥尤单抗等)的敏感性及耐药机制;研究骨髓瘤细胞的增殖、凋亡、迁移及其相关信号通路(如NF-κB、PI3K/AKT、JAK/STAT通路);探索骨髓瘤细胞与微环境成分(如骨髓基质细胞、成骨细胞、破骨细胞)的相互作用,特别是其对骨病和免疫抑制的影响;用于研究骨髓瘤细胞的自噬、内质网应激(ER stress)等生物学过程;作为基因功能研究的平台,以阐明驱动骨髓瘤发生发展的关键基因;以及用于评估新型免疫治疗策略(如双特异性抗体、ADC药物、CAR-NK/T细胞)的靶向杀伤效果。U266细胞为深入理解多发性骨髓瘤的复杂病理学、开发新的治疗靶点和验证创新疗法提供了一个特征明确、高度标准化且极具价值的核心研究平台。

U266细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为多发性骨髓瘤细胞的标准化培养与实验需求,特别是其高血清依赖性和维持稳定生长的特性而进行科学优化。U266细胞是一种悬浮生长的人骨髓瘤细胞,其体外培养需要提供高浓度的血清以支持其旺盛的增殖和生存。本产品经过精心配比,以广泛适用于血液和悬浮细胞培养的RPMI 1640培养基为基础(占比85%),并添加了能有效支持U266细胞最佳生长状态的关键优化成分:即提供高浓度必需生长因子、激素和营养的优质胎牛血清(FBS,终浓度15%),以及用于提供有效抗菌保护的青霉素-链霉素双抗溶液(常规添加)。该“85% RPMI-1640 + 15% FBS + 双抗”的配方是针对U266等骨髓瘤细胞培养的常用且经过验证的标准方案。相较于10%血清的配方,15%的血清浓度能更好地满足U266细胞较高的营养需求和生长因子依赖,有助于维持其稳定的增殖速率和细胞活力。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持U266细胞以典型的悬浮状态良好生长,细胞增殖活力旺盛,为后续的药物敏感性测试、细胞因子研究、信号通路分析、与基质细胞共培养实验或评估免疫疗法效果提供状态稳定且可靠的细胞来源。这保证了实验结果的准确性和可重复性,特别是在进行涉及昂贵药物测试、长期培养或复杂共培养体系的关键研究时至关重要。它为血液系统恶性肿瘤,特别是多发性骨髓瘤的研究,提供了一个稳定、高效且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基,其配方经过优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行配制。其主要成分如下:
1. 基础培养基: RPMI 1640培养基,占比85%。
2. 血清: 优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),终浓度为15%。
3. 抗生素: 青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin),常规添加。
注:以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。该配方旨在为U266细胞提供高浓度的营养和生长因子支持,以满足其在常规维持和苛刻实验研究中的需求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期:常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。
                                     冷冻保存: -20℃避光保存,保质期可延长至12个月。
3. 使用建议:

收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入推荐的保存温度(2-8℃或-20℃)下,避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理:可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持血清中生长因子活性及成分稳定。若选择-20℃保存,可根据日常实验用量进行分装,分装后也需严格避光保存。

使用前准备:使用前,请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度(若为冷冻保存,需先完全解冻)。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意,冻融后可能会有少量絮状物析出,此为正常现象,不影响产品正常使用。

无菌操作:所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程。尽管本产品含有抗生素,但严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。

培养条件:U266细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞以悬浮方式生长,形成单个或小团细胞。需定期轻轻摇晃或吹打培养瓶以防止细胞过度聚集。

细胞传代与维持:当细胞密度达到较高水平(通常培养基颜色变黄,细胞密度显著增加)时,即可进行传代。传代时,只需将细胞悬液轻柔吹打均匀,取适量细胞悬液加入到含有新鲜预热的专用培养基的新培养瓶中,稀释至适当的起始密度(通常1:3至1:5)。定期更换新鲜培养基对维持细胞健康至关重要。

换液频率:根据细胞生长速度,通常每2-3天更换一次新鲜培养基,或当培养基颜色明显变黄时进行换液。

药物处理实验:若用于药物敏感性测试(如评估蛋白酶体抑制剂),建议在药物处理前将细胞用新鲜培养基换液,并使用处于对数生长期且状态良好的细胞。对于悬浮细胞,药物处理时需确保细胞均匀分布。

实验应用:若用于药物敏感性测试(如CCK-8、MTT)、细胞周期与凋亡分析(Annexin V/PI流式检测)、Western Blot检测信号通路蛋白(如cleaved PARP、p-NF-κB)、ELISA检测细胞因子分泌(如IL-6)、与骨髓基质细胞共培养实验或评估抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)等,建议在实验前将细胞用新鲜培养基换液,并使用处于对数生长期且状态良好的细胞。

细胞收集:进行实验时,可通过离心(如1000 rpm,5分钟)收集细胞,用PBS或相应缓冲液洗涤后进行后续处理。

开封后保存:产品开封后,若需再次储存,务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染,并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险。这对于维持U266这一核心多发性骨髓瘤研究模型的纯净性,以及确保涉及药物筛选、免疫治疗评估等关键实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.2-7.4)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的U266细胞进行生长验证试验。验证结果表明,细胞在本专用培养基中生长状态良好,增殖活力旺盛,细胞形态正常,确保了产品能够有效支持该骨髓瘤细胞的最佳生长状态,并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持高活力和稳定生长以进行可靠的药物疗效评估和机制研究至关重要,是保证多发性骨髓瘤研究实验结果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效:请务必在推荐的温度条件(2℃~8℃)下避光保存产品,并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。

2. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后,可能会有少量絮状物析出,不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常,请勿使用。

3. 污染防控:为保持产品的最佳使用效果,不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。虽然含有抗生素,但仍不能替代严格的无菌操作。开封后重新保存时,务必采取密封措施以避免污染。注意U266细胞生长迅速,培养基易酸化,需及时换液。

4. 即用型说明:本产品含有较高浓度的血清(15% FBS)和抗生素,如无特别需要不用额外再添加血清和双抗,可以直接用于常规维持培养。若进行某些特定的转染实验,可能需要根据转染试剂要求,在转染前后短暂使用不含抗生素的培养基或调整血清浓度。

5. 细胞特性:U266细胞为悬浮生长的骨髓瘤细胞系,生长迅速,代谢旺盛。需定期在显微镜下观察细胞形态和密度,避免细胞过度生长导致活力下降和大量凋亡。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用。

6. 细胞聚团:U266细胞有时会形成小的细胞团,这属于正常现象。传代或取样时轻柔吹打即可分散。但应避免形成过大过紧的团块,以免影响细胞生长和实验均一性。

7. 模型应用:U266是研究多发性骨髓瘤药物(尤其是蛋白酶体抑制剂和免疫调节剂)疗效和耐药机制的经典模型,也常用于研究肿瘤微环境相互作用。

8. 生物安全:U266细胞来源于人肿瘤组织,属于潜在生物危害材料。操作时应遵守实验室生物安全规范,在生物安全柜内进行,废弃物应按照感染性医疗废物标准进行处理。

9. 用途限制:U266细胞专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。


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