U2OS细胞专用培养基-细胞系专用培养基-CellFactory-西安禾洋生物科技有限公司

U2OS细胞专用培养基

货号：HY-CSC-237

U2OS细胞专用培养基（货号HY-CSC-237）是即用型RPMI-1640完全培养基，专为骨肉瘤细胞培养基优化。含热灭活马血清支持贴壁生长，维持成骨分化潜能，适用于DNA损伤修复与基因转染研究，2-8℃避光保存。

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产品详情

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一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-237
2. 产品名称： U2OS细胞专用培养基
3. 产品形态：液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL (125mL x 4)
6. 培养基成分： 85% RPMI-1640 + 5% FBS + 10% 热灭活马血清
7. 细菌检测：阴性
8. 真菌检测：阴性
9. 支原体检测：阴性
10. 细胞生长实验：细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： U2OS细胞专用培养基已包含 U2OS细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于U2OS细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件：冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明：本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

U2OS细胞系是骨肉瘤研究领域中最经典、应用最广泛的人源细胞模型之一，也是细胞生物学、分子生物学、尤其是DNA损伤与修复、细胞周期调控、成骨细胞分化及相关信号通路研究的核心工具细胞。该细胞系来源于一名患有中度分化的骨肉瘤的15岁女性患者的胫骨组织，是一个具有成骨细胞特性的骨肉瘤细胞系。U2OS细胞因其具有稳定的基因组、高效的转染效率以及相对清晰的遗传背景，而被广泛应用于基础研究。它能够对多种DNA损伤剂（如紫外线、化疗药物）做出反应，是研究p53、ATM/ATR、CHK1/CHK2等DNA损伤应答通路的关键模型。同时，U2OS细胞在特定诱导条件下能够向成骨细胞方向分化，表达成骨标志物（如碱性磷酸酶ALP、骨钙素OCN、骨桥蛋白OPN），是研究成骨细胞分化、骨形成及骨相关疾病的体外模型。在肿瘤研究方面，它被用于探索骨肉瘤的增殖、迁移、侵袭机制及对化疗药物的敏感性。其核心应用包括：作为DNA损伤与修复、细胞周期检查点、端粒酶活性及染色体稳定性研究的首选模型；用于研究成骨细胞分化、骨基质矿化及相关信号通路（如BMP、Wnt通路）；作为评估抗骨肉瘤药物疗效及耐药机制的体外模型；因其转染效率高，是基因功能研究（如基因敲除、敲低、过表达）、报告基因检测、酵母双杂交验证、蛋白质相互作用研究的理想细胞平台；广泛用于研究细胞凋亡、自噬、衰老等细胞命运决定过程；以及作为建立诱导分化体系、研究细胞外基质合成与矿化的模型。U2OS细胞为深入理解骨生物学、骨肉瘤病理学、DNA代谢以及细胞命运调控的分子机制提供了一个特征明确、高度标准化且多功能的强大研究平台。

U2OS细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为骨肉瘤/成骨细胞样细胞的标准化培养与多功能实验需求而进行科学优化。U2OS细胞是一种贴壁生长的人骨肉瘤细胞，其经典且广泛采用的培养方案是使用含有混合血清的RPMI 1640培养基，以支持其稳定的增殖并维持其成骨细胞特性。本产品经过精心配比，以广泛适用于多种细胞培养的RPMI 1640培养基为基础（占比85%），并添加了经过优化的、能有效支持U2OS细胞最佳生长状态的特殊混合血清成分：即提供必需生长因子和激素的优质胎牛血清（FBS，终浓度5%），以及富含特定营养成分（如脂类、激素）以促进某些细胞类型（包括U2OS）贴壁和生长的热灭活马血清（终浓度10%）。该“85% RPMI-1640 + 5% FBS + 10% 热灭活马血清”的配方是针对U2OS细胞培养的经典、可靠且经过长期验证的标准方案。马血清的添加有助于提供独特的生长因子组合，可能更有利于U2OS细胞的贴壁铺展和维持其分化潜能。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持U2OS细胞以典型的上皮样/成纤维样形态良好贴壁和生长，增殖活力稳定，为后续的DNA损伤实验、信号通路研究、基因转染、诱导分化实验或药物筛选提供状态稳定且可靠的细胞来源。这保证了实验结果的准确性和可重复性，特别是在进行涉及复杂分子操作、长期诱导分化或关键机制探索的研究时至关重要。它为骨肿瘤学、骨生物学及基础细胞生物学研究，提供了一个稳定、高效且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行配制。其主要成分如下：
1. 基础培养基： RPMI 1640培养基，占比85%。
2. 血清成分：优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为5%。
3. 热灭活马血清（Heat-inactivated Horse Serum），终浓度为10%。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。该特殊混合血清配方旨在为U2OS细胞提供均衡且优化的营养支持，以满足其常规维持和多类实验研究中的需求。请注意，用户可根据实验需要（如转染前）自行选择是否添加抗生素。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。
冷冻保存： -20℃避光保存，保质期可延长至12个月。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入推荐的保存温度（2-8℃或-20℃）下，避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理：可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持血清中生长因子活性及成分稳定。若选择-20℃保存，可根据日常实验用量进行分装，分装后也需严格避光保存。

使用前准备：使用前，请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，不影响产品正常使用。

添加抗生素：根据实验室常规，可选择性添加青霉素-链霉素双抗溶液（如1%），以预防细菌污染。对于某些转染实验，转染前后可短暂使用不含抗生素的培养基。

无菌操作：所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程。

培养条件：U2OS细胞使用本产品（可选择添加抗生素）时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长，需定期在显微镜下观察其形态（典型的上皮样或成纤维样）和融合度。

细胞传代：当细胞融合度达到80-90%时，即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后，用本专用培养基（或含血清的培养基）完全中和胰酶，离心收集细胞，用新鲜预热的本专用培养基重悬，并按适当比例（通常1:4至1:8）接种到新的培养容器中。

换液频率：根据细胞生长速度，通常每2-3天更换一次新鲜培养基。

实验应用：

a. DNA损伤实验：若用于紫外线、化疗药物（如顺铂）等DNA损伤剂处理，建议在处理前将细胞用新鲜培养基换液，并使用处于对数生长期且状态良好的细胞。

b. 基因转染：U2OS细胞转染效率高，可采用脂质体、电转等多种方法。转染前可短暂使用不含抗生素的培养基。

c. 成骨诱导分化：如需诱导成骨分化，需在常规培养基基础上，额外添加特定的成骨诱导剂（如地塞米松、β-甘油磷酸钠、抗坏血酸等），并可能需更换为不含酚红的培养基以便于后续染色。

d. 药物筛选：若用于药物敏感性测试（如CCK-8、MTT），建议在药物处理前将细胞用新鲜培养基换液。

收集细胞：进行Western Blot、qPCR等实验时，可通过常规消化或细胞刮收集细胞。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持U2OS这一核心研究模型的纯净性，以及确保涉及基因操作、长期分化实验等关键研究结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均使用标准的U2OS细胞进行生长验证试验。验证结果表明，细胞在本专用培养基中贴壁良好，增殖活力旺盛，细胞形态典型，确保了产品能够有效支持该骨肉瘤/成骨细胞样细胞的最佳生长状态，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持稳定生长和功能状态以进行可靠的基因功能研究、信号通路分析和分化实验至关重要，是保证基础与转化研究实验结果准确性和可比性的基础。