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LS180细胞专用培养基

货号:HY-CSC-264

LS180细胞专用培养基(货号HY-CSC-264)是即用型MEM完全培养基,含10%FBS及双抗,专为高表达CYP450酶和P-糖蛋白的人结直肠腺癌细胞优化,适用于药物代谢、转运及粘蛋白研究,2-8℃避光保存。

一、产品详情

1. 货号:HY-CSC-264
2. 产品名称: LS180细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.2-7.4
5. 产品规格: 500mL
6. 培养基成分: MEM + 10% FBS + 1% 青霉素-链霉素双抗
7. 细菌检测: 阴性
8. 真菌检测: 阴性
9. 支原体检测: 阴性
10. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
11. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
12. 产品简介: LS180细胞专用培养基已包含 LS180细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于LS180细胞的培养。
13. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
14. 运输条件: 冰袋冷藏运输
15. 有效期: 3个月
16. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

LS180细胞系是一种人源结直肠腺癌细胞系,是研究结直肠癌(CRC)生物学、药物代谢、药物转运、粘蛋白表达以及肠道屏障功能的关键体外模型。结直肠癌是全球范围内高发的恶性肿瘤之一,其发生发展涉及复杂的分子通路改变和微环境相互作用。LS180细胞来源于一位患有结肠腺癌的56岁女性患者的原发性肿瘤组织,属于结直肠腺癌细胞系,具有上皮细胞的特征,并且因其高表达细胞色素P450酶(CYP450)、药物转运蛋白(如P-糖蛋白/P-gp)以及能够产生和分泌大量粘蛋白(MUC)而备受关注。这些特性使其成为药物代谢与转运(DMPK)研究、肠道吸收模型以及肠道粘液屏障功能研究的理想工具。其核心应用包括:作为体外模型研究结直肠癌细胞的增殖、凋亡、迁移侵袭以及对传统化疗药物(如5-氟尿嘧啶、奥沙利铂、伊立替康)的敏感性;评估新型靶向药物(如EGFR抑制剂、抗血管生成药物)及免疫治疗药物的疗效;研究关键致癌信号通路(如Wnt/β-catenin、KRAS、PI3K/AKT、TGF-β/Smad等)在结直肠癌发生发展中的作用;特别适用于药物代谢研究,评估化合物通过CYP450酶系的代谢稳定性、代谢产物鉴定以及药物-药物相互作用;用于药物转运研究,评价化合物是否为P-gp等外排转运蛋白的底物或抑制剂,从而预测其口服吸收和脑渗透性;研究肠道粘蛋白(尤其是MUC2、MUC5AC)的表达与调控,探索其在肠道炎症和肿瘤发生中的作用;作为Caco-2细胞的补充或替代模型,用于建立体外肠道吸收/渗透性模型(尽管单层致密性可能不如Caco-2);探索肿瘤细胞与肠道微生物群的相互作用;用于基因功能研究,通过基因操作验证特定基因在结直肠癌进展、药物反应或粘蛋白合成中的作用;以及作为建立结直肠癌异种移植瘤模型的细胞来源。LS180细胞因其独特的药物代谢特性、粘蛋白表达特征以及在结直肠癌和药物研发领域的广泛应用,成为消化系统肿瘤研究和药物发现中的重要标准化工具。

LS180细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为人结直肠腺癌细胞系的贴壁培养与功能研究需求而进行科学优化。LS180细胞是一种贴壁生长的上皮样肿瘤细胞,其体外培养需要提供能支持其稳定增殖并维持其上皮细胞特性、药物代谢酶活性及粘蛋白分泌功能的适宜环境。本产品经过精心配比,以基础且广泛使用的MEM(Minimum Essential Medium)为基础,并添加了能有效支持LS180细胞贴壁、增殖和维持其功能特性的关键优化成分:即提供必需生长因子、激素和附着因子的优质胎牛血清(FBS,终浓度10%),以及常规浓度的青霉素-链霉素双抗(PS,通常为1%体积比)以有效预防细菌污染。该“MEM + 10% FBS + 1% 双抗”的配方是针对LS180等结直肠癌细胞系培养的经典、可靠的标准方案。MEM培养基提供了细胞生长所需的基本氨基酸、维生素和盐类,配方简明,能有效支持多种上皮细胞的生长。10%的血清浓度为细胞的快速增殖和功能维持提供了充足的营养支持。预先添加的抗生素为用户提供了开瓶即用的便利,特别适合常规的细胞维持培养和大多数实验,降低了污染风险。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持LS180细胞以典型的上皮样形态良好贴壁生长,细胞边界清晰,为后续的药物敏感性测试、药物代谢与转运研究、粘蛋白表达分析或分子机制探索提供状态可靠且功能一致的细胞来源。这保证了实验结果的准确性和可重复性,特别是在进行涉及长期药物处理、酶活性测定或分泌蛋白分析等实验时至关重要。它为结直肠癌研究、药物开发及肠道生物学领域,提供了一个稳定、高效、即用且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基,其配方经过优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下:
1. 基础培养基: MEM培养基(Minimum Essential Medium),占比约89%。
2. 血清: 优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),终浓度为10%。
3. 抗生素: 青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin, PS),常规工作浓度(通常为100 U/mL青霉素和100 µg/mL链霉素),占比约1%。
注:以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。该配方旨在为贴壁生长的LS180结直肠腺癌细胞提供全面且充足的营养支持并有效预防细菌污染,以满足其常规培养和功能研究的需求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期:常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。
                                     冷冻保存: -20℃避光保存,保质期可延长至12个月。
3. 使用建议:

收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入推荐的保存温度(2-8℃或-20℃)下,避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理:可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持血清中生长因子活性及成分稳定。若选择-20℃保存,可根据日常实验用量进行分装,分装后也需严格避光保存。

使用前准备:使用前,请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度(若为冷冻保存,需先完全解冻)。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意,冻融后可能会有少量絮状物析出,此为正常现象,不影响产品正常使用。

无菌操作:虽然本产品已含有抗生素,但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程,以最大程度降低污染风险。

特殊实验需求:对于药物代谢研究,可能需要诱导CYP450酶活性,此时可在培养基中添加特定的诱导剂(如利福平、苯巴比妥等)。对于粘蛋白研究,可能需要优化培养条件以最大化粘蛋白分泌。

培养条件:LS180细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长,需定期在显微镜下观察其上皮样形态(多边形、铺路石状)和融合度。

细胞传代:当细胞融合度达到80-90%时,即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后,用本专用培养基(或含血清的培养基)完全中和胰酶,离心收集细胞,用新鲜预热的本专用培养基重悬,并按适当比例(通常1:3至1:5)接种到新的培养容器中。

换液频率:根据细胞生长速度,通常每2-3天更换一次新鲜培养基。

药物敏感性测试(MTT/CCK-8、克隆形成):是评估化疗药物及靶向药物对结直肠癌细胞抗肿瘤活性的基本方法。

药物代谢研究:可用于评估化合物在LS180细胞中的代谢稳定性、代谢产物生成及CYP450酶介导的药物相互作用。

药物转运研究:通过跨膜转运实验,评估化合物是否为P-gp等转运蛋白的底物或抑制剂。

粘蛋白表达与分泌分析:可通过qPCR、Western Blot、ELISA或免疫染色等方法检测MUC2、MUC5AC等粘蛋白的表达水平和分泌情况。

信号通路研究:可用于研究Wnt/β-catenin、KRAS、PI3K/AKT等关键通路在结直肠癌中的作用。

基因功能研究:可用于进行基因过表达、敲低或基因编辑等操作,研究与药物代谢、粘蛋白合成或肿瘤进展相关的基因功能。

体内模型准备:可用于准备细胞悬液,以建立小鼠结直肠癌皮下或原位移植瘤模型。

开封后保存:产品开封后,若需再次储存,务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染,并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险。这对于维持LS180这一重要的结直肠癌及药物代谢研究模型的纯净性,以及确保涉及长期培养、药物处理或酶活性测定等关键研究结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.2-7.4)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的LS180细胞进行生长验证试验。验证结果表明,细胞在本专用培养基中贴壁良好,增殖活力稳定,细胞形态典型(上皮样),确保了产品能够有效支持该结直肠癌细胞的稳定生长,并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持一致的生长状态、药物代谢酶活性和粘蛋白分泌谱以进行可靠的药理学或生物学研究至关重要,是保证研究实验结果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效:请务必在推荐的温度条件(2℃~8℃)下避光保存产品,并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。

2. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后,可能会有少量絮状物析出,不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常,请勿使用。

3. 污染防控:虽然本产品已含有抗生素,但为保持产品的最佳使用效果,仍不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时,严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时,务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明:本产品含有血清(10% FBS)和抗生素(1% 双抗),可以直接使用。如无特别需要,不需要额外添加任何成分。

5. 细胞特性:LS180细胞为贴壁生长的结直肠腺癌细胞系。其生长速度中等,可能分泌较多细胞外基质。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用。

6. 药物代谢实验:进行CYP450酶活性或药物相互作用研究时,需注意细胞代次、培养条件和诱导剂处理对酶活性的影响。

7. 粘蛋白研究:培养条件(如细胞密度、血清批次)可能影响粘蛋白的分泌,需进行条件优化。

8. 生物安全:LS180细胞来源于人肿瘤组织,属于潜在生物危害材料,具有致瘤性。操作时应遵守实验室生物安全规范,在生物安全柜内进行,所有接触过细胞的器皿和废弃物应按照生物危害废物标准进行处理,操作者需做好个人防护。

9. 交叉污染:需特别注意避免与其他细胞系(尤其是其他结直肠癌细胞系)发生交叉污染。

10. 用途限制:LS180细胞专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。


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