一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-265
2. 产品名称： MCF-10A细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL 
6. 培养基成分： MEGM™完全培养基试剂盒（包含：MEBM基础培养液 + 细胞生长添加剂 + 霍乱毒素 + 青霉素-链霉素双抗）
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： MCF-10A细胞专用培养基已包含 MCF-10A细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于MCF-10A细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

MCF-10A细胞系是一种非致瘤性、永生化的正常人乳腺上皮细胞系，是研究正常乳腺生物学、乳腺上皮细胞分化、细胞极性、细胞-细胞连接、乳腺癌发生机制以及评估致癌物和抗肿瘤药物在正常细胞背景上作用的“金标准”体外模型。该细胞系来源于一位患有乳腺纤维囊性病变的36岁女性的乳腺组织，经过永生化处理但未发生恶性转化，保留了正常乳腺上皮细胞的许多关键特性。与乳腺癌细胞系相比，MCF-10A细胞不具致瘤性，在三维（3D）培养中能形成具有极性和腔样结构的腺泡样球体，是研究乳腺腺体形态发生和组织结构的理想模型。其核心应用包括：作为正常对照细胞，与各种乳腺癌细胞系（如MCF-7、MDA-MB-231）进行比较研究，以揭示肿瘤发生过程中发生的分子和细胞事件；研究乳腺上皮细胞在二维和三维培养条件下的增殖、分化、凋亡和衰老；探索细胞-基质相互作用、上皮细胞极性的建立与维持以及紧密连接和粘附连接等细胞连接的功能；研究关键信号通路（如EGFR、PI3K/AKT/mTOR、MAPK、Notch、Wnt/β-catenin等）在正常乳腺上皮细胞稳态调控中的作用；作为评估环境致癌物、激素、生长因子或基因操作（如癌基因过表达、抑癌基因敲除）诱导细胞发生恶性转化的平台；进行药物毒理学研究，评估化合物对正常乳腺上皮细胞的细胞毒性；探索乳腺干细胞/祖细胞的特性；以及用于建立体外乳腺腺泡形成模型（3D培养），研究乳腺形态发生和乳腺癌发生的早期事件。MCF-10A细胞因其非致瘤性、在三维培养中能形成正常腺泡结构以及在乳腺癌研究领域作为标准正常对照的广泛应用，成为乳腺生物学和癌症研究领域不可或缺的重要工具。

MCF-10A细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为正常人乳腺上皮细胞系的特殊培养需求而进行科学优化。MCF-10A细胞的体外培养需要提供能支持其稳定增殖、维持正常上皮细胞表型、并在特定条件下诱导其形成三维腺泡结构的适宜环境。因此，本产品基于成熟的MEGM™（Mammary Epithelial Cell Growth Medium）试剂盒配方进行优化配制。该试剂盒是专门针对乳腺上皮细胞设计的完全培养基体系，能最有效地支持MCF-10A细胞的生长和功能。本产品为即用型完全液体培养基，已按精确配方预先混合了以下核心组分：MEBM（Mammary Epithelial Cell Basal Medium）基础培养液，为细胞提供基础的营养物质和缓冲体系；细胞生长添加剂，提供乳腺上皮细胞特异性生长所需的多种生长因子、激素（如胰岛素、氢化可的松、表皮生长因子EGF）和微量元素，以替代血清并更好地控制培养条件，促进细胞增殖和功能维持；霍乱毒素，用于提高细胞内cAMP水平，这有助于抑制细胞分化、促进增殖，并增强细胞在培养皿上的贴壁能力，是维持MCF-10A细胞处于未分化、增殖状态的关键成分；以及常规浓度的青霉素-链霉素双抗（PS）以有效预防细菌污染。该完整的MEGM™配方，不添加血清，是针对MCF-10A细胞培养的国际通用“金标准”方案。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持MCF-10A细胞以典型的上皮样形态良好贴壁生长，细胞边界清晰，形态均一，并能支持其在三维基质胶中形成正常的腺泡样球体结构。这为后续的转化研究、信号通路分析、药物筛选（作为正常细胞对照）以及三维形态发生研究提供状态稳定且功能可靠的细胞来源。它保证了实验结果的准确性和可重复性，特别是在进行涉及癌基因转化、药物毒性评估或三维培养等复杂实验时至关重要。它为乳腺生物学、乳腺癌研究及转化医学领域，提供了一个稳定、高效、即用且经过严格优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，基于MEGM™试剂盒配方优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下：
1. 基础培养基： MEBM（Mammary Epithelial Cell Basal Medium）基础培养液。
2. 生长添加剂： 细胞生长添加剂（BPE-free, 或可能包含BPE），提供胰岛素、氢化可的松、重组人表皮生长因子（hEGF）等乳腺上皮细胞特异性生长因子。
3. 特殊添加剂： 霍乱毒素（Cholera Toxin），终浓度为100 ng/mL，用于提升细胞内cAMP水平，促进细胞贴壁与增殖。
4. 抗生素： 青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin, PS），常规工作浓度（通常为100 U/mL青霉素和100 µg/mL链霉素）。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。该配方旨在为MCF-10A正常人乳腺上皮细胞提供无血清、化学成分明确且优化的培养环境，以满足其维持正常表型、支持增殖及功能研究的需求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。
                                     冷冻保存： -20℃避光保存，保质期可延长至12个月。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入推荐的保存温度（2-8℃或-20℃）下，避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理：可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持生长因子（如EGF）和霍乱毒素等活性成分的稳定性。若选择-20℃保存，可根据日常实验用量进行分装，分装后也需严格避光保存。

使用前准备：使用前，请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，不影响产品正常使用。

无菌操作：虽然本产品已含有抗生素，但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程，以最大程度降低污染风险。

特殊实验需求：对于三维（3D）培养以形成腺泡，需额外准备基底膜基质（如Matrigel）和相应的培养方法。对于诱导转化实验，需在培养基中添加特定的致癌剂或进行基因操作。

培养条件：MCF-10A细胞使用本产品时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长，需定期在显微镜下观察其上皮样形态（多边形、铺路石状）和融合度。

细胞传代：当细胞融合度达到80-90%时，即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA或TrypLE等消化酶进行消化。消化后，用本专用培养基完全中和消化酶，离心收集细胞，用新鲜预热的本专用培养基重悬，并按适当比例（通常1:3至1:5）接种到新的培养容器中。注意MCF-10A细胞可能对消化比较敏感，需控制消化时间。

换液频率：根据细胞生长速度，通常每2-3天更换一次新鲜培养基。

二维（2D）培养实验：用于常规的细胞增殖、凋亡、细胞周期、信号通路研究，以及与乳腺癌细胞系的比较分析。

三维（3D）腺泡培养：这是MCF-10A细胞的核心应用之一。将细胞嵌入基底膜基质（如Matrigel）中，使用本培养基进行培养，可观察腺泡样结构的形成，用于研究乳腺形态发生和早期癌变。

转化研究：通过持续暴露于致癌物或稳定转染特定癌基因（如HRAS、PIK3CA突变体），可在本培养基中诱导MCF-10A细胞发生恶性转化，用于研究乳腺癌的起始过程。

药物筛选与毒性评估：作为正常细胞对照，用于评估抗癌药物或环境化合物对正常乳腺上皮细胞的毒性。

信号通路研究：可用于研究EGFR、PI3K/AKT、Notch等通路在正常乳腺上皮细胞稳态和转化中的作用。

基因功能研究：可用于进行基因过表达、敲低或敲除，研究与乳腺发育、稳态或癌变相关的基因功能。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持MCF-10A这一珍贵的正常乳腺上皮细胞研究模型的纯净性，以及确保涉及长期培养、三维形态发生或转化研究等关键实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均使用标准的MCF-10A细胞进行生长验证试验。验证结果表明，细胞在本专用培养基中贴壁良好，增殖活力稳定，细胞形态典型（上皮样、铺路石状），确保了产品能够有效支持该正常乳腺上皮细胞的稳定生长，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持一致的正常表型、增殖速率以及在三维培养中形成标准腺泡结构的能力以进行可靠的比较生物学或转化研究至关重要，是保证乳腺生物学和癌症研究实验结果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。

2. 外观检查：使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后，可能会有少量絮状物析出，不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。

3. 污染防控：虽然本产品已含有抗生素，但为保持产品的最佳使用效果，仍不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时，严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时，务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明：本产品为无血清的完全培养基，已包含细胞生长所需的全部添加剂、霍乱毒素和抗生素，可以直接使用。如无特别需要，不需要额外添加任何成分，尤其不要添加血清，以免影响细胞表型和实验的一致性。

5. 细胞特性：MCF-10A细胞为贴壁生长的正常乳腺上皮细胞系，生长速度中等，接触抑制明显。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用，并避免使用过高代次的细胞。

6. 三维培养：进行3D腺泡培养时，需严格优化细胞接种密度、基质胶浓度和培养基体积，并定期在显微镜下观察结构形成。

7. 消化操作：MCF-10A细胞对消化酶敏感，消化过度可能导致细胞损伤和活力下降，需精确控制消化时间。

8. 生物安全：尽管MCF-10A是非致瘤性细胞，但其来源于人组织，仍属于潜在生物危害材料。操作时应遵守实验室生物安全规范，在生物安全柜内进行，所有废弃物应按照生物危害废物标准进行处理。

9. 交叉污染：需特别注意避免与乳腺癌细胞系或其他细胞系发生交叉污染，以免影响其作为正常对照的可靠性。

10. 用途限制：MCF-10A细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。