一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-269
2. 产品名称： RWPE-2细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL
6. 培养基成分： K-SFM + 0.05 mg/mL BPE + 5 ng/mL EGF + 青霉素-链霉素双抗
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： RWPE-2细胞专用培养基已包含 RWPE-2细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于RWPE-2细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

RWPE-2细胞系是一种人前列腺上皮细胞系，来源于RWPE-1细胞（一种由HPV-18永生化的人正常前列腺上皮细胞）经Kirsten大鼠肉瘤病毒（Ki-ras）癌基因转染后诱导产生的恶性转化细胞系。因此，RWPE-2细胞保留了前列腺上皮细胞的特性，但获得了致瘤性，是研究前列腺癌发生、发展，特别是RAS信号通路在前列腺癌恶性转化、侵袭和转移中作用的关键体外模型。该细胞系代表了一种由正常前列腺上皮细胞（RWPE-1）向恶性细胞（RWPE-2）转化的中间或早期癌变阶段，在研究前列腺癌早期事件、癌基因驱动机制以及药物干预方面具有独特价值。其核心应用包括：作为研究RAS信号通路（特别是K-Ras）在前列腺癌发生发展中的分子机制的经典模型；探索前列腺上皮细胞恶性转化的早期分子事件和表型改变，如细胞增殖、锚定非依赖性生长、侵袭能力增强等；评估靶向RAS通路或其下游效应分子（如MEK、PI3K/AKT）的药物在前列腺癌中的潜在疗效；与亲本RWPE-1细胞配对使用，进行功能获得性（gain-of-function）研究，通过对比分析揭示特定癌基因（如K-Ras）在驱动前列腺癌变过程中的具体作用；研究前列腺癌的激素非依赖性生长机制，以及雄激素剥夺治疗后的适应性反应；探索前列腺癌的侵袭和转移机制，特别是上皮-间质转化（EMT）过程；用于药物敏感性筛选，评估化疗药物、新型靶向药物及天然产物对转化后前列腺癌细胞的抑制作用；研究肿瘤微环境因子（如生长因子、细胞因子）对前列腺癌细胞行为的影响；以及作为建立前列腺癌异种移植瘤模型的细胞来源。RWPE-2细胞与其亲本RWPE-1细胞组成的配对模型，为理解前列腺癌的起始和早期进展提供了不可多得的实验工具。

RWPE-2细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为转化型人前列腺上皮细胞系的特定生长需求而进行科学优化。RWPE-2细胞是一种贴壁生长的上皮样细胞，其培养依赖于特定的生长因子以维持其增殖活力。本产品经过精心配比，以专门为角质形成细胞等上皮细胞设计的无血清、化学成分确定的K-SFM（Keratinocyte Serum-Free Medium）为基础培养基，并添加了能有效支持RWPE-2细胞生长的关键优化成分：即牛垂体提取物（BPE，终浓度0.05 mg/mL）和人表皮生长因子（EGF，终浓度5 ng/mL），以提供细胞增殖所必需的多肽生长因子和营养物质；以及常规浓度的青霉素-链霉素双抗（PS）以有效预防细菌污染。该“K-SFM + BPE + EGF + 双抗”的配方是针对RWPE系列前列腺上皮细胞培养的专用方案。K-SFM无血清培养基避免了血清批次间的差异，提供了更稳定、成分更明确的培养环境。BPE和EGF的联合添加是刺激细胞生长的关键。预先添加的抗生素为用户提供了开瓶即用的便利。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持RWPE-2细胞以典型的上皮样形态良好贴壁生长，增殖活力旺盛，为后续的癌变机制研究、药物测试或与RWPE-1细胞的对比分析提供状态可靠且一致的细胞来源。这保证了实验结果的准确性和可重复性，特别是在进行涉及信号通路分析、基因表达谱比较或转化表型鉴定等精细实验时至关重要。它为前列腺癌发生机制研究及早期干预策略探索领域，提供了一个稳定、高效、即用且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下：
1. 基础培养基： K-SFM角质形成细胞无血清培养基（Keratinocyte Serum-Free Medium），为本产品的主要液体基质。
2. 生长因子添加物：
牛垂体提取物（Bovine Pituitary Extract, BPE），终浓度为0.05 mg/mL。
人表皮生长因子（Human Epidermal Growth Factor, EGF），终浓度为5 ng/mL。
3. 抗生素： 青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin, PS），常规工作浓度。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。该无血清配方旨在为贴壁生长的RWPE-2转化前列腺上皮细胞提供明确、稳定且高效的生长因子支持，并有效预防细菌污染，以满足其特定培养和实验研究的需求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。这是推荐的常规保存方式。
                                     冷冻保存： 由于本产品含有对冻融敏感的生长因子（如BPE、EGF），不建议进行-20℃冷冻保存，以避免生长因子活性降低或降解。请严格按照2-8℃冷藏保存并在有效期内使用。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入2-8℃冰箱避光保存，避免任何温度剧烈波动或长时间置于室温。

储存管理：请务必在2-8℃下避光保存，并确保在瓶身标注的有效期内使用。不建议分装冻存。

使用前准备：使用前，请将所需用量的培养基在37℃水浴中预热至适宜温度。预热时间不宜过长。请轻轻颠倒混匀后再使用。请注意，本产品为无血清配方，冻融（如运输过程中短暂结冰）后若出现少量絮状物析出，此为可能现象，轻柔混匀后通常不影响产品正常使用，但应避免反复冻融。

无菌操作：虽然本产品已含有抗生素，但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程，以最大程度降低污染风险。

特殊实验需求：对于研究生长因子信号通路（如EGF/EGFR通路）的实验，需注意本培养基已含有EGF。若需研究EGF刺激或撤除效应，可能需要使用不含EGF的基础K-SFM进行同步培养或饥饿处理。

培养条件：RWPE-2细胞使用本产品时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长，需定期在显微镜下观察其上皮样形态和融合度。

细胞传代：当细胞融合度达到80-90%时，即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。由于是无血清培养基，消化后推荐使用含血清的培养基（如含10% FBS的DMEM/F12）或PBS来中和胰酶并洗涤细胞，离心后，用新鲜预热的本专用培养基重悬细胞，并按适当比例（通常1:3至1:5）接种到新的培养容器中。接种后，确保培养基完全覆盖细胞。

换液频率：根据细胞生长速度，通常每2-3天更换一次新鲜的本专用培养基。

转化表型研究：通过与RWPE-1细胞对比，进行软琼脂克隆形成实验（锚定非依赖性生长）、Transwell侵袭实验、细胞增殖速率分析等，以验证其恶性转化表型。

信号通路研究：通过Western Blot、免疫荧光等方法检测RAS下游的MAPK/ERK和PI3K/AKT通路在RWPE-2细胞中的激活状态，并与RWPE-1比较。

药物敏感性测试（MTT/CCK-8）：评估靶向RAS通路药物（如MEK抑制剂）、化疗药物或其它抗癌药物对RWPE-2细胞的生长抑制效果。

基因功能研究：可用于进行基因过表达、敲低或敲除，研究与前列腺癌变、RAS信号传导或治疗反应相关的基因功能。

体内模型准备：可用于准备细胞悬液，以建立前列腺癌皮下移植瘤模型，用于体内药效评价。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。开封后也应严格在2-8℃避光保存。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持RWPE-2这一重要的前列腺癌变研究模型的纯净性，以及确保涉及分子机制探索和药物测试等关键研究结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 生长因子活性与细胞功能验证：每批次产品均进行关键生长因子（BPE和EGF）的生物活性评估，并最终使用标准的RWPE-2细胞进行生长验证试验。验证结果表明，细胞在本专用培养基中贴壁良好，增殖活力稳定，细胞形态典型（上皮样），确保了产品能够有效支持该转化前列腺上皮细胞的稳定生长，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持一致的转化表型、信号通路活性以及对生长因子的反应性以进行可靠的机制研究至关重要，是保证前列腺癌发生发展研究实验结果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。不建议冷冻保存。

2. 外观检查：使用前请观察培养基是否澄清。由于是无血清配方，冻融后可能会有少量絮状物析出，轻柔混匀后不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。

3. 污染防控：虽然本产品已含有抗生素，但为保持产品的最佳使用效果，仍不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时，严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时，务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明：本产品为无血清配方，含有生长因子（BPE和EGF）和抗生素（双抗），可以直接使用。如无特别需要，不需要额外添加血清或其他生长因子。

5. 细胞特性：RWPE-2细胞为贴壁生长的转化前列腺上皮细胞，具有致瘤性。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用。注意其与正常亲本RWPE-1细胞在形态和生长特性上的差异。

6. 消化与传代：由于使用无血清培养基，细胞消化后中和胰酶时，建议使用含血清的培养基或PBS，以避免残留胰酶对细胞的损伤。离心后务必用本专用培养基重悬和接种。

7. 实验设计：若实验涉及EGF信号研究，需考虑本培养基中含有EGF的背景。必要时需设置不含EGF的对照组（使用基础K-SFM）。

8. 生物安全：RWPE-2细胞来源于经病毒和癌基因改造的人细胞，属于潜在生物危害材料，具有致瘤性。操作时应遵守实验室生物安全规范，在生物安全柜内进行，所有接触过细胞的器皿和废弃物应按照生物危害废物标准进行处理，操作者需做好个人防护。

9. 交叉污染：需特别注意避免与亲本RWPE-1细胞或其他细胞系发生交叉污染。

10. 用途限制：RWPE-2细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。