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EOL-1细胞专用培养基

货号:HY-CSC-245

EOL-1细胞专用培养基(货号HY-CSC-245)是即用型RPMI-1640完全培养基,专为FIP1L1-PDGFRA融合基因阳性嗜酸性粒细胞白血病培养基优化。含90%RPMI-1640及10%FBS无抗生素配方,支持细胞悬浮生长,适用于伊马替尼敏感性及耐药机制研究,2-8℃避光保存。

一、产品详情

1. 货号:HY-CSC-245
2. 产品名称: EOL-1细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.2-7.4
5. 产品规格: 500mL
6. 培养基成分: RPMI-1640 + 10% FBS
7. 细菌检测: 阴性
8. 真菌检测: 阴性
9. 支原体检测: 阴性
10. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
11. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
12. 产品简介: EOL-1细胞专用培养基已包含 EOL-1细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于EOL-1细胞的培养。
13. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
14. 运输条件: 冰袋冷藏运输
15. 有效期: 3个月
16. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

EOL-1细胞系是一种人源嗜酸性粒细胞白血病细胞系,是研究嗜酸性粒细胞生物学、高嗜酸性粒细胞综合征(HES)、慢性嗜酸性粒细胞白血病(CEL)以及相关过敏性疾病、寄生虫感染和肿瘤免疫微环境的重要体外模型。嗜酸性粒细胞是白细胞的一种,在对抗寄生虫感染、调节过敏反应(如哮喘、过敏性鼻炎)以及参与某些肿瘤免疫监视中发挥关键作用,但其过度活化或异常增殖也与多种疾病相关。EOL-1细胞来源于一名患有急性嗜酸性粒细胞白血病的患者,该细胞系携带特征性的FIP1L1-PDGFRA融合基因,导致组成性激活的PDGFRA酪氨酸激酶活性,驱动细胞的异常增殖和存活。这一独特的分子特征使EOL-1成为研究酪氨酸激酶抑制剂(如伊马替尼)治疗FIP1L1-PDGFRA阳性嗜酸性粒细胞疾病的作用机制和耐药性的“金标准”模型。该细胞系以悬浮或轻微贴壁的方式生长,具有典型的嗜酸性粒细胞形态特征(如双叶核),并可被诱导分化为更成熟的嗜酸性粒细胞样细胞。其核心应用包括:作为体外模型研究FIP1L1-PDGFRA融合基因驱动的信号通路(如JAK/STAT、PI3K/AKT、MAPK/ERK)、细胞增殖与凋亡调控机制;评估伊马替尼及其他靶向PDGFRA或下游通路的新型激酶抑制剂的疗效和耐药机制;研究嗜酸性粒细胞的诱导分化、脱颗粒过程(释放主要碱性蛋白、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白等)及其调控;探索嗜酸性粒细胞在过敏性疾病和寄生虫感染模型中的功能,如研究细胞因子(如IL-5、GM-CSF)对其活化、趋化和存活的影响;作为研究嗜酸性粒细胞与肿瘤微环境相互作用的工具,探讨其在肿瘤免疫中的双重作用(促瘤或抗瘤);用于筛选和评估针对嗜酸性粒细胞相关疾病的新型治疗药物。EOL-1细胞为深入理解嗜酸性粒细胞相关疾病的病理生理、发现新的治疗靶点以及开发靶向疗法提供了一个特征明确且极具价值的标准化研究平台。

EOL-1细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为人嗜酸性粒细胞白血病细胞的标准化培养与实验需求而进行科学优化。EOL-1细胞主要以悬浮方式生长,其体外培养需要提供能支持其稳定增殖并维持其未分化或可诱导分化状态的营养环境。本产品经过精心配比,以广泛适用于淋巴细胞、造血细胞及许多悬浮细胞培养的RPMI-1640培养基为基础,并添加了能有效支持EOL-1细胞增殖和存活的关键优化成分:即提供必需生长因子、激素和脂质的优质胎牛血清(FBS,终浓度10%)。该“RPMI-1640 + 10% FBS”的配方是针对许多血液系统来源的细胞系,包括白血病细胞系培养的常用且可靠的标准方案。RPMI-1640培养基提供了均衡的营养成分,特别适合悬浮细胞的代谢需求。10%的血清浓度为EOL-1细胞提供了充足的营养支持,能够满足其常规增殖需求,并维持其基本的细胞活力。与一些其他产品不同,本配方未预先添加抗生素,为用户提供了根据自身实验需求(如进行特定药物处理或分化诱导时)灵活选择是否添加抗生素的自由度,同时也避免了抗生素可能对某些敏感细胞功能造成的潜在影响。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持EOL-1细胞以典型的悬浮或轻微贴壁形态良好生长,增殖活力稳定,为后续的药物敏感性测试(如对伊马替尼的敏感性评估)、信号通路研究、诱导分化实验或功能分析提供状态可靠的细胞来源。这保证了实验结果的准确性和可重复性,特别是在进行涉及昂贵激酶抑制剂、复杂信号通路探索或细胞功能测定的关键研究时至关重要。它为嗜酸性粒细胞疾病及血液肿瘤研究,提供了一个稳定、通用且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基,其配方经过优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行配制。其主要成分如下:
1. 基础培养基: RPMI-1640培养基,占比90%。
2. 血清: 优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),终浓度为10%。
注:以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。本产品未预先添加抗生素,用户可根据实验需求(如常规维持培养时)自行添加青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin)等抗生素。该配方旨在为EOL-1细胞提供均衡的基础营养支持,以满足其在常规维持和实验研究中的需求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期:常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。
                                     冷冻保存: -20℃避光保存,保质期可延长至12个月。
3. 使用建议:

收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入推荐的保存温度(2-8℃或-20℃)下,避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理:可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持血清中生长因子活性及成分稳定。若选择-20℃保存,可根据日常实验用量进行分装,分装后也需严格避光保存。

使用前准备:使用前,请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度(若为冷冻保存,需先完全解冻)。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意,冻融后可能会有少量絮状物析出,此为正常现象,不影响产品正常使用。

无菌操作与抗生素添加:所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程。由于本产品未预先添加抗生素,为降低污染风险,强烈建议用户在常规细胞维持培养时,在使用前按常规浓度(如1%)向培养基中添加青霉素-链霉素双抗溶液。对于某些特定的药物处理或分化诱导实验,可根据实验方案决定是否使用不含抗生素的培养基。

培养条件:EOL-1细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞主要以悬浮方式生长,可能伴有少量轻微贴壁的细胞。需定期在显微镜下观察细胞形态(典型的圆形、双叶核)、密度和活力。

细胞传代与维持:当细胞密度达到较高水平(如1-2×10^6 cells/mL)且培养基颜色变黄时,即可进行传代或换液。对于悬浮生长的细胞,通常采用离心法:收集细胞悬液,低速离心(如1000 rpm,5分钟),弃去上清,用新鲜预热的本专用培养基(建议已添加抗生素)重悬细胞,并按适当比例(通常1:3至1:5)接种到新的培养容器中。也可采用直接补液或半量换液的方式维持。

换液频率:根据细胞生长速度,通常每2-3天需要进行换液或传代,以保持细胞处于良好的生长状态。

药物处理实验:若用于酪氨酸激酶抑制剂(如伊马替尼)或其他药物的敏感性测试,建议在药物处理前将细胞用新鲜培养基换液,并使用处于对数生长期且状态良好的细胞。由于EOL-1细胞对伊马替尼高度敏感(因其FIP1L1-PDGFRA融合基因),实验设计时需设置较低的浓度梯度。

诱导分化实验:EOL-1细胞可在丁酸钠、二甲亚砜(DMSO)或cAMP类似物等诱导剂的作用下,向更成熟的嗜酸性粒细胞样细胞分化,可用于研究分化过程中的基因表达和功能变化。

功能研究:可用于研究细胞因子的分泌、趋化反应或脱颗粒功能,但需要进行特定的诱导或刺激。

体内模型:若用于构建人嗜酸性粒细胞白血病小鼠模型,需要将处于对数生长期的EOL-1细胞收集、洗涤并重悬于无血清培养基或PBS中,通过尾静脉注射等方式注入免疫缺陷小鼠体内。

开封后保存:产品开封后,若需再次储存,务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染,并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险。这对于维持EOL-1这一重要的血液疾病研究模型的纯净性,以及确保涉及长期药物处理、分子生物学实验或体内模型构建等关键研究结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.2-7.4)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的EOL-1细胞进行生长验证试验。验证时,会在培养基中添加常规浓度的抗生素。验证结果表明,细胞在本专用培养基(添加抗生素后)中生长良好,增殖活力稳定,细胞形态典型,确保了产品能够有效支持该嗜酸性粒细胞白血病细胞的最佳生长状态,并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持稳定的增殖和对特定药物(如伊马替尼)的敏感性以进行可靠的药效和机制研究至关重要,是保证相关疾病研究实验结果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效:请务必在推荐的温度条件(2℃~8℃)下避光保存产品,并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。

2. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后,可能会有少量絮状物析出,不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常,请勿使用。

3. 污染防控与抗生素:本产品未预先添加抗生素。 为保持产品的最佳使用效果,不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。强烈建议用户在常规细胞培养时,在使用前按需添加抗生素(如1%青霉素-链霉素双抗),以有效预防细菌污染。同时,严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时,务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明:本产品含有血清(10% FBS),但不含抗生素。用户可根据实验需求自行添加。若进行某些特殊诱导或药物处理实验,可能需要根据方案使用不含抗生素的培养基。

5. 细胞特性:EOL-1细胞为悬浮/轻微贴壁生长的白血病细胞系,携带FIP1L1-PDGFRA融合基因,对伊马替尼敏感。需定期观察细胞形态、密度和活力。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用,并记录细胞代次。

6. 药物敏感性:EOL-1细胞是研究伊马替尼治疗FIP1L1-PDGFRA阳性疾病的经典敏感模型。进行药物实验时,需设置精细的浓度梯度,并注意伊马替尼需用DMSO等适当溶剂配制。

7. 分化潜能:该细胞具有被诱导分化的潜能,可用于研究嗜酸性粒细胞成熟过程。

8. 生物安全:EOL-1细胞来源于人白血病患者,属于潜在生物危害材料。操作时应遵守实验室生物安全规范,在生物安全柜内进行,废弃物应按照感染性医疗废物标准进行处理。动物模型操作需符合动物伦理规范。

9. 用途限制:EOL-1细胞专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。

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