一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-272
2. 产品名称： T47D细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL
6. 培养基成分： RPMI-1640 + 10% FBS + 青霉素-链霉素双抗 + 0.2 U/mL 牛胰岛素
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： T47D细胞专用培养基已包含 T47D细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于T47D细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

T47D细胞系是一种人乳腺癌细胞系，来源于一位浸润性导管癌患者的胸腔积液。该细胞系是乳腺癌研究中应用最广泛、最具代表性的模型之一。T47D细胞属于管腔上皮亚型，表达雌激素受体（ERα和ERβ）和孕激素受体（PR），但不表达人表皮生长因子受体2（HER2/ErbB2），因此是一种典型的激素受体阳性（HR+）、HER2阴性乳腺癌模型。此外，T47D细胞还携带PIK3CA基因（H1047R）激活突变，这使得其对胰岛素/胰岛素样生长因子信号高度敏感，也常用于研究PI3K/AKT/mTOR信号通路。其核心应用包括：作为研究雌激素和孕激素信号传导、激素依赖性生长调控以及内分泌治疗（如他莫昔芬、氟维司群、芳香化酶抑制剂）作用机制和耐药性的经典模型；评估针对激素受体、PI3K/AKT/mTOR通路、细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK4/6）等靶点的药物（如依维莫司、帕博西利、阿贝西利）的体外疗效和联合治疗策略；研究乳腺癌内分泌治疗的原发性与获得性耐药机制，特别是与PIK3CA突变、ERα突变（如Y537S）、生长因子信号通路（如EGFR家族、IGF-1R）交叉对话、细胞周期调控异常等相关的机制；探索乳腺癌细胞的增殖、凋亡、细胞周期进程及分化调控；用于研究乳腺癌干细胞特性及其在治疗抵抗中的作用；评估化疗药物对激素受体阳性乳腺癌细胞的敏感性；研究与乳腺癌发生发展相关的基因功能，可通过基因编辑技术在该细胞系中进行功能获得或缺失研究；作为建立激素受体阳性乳腺癌异种移植瘤模型的常用细胞来源，尤其适用于研究肿瘤对激素剥夺或内分泌治疗的在体反应。T47D细胞因其明确的激素受体表达谱、PIK3CA突变背景及其在模拟临床最常见乳腺癌亚型方面的优势，已成为乳腺癌基础研究、转化医学和药物开发领域不可或缺的关键工具。

T47D细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为激素受体阳性乳腺癌细胞系的特定生长需求而进行科学优化。T47D细胞是一种贴壁生长、呈上皮样、生长相对缓慢的肿瘤细胞，其体外培养高度依赖胰岛素/胰岛素样生长因子信号以维持最佳增殖状态。本产品经过精心配比，以广泛适用于多种实体瘤细胞的RPMI-1640为基础培养基，并添加了能有效支持T47D细胞贴壁、增殖并维持其激素受体功能的关键优化成分：即提供必需生长因子和附着因子的优质胎牛血清（FBS，终浓度10%）；常规浓度的青霉素-链霉素双抗（PS）以预防细菌污染；以及最关键的生长促进因子——牛胰岛素（终浓度0.2 U/mL）。该“RPMI-1640 + 10% FBS + 双抗 + 胰岛素”的配方是针对T47D细胞培养的经典且必需的标准方案。胰岛素对于激活细胞内的PI3K/AKT/mTOR通路至关重要，能显著促进T47D细胞的增殖。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持T47D细胞以典型的上皮样形态良好贴壁生长，增殖活力得到有效促进，为后续的激素刺激实验、内分泌药物测试、信号通路分析或基因功能研究提供状态可靠且一致的细胞来源。这保证了实验结果的准确性和可重复性，特别是在进行涉及激素反应性、长期药物处理或精细分子机制探索等实验时至关重要。它为激素受体阳性乳腺癌研究及靶向药物开发领域，提供了一个稳定、高效、即用且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下：
1. 基础培养基： RPMI-1640培养基（Roswell Park Memorial Institute 1640 Medium），占比约90%。
2. 血清： 优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为10%。
3. 生长因子： 牛胰岛素（Bovine Insulin），终浓度为0.2 U/mL。注：根据实验需求，亦可使用人胰岛素替代。
4. 抗生素： 青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin, PS），常规工作浓度。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。该配方旨在为贴壁生长的T47D激素受体阳性乳腺癌细胞提供全面营养支持，并通过添加胰岛素特异性满足其对胰岛素/IGF信号的依赖，同时有效预防细菌污染，以满足其常规培养和各类实验研究的需求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。这是推荐的常规保存方式。
                                     冷冻保存： -20℃避光保存，保质期可延长至12个月。但需注意，反复冻融可能影响胰岛素等蛋白因子的活性，建议根据实验用量分装后冻存，并避免多次冻融。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入2-8℃冰箱避光保存，避免任何温度剧烈波动或长时间置于室温。

储存管理：建议在2-8℃下避光保存，并在有效期内使用。若需冻存，建议进行小体积分装，并标记好冻存日期。

使用前准备：使用前，请将所需用量的培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。预热时间不宜过长。请轻轻颠倒混匀后再使用。请注意，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。

无菌操作：虽然本产品已含有抗生素，但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程，以最大程度降低污染风险。

特殊实验需求：对于研究雌激素或孕激素效应的实验，需注意培养基中可能含有痕量的类固醇激素（来源于血清）。进行严格的激素刺激或撤除实验时，可能需要使用经活性炭-葡聚糖处理的无酚红培养基，并添加经处理的血清。对于研究胰岛素/PI3K通路特异性作用的实验，需考虑本培养基已含有胰岛素作为背景。

培养条件：T47D细胞使用本产品时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长，需定期在显微镜下观察其上皮样形态和融合度。

细胞传代：T47D细胞生长相对缓慢，当细胞融合度达到80-90%时，即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后，用本专用培养基（或含血清的培养基）完全中和胰酶，离心收集细胞，用新鲜预热的本专用培养基重悬，并按适当比例（通常1:3至1:6）接种到新的培养容器中。

换液频率：根据细胞生长速度，通常每2-3天更换一次新鲜培养基。

激素处理与药物测试：可用于评估雌激素（如17β-雌二醇）、孕激素或各类内分泌治疗药物、靶向药物对细胞增殖（MTT/CCK-8）、细胞周期、凋亡（流式细胞术）及通路激活（Western Blot）的影响。

报告基因检测：T47D细胞常被转染雌激素反应元件（ERE）驱动的荧光素酶报告基因，用于高通量筛选具有雌激素样或抗雌激素活性的化合物。

三维培养：可用于进行三维Matrigel培养，研究细胞在更接近体内环境下的形态发生、细胞极性和药物反应。

基因功能研究：可用于进行基因过表达、敲低或敲除，研究与乳腺癌发生、激素信号传导、治疗反应或耐药相关的基因功能。

体内模型准备：可用于准备细胞悬液，与Matrigel混合后接种，建立激素受体阳性乳腺癌异种移植瘤模型。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。开封后也应严格在2-8℃避光保存。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持T47D这一重要的乳腺癌研究模型的纯净性，以及确保涉及长期激素处理、药物测试等关键研究结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均进行关键添加剂（胰岛素）的活性评估，并最终使用标准的T47D细胞进行生长验证试验。验证结果表明，细胞在本专用培养基中贴壁良好，增殖活力稳定，细胞形态典型（上皮样），确保了产品能够有效支持该激素受体阳性乳腺癌细胞的稳定生长，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持一致的激素受体表达水平、对激素和药物的反应性以进行可靠的机制研究和药效评价至关重要，是保证乳腺癌研究成果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。

2. 外观检查：使用前请观察培养基是否澄清。由于含有血清和蛋白因子，冻融后可能会有少量絮状物析出，轻柔混匀后不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。

3. 污染防控：虽然本产品已含有抗生素，但为保持产品的最佳使用效果，仍不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时，严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时，务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明：本产品含有血清（10% FBS）、胰岛素（0.2 U/mL）和抗生素（双抗），可以直接使用。如无特别需要，不需要额外添加血清、胰岛素或其他生长因子。

5. 细胞特性：T47D细胞为贴壁生长的激素受体阳性乳腺癌细胞，生长速度较慢，对胰酶消化可能较敏感，消化时间需适当控制。建议在较低代次时冻存足量细胞，并定期检测其ER、PR表达状态。

6. 激素实验背景：进行严格的雌激素/孕激素相关实验时，需意识到本产品所含血清中可能存在痕量内源性类固醇激素。对于要求背景极低的实验，建议使用专门配制的无酚红、经处理的血清培养基。

7. 胰岛素敏感性：本产品含有胰岛素，是细胞增殖所必需的。若实验需研究胰岛素信号的特异性作用，需设置不含胰岛素的对照组（使用基础RPMI-1640+10% FBS+双抗）。

8. 生物安全：T47D细胞来源于人肿瘤组织，属于潜在生物危害材料，具有致瘤性。操作时应遵守实验室生物安全规范，在生物安全柜内进行，所有接触过细胞的器皿和废弃物应按照生物危害废物标准进行处理，操作者需做好个人防护。

9. 交叉污染：需特别注意避免与其他细胞系（尤其是其他乳腺癌细胞系）发生交叉污染。

10. 用途限制：T47D细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。