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U-87 MG细胞专用培养基

货号:HY-CSC-389

U-87 MG细胞专用培养基(货号HY-CSC-389)是即用型DMEM完全培养基,含10%FBS双抗开瓶即用,专为胶质母细胞瘤培养基优化,支持人GBM贴壁增殖与替莫唑胺、贝伐珠单抗、EGFR抑制剂及VEGF/PI3K/AKT通路研究,2-8℃避光保存。

一、产品详情

1. 货号:HY-CSC-389
2. 产品名称: U-87 MG细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.2-7.4
5. 产品规格: 500mL
6. 培养基成分: 90% DMEM + 10% FBS + 1% 青霉素-链霉素双抗
7. 细菌检测: 阴性
8. 真菌检测: 阴性
9. 支原体检测: 阴性
10. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
11. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
12. 产品简介: U-87 MG细胞专用培养基已包含 U-87 MG细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于U-87 MG细胞的培养。
13. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
14. 运输条件: 冰袋冷藏运输
15. 有效期: 3个月
16. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

U-87 MG细胞是一种人胶质母细胞瘤细胞系(Glioblastoma multiforme, GBM),是目前神经科学和肿瘤学研究领域中应用最广泛、最具代表性的恶性脑肿瘤细胞模型之一。胶质母细胞瘤是成人中枢神经系统中最常见且恶性程度最高的原发性肿瘤,具有极强的侵袭性、血管生成能力、治疗抵抗性和复发倾向。U-87 MG细胞系建立于1968年,来源于一名患有胶质母细胞瘤的75岁女性患者,经过数十年的研究和验证,已成为研究脑肿瘤生物学、开发新型治疗策略和评估抗肿瘤药物的金标准模型。其核心应用包括:作为研究胶质母细胞瘤细胞生物学、细胞周期调控、DNA损伤修复、凋亡机制和肿瘤干细胞特性的经典模型;评估抗肿瘤药物(如替莫唑胺、贝伐珠单抗、靶向EGFR抑制剂、PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂、抗血管生成药物等)的敏感性及耐药机制研究;研究胶质瘤侵袭和迁移的分子机制,包括基质金属蛋白酶(MMPs)表达、细胞外基质降解和上皮-间质转化(EMT)样过程;探索肿瘤微环境与胶质瘤细胞的相互作用,特别是缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)信号通路及肿瘤相关巨噬细胞的影响;用于基因功能研究,通过基因敲除、过表达或CRISPR/Cas9技术探究与胶质瘤恶性进展相关的关键基因(如PTEN、p53、EGFR、IDH等);用于高通量药物筛选和组合疗法优化,发现针对胶质母细胞瘤的新型治疗化合物;建立颅内原位或皮下异种移植瘤模型,用于体内评估新药疗效、肿瘤生长动力学、血管生成和浸润性生长模式。U-87 MG细胞因其稳定的遗传背景、明确的分子特征(如PTEN缺失、野生型IDH、EGFR表达等)和可靠的实验重现性,成为胶质瘤基础研究、转化医学和药物开发领域不可或缺的工具。

U-87 MG细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为人胶质母细胞瘤细胞的特定生长需求而进行科学优化。U-87 MG细胞是一种贴壁生长的上皮样肿瘤细胞,形态上呈多边形或纺锤形,具有典型的胶质瘤细胞特征,细胞体较大,胞质丰富,生长较为致密且呈单层排列。其体外培养需要提供支持其稳定贴壁、旺盛增殖并维持其恶性胶质瘤表型的适宜环境。本产品经过精心配比,以Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)高糖培养基为基础,并添加了能有效支持U-87 MG细胞旺盛增殖和维持其关键生物学特性的优化成分:即提供充足生长因子、激素、附着因子和营养物质的优质胎牛血清(FBS,终浓度10%),以满足其高代谢需求和促进细胞贴壁与扩展;以及常规工作浓度的青霉素-链霉素双抗(终浓度1%)以有效预防细菌污染。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持U-87 MG细胞以典型的胶质母细胞瘤细胞形态良好贴壁生长,增殖活力旺盛,细胞形态均一且边界清晰,为后续的药物敏感性测试(尤其是化疗药物和分子靶向药物筛选)、信号转导通路研究(如PI3K/AKT、MAPK通路)、细胞侵袭迁移实验(划痕实验、Transwell实验)、血管生成拟态研究或体内成瘤模型构建提供状态可靠、性能稳定且一致的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可重复性,对于需要细胞提供稳定生长特性和药物反应性的胶质瘤研究至关重要。它为胶质母细胞瘤的基础机制研究、药物开发和转化医学应用,提供了一个稳定、高效、即用且经过充分优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基,其配方经过优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下:
1. 基础培养基: Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM,高糖),占比为90%。
2. 血清: 优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),终浓度为10%。
3. 抗生素: 青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin),终浓度为1%。
注:以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。该配方旨在为贴壁生长的人胶质母细胞瘤U-87 MG细胞提供全面的营养支持、良好的附着环境和有效的污染防护。用户可根据具体的实验目的(如无血清饥饿处理、添加特定信号通路抑制剂、化疗药物、抗血管生成药物或细胞因子),在无菌条件下进行补充。

四、运输和保存方法

1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期:常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。这是推荐的常规保存方式。
                                    冷冻保存: -20℃避光储存,保质期可延长至12个月。但需注意,反复冻融可能影响血清中生长因子和附着因子的活性、抗生素的稳定性以及其他不稳定成分的效能,建议根据实验用量分装后冻存,并严格避免多次冻融。
3. 使用建议:

收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入2-8℃冰箱避光保存,避免任何温度剧烈波动或长时间置于室温。

储存管理:建议在2-8℃下避光保存,并在有效期内使用。若需长期保存,可进行小体积分装后于-20℃冻存。

使用前准备:使用前,请将所需用量的培养基在37℃水浴中预热至适宜温度(若为冷冻保存,需先完全解冻)。预热时间不宜过长,避免营养成分降解。请轻轻颠倒混匀后再使用。请注意,由于含有血清,冻融后可能会有少量絮状物析出,此为正常现象,轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。

无菌操作:虽然本产品已含有抗生素,但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程,以最大程度降低污染风险。

特殊实验需求:对于化疗药物(如替莫唑胺、卡莫司汀、顺铂等)及靶向药物(如EGFR抑制剂、PI3K/AKT/mTOR抑制剂等)处理实验,通常在此完全培养基中进行。对于研究细胞侵袭和迁移能力,常需进行无血清或低血清饥饿处理后再进行Transwell小室实验或划痕愈合实验。对于研究肿瘤干细胞特性,可使用无血清培养基添加生长因子(如EGF、bFGF)诱导形成肿瘤球。

培养条件:U-87 MG细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长,需定期在显微镜下观察其形态(上皮样、多边形或纺锤形)和融合度,确保细胞健康生长。

细胞传代:当细胞融合度达到80-90%时,即可进行传代。通常使用胰蛋白酶/EDTA消化液进行消化,消化后用本专用培养基(或含血清的培养基)完全中和胰酶,离心收集细胞,用新鲜预热的本专用培养基重悬,并按适当比例(通常1:3至1:6,根据细胞实际生长密度调整)接种到新的培养容器中。

换液频率:根据细胞生长速度和密度,通常每2-3天更换一次新鲜培养基。若细胞密度较高或代谢旺盛,可适当增加换液频率。

药物敏感性测试:通过MTT、CCK-8、克隆形成实验或流式细胞术等方法评估化疗药物、靶向药物对细胞增殖、周期和凋亡的影响。

侵袭迁移能力评估:通过Transwell小室(基质胶包被)实验评估细胞的侵袭能力;通过划痕愈合实验(Wound Healing Assay)评估细胞的迁移能力。

信号通路研究:可通过Western Blot、qPCR、免疫荧光等方法检测药物处理前后EGFR、AKT、ERK、mTOR、HIF-1α、VEGF等关键信号通路蛋白的表达和磷酸化水平变化。

体内成瘤模型:可用于准备细胞悬液,通过皮下注射或颅内原位注射建立异种移植瘤模型,用于评估药物体内疗效和肿瘤浸润能力。

开封后保存:产品开封后,若需再次储存,务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染,并建议尽快使用完毕。开封后也应严格在2-8℃避光保存,避免反复温度波动。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险。这对于维持U-87 MG这一重要胶质瘤研究模型的纯净性,以及确保涉及长期培养和药物测试的实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.2-7.4)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的U-87 MG细胞进行生长验证试验。验证结果表明,细胞在本专用培养基中贴壁良好,增殖活力旺盛,细胞形态典型且均一,确保了产品能够有效支持该胶质母细胞瘤细胞的稳定快速生长,并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞提供稳定且可重复生长特性及药物反应性的各类机制研究和药物筛选实验至关重要。

六、注意事项

1. 储存与时效:请务必在推荐的温度条件(2℃~8℃)下避光保存产品,并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。

2. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。由于含有血清,冻融后可能会有少量絮状物析出,轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀、颜色异常或产生异味,请勿使用。

3. 污染防控:虽然本产品已含有抗生素,但为保持产品的最佳使用效果,不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时,严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时,务必采取密封措施,避免与空气长时间接触。

4. 即用型说明:本产品含有血清(10% FBS)和抗生素(青霉素-链霉素双抗,1%),可以直接使用。如无特别需要,不需要额外添加血清或抗生素。

5. 细胞特性:U-87 MG细胞为胶质母细胞瘤细胞,建议在低代次时冻存足量细胞,并定期进行支原体检测、细胞身份鉴定(如STR分型)和关键分子标志物验证。了解其PTEN缺失、EGFR表达等分子背景对于相关靶向研究至关重要。

6. 缓冲液说明:本产品含有碳酸氢钠缓冲体系,常规培养时需置于含5% CO2的培养箱中以维持适宜的pH环境(7.2-7.4)。

7. 生物安全:U-87 MG细胞来源于人胶质瘤患者,属于潜在生物危害材料,操作时应在生物安全柜内进行,并遵守相应的生物安全规范(通常为BSL-2级)。所有接触过细胞的器皿、培养基和废弃物应进行妥善灭菌处理,防止环境污染。

8. 交叉污染:需特别注意避免与其他细胞系,特别是其他胶质瘤细胞系(如U343、U251、SF-268等)发生交叉污染,建议定期进行细胞身份鉴定。

9. 用途限制:U-87 MG细胞专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。

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