一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-247
2. 产品名称： HBE4-E6/E7细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL
6. 培养基成分： DMEM/F12 + 10% FBS
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： HBE4-E6/E7细胞专用培养基已包含 HBE4-E6/E7细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于HBE4-E6/E7细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

HBE4-E6/E7细胞系是一种人源永生化支气管上皮细胞系，是研究正常呼吸道生理、上皮细胞屏障功能、空气污染物暴露、呼吸道上皮损伤与修复、以及慢性呼吸道疾病（如慢性阻塞性肺疾病、哮喘）发病机制的重要体外模型。呼吸道是人体与外界环境直接接触的门户，其上皮屏障在防御病原体入侵、清除异物和维持免疫稳态中发挥着核心作用。HBE4-E6/E7细胞来源于人支气管组织，通过转染人乳头瘤病毒（HPV）的E6/E7癌基因实现永生化，在保留正常支气管上皮细胞许多关键特性（如形成紧密连接、表达特定表面标志物）的同时，获得了体外长期增殖的能力，是研究呼吸道上皮细胞增殖、分化、屏障形成、信号转导和炎症反应的宝贵非肿瘤性工具。该细胞系呈上皮样形态，贴壁生长，作为气道上皮细胞的代表，为研究环境刺激（如香烟烟雾、PM2.5、过敏原）的毒性效应、评估药物对呼吸道的影响以及模拟呼吸道病毒感染提供了标准化的平台。其核心应用包括：作为体外模型研究气道上皮屏障功能，通过测量跨上皮电阻（TEER）和通透性评估紧密连接蛋白（如ZO-1, Occludin, Claudins）的表达与调控；模拟气道上皮黏液分泌、纤毛摆动相关功能的研究；研究气道上皮细胞对空气污染物、病原体相关分子模式（如LPS）和细胞因子（如IL-4, IL-13, TNF-α）的炎症与免疫反应，探索其在哮喘和COPD发病中的作用；评估香烟烟雾提取物、纳米颗粒或挥发性有机物等环境毒物对呼吸道上皮的细胞毒性、氧化应激和基因表达的影响；用于研究呼吸道上皮细胞与常见呼吸道病毒（如呼吸道合胞病毒、流感病毒、鼻病毒）的相互作用；作为研究气道上皮细胞损伤后修复和再生的模型；用于构建气-液界面（ALI）培养模型，以更好地模拟体内气道上皮的生理状态；以及用于筛选和评估保护或修复呼吸道屏障功能、减轻炎症反应的新型药物或功能性成分。HBE4-E6/E7细胞为深入理解呼吸道生理与病理、评估环境暴露风险以及开发针对呼吸道疾病的干预策略提供了一个特征清晰、稳定且极具价值的标准化研究平台。

HBE4-E6/E7细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为人永生化支气管上皮细胞的标准化培养与实验需求而进行科学优化。HBE4-E6/E7细胞是一种贴壁生长的人呼吸道上皮细胞，其体外培养需要提供能支持其稳定增殖、维持上皮特性并适应其代谢需求的营养环境。本产品经过精心配比，以广泛适用于多种上皮细胞和干细胞培养、兼具DMEM和Ham's F12培养基优点的DMEM/F12培养基为基础，并添加了能有效支持HBE4-E6/E7细胞贴壁、铺展和增殖的关键优化成分：即提供必需生长因子、激素和附着因子的优质胎牛血清（FBS，终浓度10%）。该“DMEM/F12 + 10% FBS”的配方是针对许多上皮细胞系，包括永生化气道上皮细胞系培养的常用且可靠的标准方案。DMEM/F12培养基提供了丰富的氨基酸、维生素和无机盐，营养均衡，特别适合对营养成分要求较高的上皮细胞。10%的血清浓度为HBE4-E6/E7细胞提供了充足的营养支持，能够满足其常规增殖需求，并有助于维持其基本的上皮细胞表型。与一些其他产品不同，本配方未预先添加抗生素，为用户提供了根据自身实验需求（如进行特定病原体感染或长期功能研究时）灵活选择是否添加抗生素的自由度，同时也避免了抗生素可能对细胞某些生理功能（如黏液分泌或纤毛发生）造成的潜在影响。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持HBE4-E6/E7细胞以典型的上皮样形态良好贴壁和生长，增殖活力稳定，为后续的屏障功能检测、毒性测试、炎症刺激研究或气-液界面（ALI）培养提供状态可靠的细胞来源。这保证了实验结果的准确性和可重复性，特别是在进行涉及复杂功能测定、长期环境暴露模拟或高通量筛选的关键研究时至关重要。它为呼吸道生物学与疾病研究，提供了一个稳定、通用且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行配制。其主要成分如下：
1. 基础培养基： DMEM/F12培养基（1:1混合），占比90%。
2. 血清： 优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为10%。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。本产品未预先添加抗生素，用户可根据实验需求（如常规维持培养或特定实验条件）自行添加青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin）等抗生素。该配方旨在为HBE4-E6/E7细胞提供均衡的基础营养支持，以满足其在常规维持和实验研究中的需求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。
                                     冷冻保存： -20℃避光保存，保质期可延长至12个月。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入推荐的保存温度（2-8℃或-20℃）下，避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理：可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持血清中生长因子活性及成分稳定。若选择-20℃保存，可根据日常实验用量进行分装，分装后也需严格避光保存。

使用前准备：使用前，请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，不影响产品正常使用。

无菌操作与抗生素添加：所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程。由于本产品未预先添加抗生素，为降低污染风险，强烈建议用户在常规细胞维持培养时，在使用前按常规浓度（如1%）向培养基中添加青霉素-链霉素双抗溶液。对于某些特定的感染实验、气-液界面培养或长期功能研究，可根据实验方案决定是否使用不含抗生素的培养基。

培养条件：HBE4-E6/E7细胞使用本产品时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长，需定期在显微镜下观察其形态（典型的上皮样、铺路石状）和融合度。

细胞传代：当细胞融合度达到80-90%时，即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后，用本专用培养基（或含血清的培养基）完全中和胰酶，离心收集细胞，用新鲜预热的本专用培养基（建议已添加抗生素）重悬，并按适当比例（通常1:3至1:5）接种到新的培养容器中。为了研究屏障功能或进行ALI培养，细胞常需要接种在Transwell等多孔滤膜插入件上。

换液频率：根据细胞生长速度，通常每2-3天更换一次新鲜培养基。

气-液界面（ALI）培养：若要诱导细胞分化形成具有纤毛和黏液分泌功能的类体内上皮，可在细胞于Transwell上长满后，移除顶室培养基，仅保留底室培养基，使细胞顶面暴露于空气中培养数周。

屏障功能与刺激实验：若用于跨上皮电阻（TEER）测量、通透性实验或炎症因子（如IL-13）刺激、环境毒物（如香烟烟雾提取物）暴露，建议在处理前将细胞用新鲜培养基换液，并使用已形成稳定单层的细胞。

病毒感染实验：可用于研究呼吸道病毒感染，此时需使用不含抗生素的培养基，并注意生物安全防护。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持HBE4-E6/E7这一重要的呼吸道研究模型的纯净性，以及确保涉及屏障功能、长期培养或病原体互作等关键研究结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均使用标准的HBE4-E6/E7细胞进行生长验证试验。验证时，会在培养基中添加常规浓度的抗生素。验证结果表明，细胞在本专用培养基（添加抗生素后）中贴壁良好，增殖活力稳定，细胞形态典型（上皮样），确保了产品能够有效支持该支气管上皮细胞的最佳生长状态，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持稳定的生长和上皮特性以进行可靠的屏障功能、毒理或感染研究至关重要，是保证呼吸道相关研究实验结果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。

2. 外观检查：使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后，可能会有少量絮状物析出，不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。

3. 污染防控与抗生素：本产品未预先添加抗生素。 为保持产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。强烈建议用户在常规细胞培养时，在使用前按需添加抗生素（如1%青霉素-链霉素双抗），以有效预防细菌污染。同时，严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时，务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明：本产品含有血清（10% FBS），但不含抗生素。用户可根据实验需求自行添加。若进行病毒感染等特殊实验，可能需要根据方案使用不含抗生素的培养基。

5. 细胞特性：HBE4-E6/E7细胞为贴壁生长的永生化支气管上皮细胞系，具有形成紧密连接和分化的潜力。需定期观察细胞形态和生长速度。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用。

6. 功能分化：该细胞在气-液界面（ALI）培养条件下可进一步分化为具有纤毛细胞和杯状细胞特征的类体内上皮，是研究气道生理和病理的高级模型。

7. 模型应用：HBE4-E6/E7是研究气道上皮屏障功能、环境毒理学、呼吸道炎症和病毒感染的常用模型。

8. 生物安全：HBE4-E6/E7细胞来源于人支气管组织，属于潜在生物危害材料。若用于病毒感染实验，需在相应生物安全级别的实验室操作。操作时应遵守实验室生物安全规范，在生物安全柜内进行，废弃物应按照感染性医疗废物标准进行处理。

9. 用途限制：HBE4-E6/E7细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。