一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-279
2. 产品名称： WERI-RB-1细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL
6. 培养基成分： RPMI-1640 + 15% FBS + 青霉素-链霉素 (PS) + 1% GlutaMAX™-I 谷氨酰胺替代物
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： WERI-RB-1细胞专用培养基已包含 WERI-RB-1细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于WERI-RB-1细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

WERI-RB-1细胞系是一种至关重要的人视网膜母细胞瘤（Retinoblastoma, RB）细胞系，是研究这种儿童眼内恶性肿瘤的经典模型。该细胞系来源于一名患有遗传性双侧视网膜母细胞瘤患者的眼球摘除标本，具有明确的RB1基因突变背景。WERI-RB-1细胞是研究视网膜母细胞瘤生物学特性、发病机制、肿瘤干细胞特性、药物反应和耐药性的核心工具。其核心应用包括：作为视网膜母细胞瘤研究的“金标准”体外模型，用于探究RB细胞的增殖、分化、凋亡抵抗、侵袭迁移及远处转移机制；评估针对视网膜母细胞瘤的各类治疗策略，包括传统化疗药物（如卡铂、依托泊苷、长春新碱）、靶向治疗（如HDAC抑制剂、MDM2抑制剂等）、热疗、光动力疗法以及放射治疗的敏感性；研究视网膜母细胞瘤的耐药机制，特别是对化疗药物的获得性耐药，是开发新型治疗策略和克服耐药性的重要平台；探索肿瘤微环境对RB细胞生长和存活的影响；用于研究RB1基因（抑癌基因）失活后，下游信号通路（如E2F/RB通路）如何失控导致细胞周期异常和肿瘤发生；作为研究肿瘤干细胞（CSCs）或肿瘤起始细胞（TICs）在RB发生、复发和转移中作用的模型；用于基因功能研究和基因治疗探索，通过基因编辑技术恢复RB1功能或引入治疗基因；用于高通量药物筛选，发现潜在的新型抗视网膜母细胞瘤化合物；建立异种移植瘤模型，用于体内药效评估和治疗方案优化。WERI-RB-1细胞因其明确的遗传背景、稳定的生长特性以及在RB研究中的广泛应用，成为眼科肿瘤学和儿童肿瘤研究领域不可或缺的标准化工具。

WERI-RB-1细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为人视网膜母细胞瘤细胞的特定生长需求而进行科学优化。WERI-RB-1细胞是一种悬浮或半贴壁生长的肿瘤细胞，其体外培养需要提供支持其高代谢需求并维持其恶性表型的特殊环境。本产品经过精心配比，以广泛适用于多种淋巴和肿瘤细胞的RPMI-1640培养基为基础，并特别添加了能有效支持WERI-RB-1细胞旺盛增殖和维持细胞活力的关键优化成分：首先，将优质胎牛血清（FBS）的浓度提升至15%，以提供更丰富的生长因子、激素和营养物质，满足RB细胞快速增殖和存活的需要；其次，添加了常规工作浓度的青霉素-链霉素（Penicillin-Streptomycin, PS）以有效预防细菌污染；尤为重要的是，我们添加了1%的GlutaMAX™-I，这是一种更稳定、利用率更高的L-谷氨酰胺替代物。L-谷氨酰胺是细胞能量代谢和蛋白质合成的重要底物，对于高代谢的肿瘤细胞（如WERI-RB-1）至关重要。GlutaMAX™-I在溶液中更稳定，不易分解产生氨等有毒物质，能为细胞提供更持久、更优越的谷氨酰胺供应，从而更好地维持细胞健康、减少细胞应激和延长培养基的使用寿命。该“RPMI-1640 + 15% FBS + PS + 1% GlutaMAX™-I”的配方是针对WERI-RB-1细胞培养的优化方案。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持WERI-RB-1细胞以典型的视网膜母细胞瘤细胞形态良好生长（悬浮或轻微贴壁），增殖活力旺盛，为后续的药物敏感性测试、分子机制探索、凋亡研究或体内模型构建提供状态可靠且一致的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可重复性，对于需要细胞保持高活力和稳定恶性表型的视网膜母细胞瘤研究至关重要。它为视网膜母细胞瘤研究领域，提供了一个稳定、高效、即用且经过深度优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下：
1. 基础培养基： RPMI-1640培养基（Roswell Park Memorial Institute 1640），占比约84%。
2. 血清： 优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为15%。
3. 抗生素： 青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin, PS），常规工作浓度。
4. 谷氨酰胺替代物： GlutaMAX™-I（L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽），终浓度为1%。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。该配方旨在为悬浮/半贴壁生长的人视网膜母细胞瘤WERI-RB-1细胞提供全面的营养支持和有效的污染防护。用户可根据具体的实验目的（如无血清刺激、添加特定细胞因子），在无菌条件下进行补充或调整。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。这是推荐的常规保存方式。
                                     冷冻保存： -20℃避光储存，保质期可延长至12个月。但需注意，反复冻融可能影响血清中生长因子的活性和抗生素的稳定性，建议根据实验用量分装后冻存，并避免多次冻融。GlutaMAX™-I比普通谷氨酰胺更耐冻融。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入2-8℃冰箱避光保存，避免任何温度剧烈波动或长时间置于室温。

储存管理：建议在2-8℃下避光保存，并在有效期内使用。若需长期保存，可进行小体积分装后于-20℃冻存。

使用前准备：使用前，请将所需用量的培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。预热时间不宜过长。请轻轻颠倒混匀后再使用。请注意，由于含有血清，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。

无菌操作：虽然本产品已含有抗生素，但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程，以最大程度降低污染风险。

特殊实验需求：对于药物处理实验，需注意药物在含高浓度血清培养基中的溶解度和稳定性，有时需用低血清或无血清培养基进行短期处理。对于肿瘤干细胞富集研究，可能需要更换为特定的无血清培养基。对于悬浮培养，需注意定期轻柔吹打或摇动培养瓶以防止细胞过度聚集。

培养条件：WERI-RB-1细胞使用本产品时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞通常以悬浮或轻微贴壁的方式生长，形成细胞团块，需定期在显微镜下观察其形态、活力和聚集情况。

细胞传代与计数：当细胞密度较高、培养基颜色变黄或细胞活性下降时，即可进行传代。通常采用离心法收集细胞，用新鲜预热的本专用培养基重悬，并按适当密度接种到新的培养容器中。传代时轻柔吹打以分散细胞团块，但避免过度用力损伤细胞。

换液频率：根据细胞生长速度和培养基消耗情况，通常每2-3天更换一次新鲜培养基或进行半量换液。

药物敏感性测试：通过MTT、CCK-8、ATP检测等方法评估化疗药、靶向药对细胞增殖的抑制作用。

细胞周期与凋亡分析：通过流式细胞术分析药物处理后的细胞周期阻滞和凋亡情况。

分子生物学研究：可用于提取RNA、DNA或蛋白质，进行RB1基因突变分析、基因表达谱、蛋白磷酸化、信号通路等分析。

体内成瘤实验：可用于准备细胞悬液，接种于免疫缺陷小鼠（如裸鼠）的眼内或皮下，建立视网膜母细胞瘤移植瘤模型。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。开封后也应严格在2-8℃避光保存。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持WERI-RB-1这一重要视网膜母细胞瘤研究模型的纯净性，以及确保涉及长期培养和药物测试的实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均使用标准的WERI-RB-1细胞进行生长验证试验。验证结果表明，细胞在本专用培养基中生长状态良好，增殖活力旺盛，细胞形态典型，确保了产品能够有效支持该视网膜母细胞瘤细胞的稳定快速生长，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞提供稳定且可重复生长特性的各类机制研究和药物筛选实验至关重要。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。

2. 外观检查：使用前请观察培养基是否澄清。由于含有血清，冻融后可能会有少量絮状物析出，轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。

3. 污染防控：虽然本产品已含有抗生素，但为保持产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时，严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时，务必采取密封措施。

4. 即用型说明：本产品含有血清（15% FBS）、抗生素（青霉素-链霉素双抗）和GlutaMAX™-I，可以直接使用。如无特别需要，不需要额外添加血清、抗生素或谷氨酰胺。

5. 细胞特性：WERI-RB-1细胞为悬浮/半贴壁生长的肿瘤细胞，建议在低代次时冻存足量细胞，并定期进行支原体检测和细胞身份鉴定（如STR分析）。了解其RB1基因突变状态对于实验设计至关重要。

6. 药物实验：进行药物处理时，需注意高浓度血清可能影响部分药物的活性或结合，建议在药物处理阶段根据药物特性评估是否需要降低血清浓度或使用无血清培养基进行短期处理，并在实验设计中设置合适的对照。

7. 生物安全：WERI-RB-1细胞来源于人视网膜母细胞瘤组织，属于潜在生物危害材料，操作时应在生物安全柜内进行，并遵守相应的生物安全规范（通常为BSL-2级）。所有接触过细胞的器皿和废弃物应进行妥善灭菌处理。

8. 交叉污染：需特别注意避免与其他细胞系（尤其是其他悬浮生长的肿瘤细胞系）发生交叉污染，建议定期进行细胞身份鉴定。

9. 用途限制：WERI-RB-1细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。