一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-281
2. 产品名称： P53R细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL
6. 培养基成分： 90% Minimum Essential Medium (MEM) + 10% FBS + 青霉素-链霉素 (PS)
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： P53R细胞专用培养基已包含 P53R细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于P53R细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

P53R细胞是一类经过基因工程改造的、稳定表达特定突变型p53蛋白（通常为p53-R175H或p53-R273H等热点突变）的细胞模型。这些突变型p53（mutant p53, mtp53）不仅丧失了野生型p53（wtp53）的肿瘤抑制功能，还常常获得新的致癌功能（gain-of-function, GOF），促进肿瘤的增殖、侵袭、转移、代谢重编程和治疗抵抗。P53R细胞是研究p53基因突变在肿瘤发生发展中作用的核心工具，特别是探索突变型p53的致癌机制、开发靶向突变型p53新疗法的重要平台。其核心应用包括：作为研究p53热点突变（如R175H, R273H, R248W等）致癌功能的标准化模型，用于探究GOF特性如何影响细胞周期、凋亡、DNA修复、代谢、自噬和转移；评估靶向突变型p53蛋白的小分子化合物（如恢复野生型构象的化合物PRIMA-1/APR-246，或促进其降解的化合物）的治疗效果；研究突变型p53如何与其他癌基因（如Ras, Myc）或信号通路（如PI3K/AKT, Wnt/β-catenin）协同促进肿瘤发生；探索肿瘤微环境中，表达突变型p53的细胞如何影响免疫浸润和基质细胞；用于评估化疗药物（如顺铂、阿霉素）和放疗对携带不同p53状态细胞的敏感性差异，研究突变型p53介导的治疗抵抗机制；用于高通量筛选，发现能够选择性杀伤p53突变肿瘤细胞或逆转其恶性表型的新药；作为研究p53突变与特定癌症类型（如卵巢癌、乳腺癌、胶质母细胞瘤等）关联的功能性模型。P53R细胞因其明确的遗传背景（即特定的p53突变），为精准研究该突变的生物学后果和开发靶向策略提供了不可或缺的标准化工具。

P53R细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑此类基因工程细胞模型的通用生长需求而进行科学优化。P53R细胞通常基于广泛使用的细胞系（如H1299, Saos-2等p53缺失的细胞）构建，通过转染稳定表达特定的突变型p53。这类细胞多为贴壁生长，其体外培养需要提供支持其稳定增殖并维持外源基因表达的适宜环境。本产品经过精心配比，以经典的Minimum Essential Medium (MEM)为基础（占比90%），这是一种成分明确、广泛适用于多种贴壁哺乳动物细胞（包括成纤维细胞和上皮细胞）的基础培养基。MEM为细胞提供了必需的氨基酸、维生素和盐分，配方简洁高效。在此基础上，我们添加了10%的优质胎牛血清（FBS），以提供细胞生长所必需的生长因子、激素和附着因子，确保细胞良好贴壁和快速增殖。同时，产品中还包含了常规工作浓度的青霉素-链霉素（PS），以有效预防细菌污染，这对于需要长期培养以维持外源基因稳定表达的细胞系尤为重要。该“90% MEM + 10% FBS + PS”的配方是培养多种贴壁细胞系的经典且可靠的方案。MEM培养基的稳定性好，配合10%的血清，能为P53R这类工程细胞提供均衡的营养支持，确保其稳定生长，并减少因培养基成分复杂可能带来的实验变量。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持多种背景的P53R工程细胞以良好形态贴壁生长，增殖活力稳定，为后续的基因功能研究、药物筛选、信号通路分析等实验提供状态可靠且一致的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可重复性，对于需要精确评估p53突变功能的分子生物学研究至关重要。它为p53突变研究与靶向治疗开发领域，提供了一个通用、稳定、即用且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下：
1. 基础培养基： Minimum Essential Medium (MEM)，占比90%。
2. 血清： 优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为10%。
3. 抗生素： 青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin, PS），常规工作浓度。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。该配方旨在为贴壁生长的、稳定表达突变型p53的工程细胞（P53R）提供均衡的营养支持和有效的污染防护。用户可根据具体的实验目的（如无血清刺激、添加特定药物或细胞因子），在无菌条件下进行补充或调整。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。这是推荐的常规保存方式。
                                     冷冻保存： -20℃避光储存，保质期可延长至12个月。但需注意，反复冻融可能影响血清中生长因子的活性，建议根据实验用量分装后冻存，并避免多次冻融。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入2-8℃冰箱避光保存，避免任何温度剧烈波动或长时间置于室温。

储存管理：建议在2-8℃下避光保存，并在有效期内使用。若需长期保存，可进行小体积分装后于-20℃冻存。

使用前准备：使用前，请将所需用量的培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。预热时间不宜过长。请轻轻颠倒混匀后再使用。请注意，由于含有血清，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。

无菌操作：虽然本产品已含有抗生素，但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程，以最大程度降低污染风险。

特殊实验需求：对于靶向突变型p53的药物（如APR-246）处理实验，通常在此完全培养基中进行。对于需要评估药物对细胞凋亡、周期影响的实验，需根据药物特性决定处理时间。对于研究代谢重编程，可能需要更换为特定的代谢分析培养基。对于需要诱导外源基因表达（如使用四环素诱导系统）的P53R细胞，需遵循相应的操作规范。

培养条件：P53R细胞使用本产品时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。细胞通常为贴壁生长，具体形态（上皮样或成纤维样）取决于其亲本细胞背景，需定期在显微镜下观察其形态和融合度。

细胞传代：当细胞融合度达到80-90%时，即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后，用本专用培养基（或含血清的培养基）完全中和胰酶，离心收集细胞，用新鲜预热的本专用培养基重悬，并按适当比例接种到新的培养容器中。

换液频率：根据细胞生长速度，通常每2-3天更换一次新鲜培养基。

基因表达验证：需定期通过Western Blot、qPCR等方法验证突变型p53蛋白的稳定表达。

药物敏感性测试：通过MTT、CCK-8、克隆形成实验等方法评估靶向突变型p53的药物、化疗药对细胞增殖的抑制作用，并与对照细胞（如空载体转染细胞）进行比较。

功能分析：通过流式细胞术分析细胞周期和凋亡；通过Transwell、划痕实验评估细胞迁移和侵袭能力的变化；通过Seahorse分析等方法研究细胞代谢改变。

分子生物学研究：可用于提取RNA、DNA或蛋白质，进行突变型p53下游靶基因表达、信号通路激活状态等分析。

体内成瘤实验：可用于准备细胞悬液，与基质胶混合后接种于免疫缺陷小鼠皮下，建立移植瘤模型，用于评估靶向药物的体内疗效。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。开封后也应严格在2-8℃避光保存。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持P53R这类基因工程研究模型的纯净性，以及确保涉及长期培养和药物测试的实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均使用具有代表性的P53R细胞进行生长验证试验。验证结果表明，细胞在本专用培养基中贴壁良好，增殖活力稳定，细胞形态正常，确保了产品能够有效支持该类工程细胞的稳定生长，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞提供稳定且可重复生长特性及基因表达水平的各类功能研究和药物筛选实验至关重要。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。

2. 外观检查：使用前请观察培养基是否澄清。由于含有血清，冻融后可能会有少量絮状物析出，轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。

3. 污染防控：虽然本产品已含有抗生素，但为保持产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时，严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时，务必采取密封措施。

4. 即用型说明：本产品含有血清（10% FBS）和抗生素（青霉素-链霉素双抗），可以直接使用。如无特别需要，不需要额外添加血清或抗生素。

5. 细胞特性：P53R细胞是基因工程细胞系，通常需要通过抗生素（如G418, Puromycin）维持筛选压力以保持外源基因的稳定表达。用户在使用时，需根据细胞构建时使用的筛选标记，在本培养基中加入相应浓度的筛选抗生素。建议在低代次时冻存足量细胞，并定期验证突变型p53的表达水平。

6. 实验对照：进行功能研究或药物测试时，必须设置合适的对照细胞，例如转染空载体的亲本细胞，以准确评估突变型p53的特异性作用。

7. 生物安全：P53R细胞来源于人工改造的细胞系，属于潜在生物危害材料，操作时应在生物安全柜内进行，并遵守相应的生物安全规范（通常为BSL-2级）。所有接触过细胞的器皿和废弃物应进行妥善灭菌处理。

8. 交叉污染：需特别注意避免与其他细胞系发生交叉污染，建议定期进行细胞身份鉴定和p53突变状态的验证。

9. 用途限制：P53R细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。