1. 货号: HY-CSC-284
2. 产品名称: U937细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.2-7.4
5. 产品规格: 500mL
6. 培养基成分: RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 青霉素-链霉素溶液
7. 细菌检测: 阴性
8. 真菌检测: 阴性
9. 支原体检测: 阴性
10. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
11. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
12. 产品简介: U937细胞专用培养基已包含 U937细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于U937细胞的培养。
13. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
14. 运输条件: 冰袋冷藏运输
15. 有效期: 3个月
16. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。
U937细胞是一种人组织细胞淋巴瘤来源的单核细胞系,通常被归类为人单核细胞白血病(Histiocytic Lymphoma)或单核细胞淋巴瘤(Monocytic Lymphoma)细胞。该细胞系具有单核-巨噬细胞(Monocytic-Macrophage)前体细胞的特征,在特定诱导剂(如佛波酯、维生素D3、视黄酸等)刺激下,可向巨噬细胞或树突状细胞方向分化,是研究单核/巨噬细胞分化、功能以及相关免疫反应、炎症反应、肿瘤免疫等的重要模型。其核心应用包括:作为研究单核/巨噬细胞分化、功能及信号转导的经典模型,用于探究分化诱导剂(如PMA、维生素D3等)对细胞表型和功能的影响;用于研究Toll样受体(TLRs)、NOD样受体(NLRs)等模式识别受体(PRRs)介导的固有免疫应答,以及巨噬细胞在抗感染和肿瘤免疫中的作用;用于研究细胞因子(如IL-1β、TNF-α、IFN-γ等)和趋化因子对单核/巨噬细胞活化的影响;用于评估药物、毒素或免疫调节剂对单核/巨噬细胞活力、吞噬功能、活性氧产生、细胞因子分泌等的影响;用于研究HIV、HCV等病毒与单核/巨噬细胞的相互作用及病毒复制;用于研究肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)在肿瘤进展、免疫逃逸和治疗抵抗中的作用;用于研究巨噬细胞极化的经典模型(如M1型/促炎型和M2型/抗炎型);用于建立共培养体系,研究巨噬细胞与其他免疫细胞(如T细胞)或肿瘤细胞之间的相互作用;用于基因功能研究,通过转染、CRISPR/Cas9等技术探索特定基因在单核/巨噬细胞功能中的作用;用于高通量筛选,发现能够调节巨噬细胞功能的化合物或生物制剂;用于评估纳米材料、药物递送系统等对单核/巨噬细胞的生物相容性和细胞毒性。U937细胞因其分化潜能明确、对诱导剂反应稳定,成为免疫学、肿瘤学、药理学和毒理学等领域广泛使用的标准化工具。
U937细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为人单核细胞白血病细胞的特定生长需求而进行科学优化。U937细胞是一种悬浮或部分贴壁(轻微附着)生长的细胞,呈圆形或类圆形,具有典型的单核细胞形态。其体外培养需要提供支持其稳定悬浮生长并维持其功能的适宜环境。本产品经过精心配比,以广泛适用于多种造血和肿瘤细胞的RPMI-1640培养基为基础,并添加了能有效支持U937细胞旺盛增殖和维持细胞活力的关键优化成分:即提供充足生长因子、激素和营养物质的优质胎牛血清(FBS,终浓度10%),以满足其高代谢需求;以及常规工作浓度的青霉素-链霉素双抗(终浓度1%)以有效预防细菌污染,这对于生长快速、需要频繁传代的细胞尤为重要。该“RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 双抗”的配方是针对多种单核细胞白血病细胞系(包括U937)培养的常用且经过验证的方案。RPMI-1640培养基含有丰富的维生素和氨基酸,能很好地支持高代谢肿瘤细胞的生长。10%的血清浓度为细胞的快速增殖提供了必要的支持。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持U937细胞以典型的单核细胞白血病细胞形态生长(悬浮或轻微贴壁,细胞小而圆,聚集成团),增殖活力旺盛,为后续的细胞功能研究、药物机制探索、分化诱导或体内模型构建提供状态可靠且一致的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可重复性,对于需要细胞保持高活力和稳定细胞表型的功能研究至关重要。它为单核/巨噬细胞及相关白血病研究领域,提供了一个稳定、高效、即用且经过优化的专用培养解决方案。
本产品为即用型完全培养基,其配方经过优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下:
1. 基础培养基: RPMI-1640培养基(Roswell Park Memorial Institute 1640),占比约89%。
2. 血清: 优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),终浓度为10%。
3. 抗生素: 青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin),终浓度为1%。
注:以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。该配方旨在为悬浮或轻微贴壁生长的人单核细胞白血病U937细胞提供全面的营养支持和有效的污染防护。用户可根据具体的实验目的(如无血清刺激、添加特定细胞因子),在无菌条件下进行补充或调整。
1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期: 常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。这是推荐的常规保存方式。
冷冻保存: -20℃避光储存,保质期可延长至12个月。但需注意,反复冻融可能影响血清中生长因子的活性和抗生素的稳定性,建议根据实验用量分装后冻存,并严格避免多次冻融。
3. 使用建议:
收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入2-8℃冰箱避光保存,避免任何温度剧烈波动或长时间置于室温。
储存管理:建议在2-8℃下避光保存,并在有效期内使用。若需长期保存,可进行小体积分装后于-20℃冻存。
使用前准备:使用前,请将所需用量的培养基在37℃水浴中预热至适宜温度(若为冷冻保存,需先完全解冻)。预热时间不宜过长。请轻轻颠倒混匀后再使用。请注意,由于含有血清,冻融后可能会有少量絮状物析出,此为正常现象,轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。
无菌操作:虽然本产品已含有抗生素,但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程,以最大程度降低污染风险。
特殊实验需求:对于细胞因子(如PMA、维生素D3)处理实验,通常在此完全培养基中进行。对于研究细胞分化,需使用特定的分化诱导剂。对于研究凋亡机制,需注意处理时间和浓度。对于研究细胞吞噬功能,需使用调理素处理的颗粒(如酵母聚糖、荧光微球)。对于悬浮培养,需注意定期轻柔吹打或摇动培养瓶以防止细胞过度聚集成团,影响营养物质和药物的均匀分布。
培养条件:U937细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞通常以悬浮的方式生长,形成细胞团块,需定期在显微镜下观察其形态(小而圆)、活力和聚集情况。
细胞传代与计数:当细胞密度较高、培养基颜色变黄或细胞活性下降时,即可进行传代。由于细胞易成团,通常采用离心法收集细胞,用新鲜预热的本专用培养基重悬,并通过轻柔吹打适当分散细胞团块(避免过度用力损伤细胞),然后按适当密度接种到新的培养容器中。传代比例通常较高。
换液频率:根据细胞生长速度快的特点,通常每2-3天更换一次新鲜培养基或进行半量换液。
化疗敏感性测试:通过MTT、CCK-8、ATP检测等方法评估EP/EC方案药物及其他化疗药对细胞增殖的抑制作用,是SCLC研究的核心内容之一。
细胞周期与凋亡分析:通过流式细胞术(PI染色, Annexin V/PI双染)分析药物处理后的细胞周期阻滞和凋亡情况,研究SCLC的凋亡抵抗机制。
神经内分泌标志物检测:通过免疫细胞化学、Western Blot或qPCR等方法检测嗜铬粒蛋白A、突触素等标志物的表达。
分子生物学研究:可用于提取RNA、DNA或蛋白质,进行MYC家族基因、TP53、RB1等关键基因的突变/表达分析,以及相关信号通路的研究。
体内成瘤实验:可用于准备细胞悬液,接种于免疫缺陷小鼠(如裸鼠)皮下或尾静脉,建立SCLC移植瘤或转移模型,用于体内药效评估。
开封后保存:产品开封后,若需再次储存,务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染,并建议尽快使用完毕。开封后也应严格在2-8℃避光保存。
为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险。这对于维持U937这一重要单核细胞白血病研究模型的纯净性,以及确保涉及长期培养和药物测试(尤其是化疗敏感性测试)的实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.2-7.4)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的U937细胞进行生长验证试验。验证结果表明,细胞在本专用培养基中生长状态良好,增殖活力旺盛,细胞形态典型(小而圆的单核细胞样,易成团),确保了产品能够有效支持该单核细胞白血病细胞的稳定快速生长,并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞提供稳定且可重复生长特性及药物反应性的各类机制研究和药物筛选实验至关重要。
1. 储存与时效:请务必在推荐的温度条件(2℃~8℃)下避光保存产品,并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。
2. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。由于含有血清,冻融后可能会有少量絮状物析出,轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常,请勿使用。
3. 污染防控:虽然本产品已含有抗生素,但为保持产品的最佳使用效果,不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时,严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时,务必采取密封措施。
4. 即用型说明:本产品含有血清(10% FBS)和抗生素(青霉素-链霉素双抗,1%),可以直接使用。如无特别需要,不需要额外添加血清或抗生素。
5. 细胞特性:U937细胞为单核细胞白血病细胞,生长快速,易聚集成团,建议在低代次时冻存足量细胞,并定期进行支原体检测和细胞身份鉴定。了解其典型的细胞表面标志物表达(如CD14、CD33、CD11b)和分化潜能对于实验设计至关重要。
6. 细胞团块处理:传代或药物处理前,需轻柔吹打以适当分散细胞团块,确保细胞计数准确和药物作用均匀,但避免剧烈吹打导致细胞损伤。
7. 生物安全:U937细胞来源于人单核细胞白血病组织,属于潜在生物危害材料,操作时应在生物安全柜内进行,并遵守相应的生物安全规范(通常为BSL-2级)。所有接触过细胞的器皿和废弃物应进行妥善灭菌处理。
8. 交叉污染:需特别注意避免与其他细胞系(尤其是其他悬浮生长的肿瘤细胞系)发生交叉污染,建议定期进行细胞身份鉴定。
9. 用途限制:U937细胞专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。