一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-253
2. 产品名称： KMH-2细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL
6. 培养基成分： 90% DMEM + 10% FBS
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： KMH-2细胞专用培养基已包含 KMH-2细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于KMH-2细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

KMH-2细胞系是一种人源恶性黑色素瘤细胞系，是研究皮肤肿瘤、黑色素瘤生物学、肿瘤转移、药物耐药性以及免疫治疗反应的重要体外模型。该细胞系来源于人皮肤恶性黑色素瘤转移灶，具有高度的侵袭性和转移潜能，是黑色素瘤研究中广泛使用的代表性细胞模型之一。恶性黑色素瘤是皮肤癌中最具侵袭性和致死性的类型，起源于皮肤黑色素细胞，其特点是易于早期发生转移，且对传统化疗药物常常不敏感。KMH-2细胞在体外保留了恶性黑色素瘤的许多关键特征，是探索黑色素瘤发病机制、评估靶向治疗药物（如BRAF抑制剂、MEK抑制剂、免疫检查点抑制剂）、研究肿瘤免疫逃逸以及探索新型治疗策略的宝贵工具。其核心应用包括：作为体外模型研究黑色素瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力；评估传统化疗药物及新型靶向药物（如维莫非尼、达拉非尼、曲美替尼）或免疫治疗药物（如抗PD-1抗体）对黑色素瘤细胞的杀伤效应和敏感性；研究黑色素瘤细胞中常见的致癌驱动基因突变（如BRAF V600E、NRAS、c-KIT）及其下游信号通路（如MAPK/ERK, PI3K/AKT）的异常激活；探索肿瘤细胞的免疫原性和与免疫细胞（如T细胞、NK细胞）的相互作用，用于评估免疫疗法的体外效果；用于基因功能研究，通过基因操作来验证特定基因在黑色素瘤进展、转移或药物反应中的作用；模拟肿瘤微环境，研究细胞因子、生长因子或细胞外基质对黑色素瘤细胞行为的影响；以及作为建立高转移性异种移植瘤模型或进行体内药效学研究的体外细胞来源。KMH-2细胞因其明确的黑色素瘤来源、较强的侵袭特性以及在黑色素瘤研究领域的广泛应用，成为皮肤肿瘤研究，特别是转移性黑色素瘤研究中的重要标准化工具。

KMH-2细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为人恶性黑色素瘤细胞的标准化培养与实验需求而进行科学优化。KMH-2细胞是一种贴壁生长、具有高侵袭潜能的肿瘤细胞，其体外培养需要提供能支持其快速增殖并维持其相关生物学特性的基础营养环境。本产品经过精心配比，以应用最广泛、营养成分标准化的DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）培养基为基础，并添加了能有效支持KMH-2细胞贴壁和旺盛增殖的关键优化成分：即提供必需生长因子、激素和附着因子的优质胎牛血清（FBS，终浓度10%）。该“90% DMEM + 10% FBS”的配方是针对KMH-2这一特定细胞系培养的经典、通用且可靠的标准方案。DMEM培养基含有较高浓度的葡萄糖、氨基酸和维生素，能够为快速增殖的肿瘤细胞提供充足的能量和合成原料。10%的血清浓度为癌细胞的生长提供了丰富的营养和促生长因子支持。与一些其他产品不同，本配方未预先添加抗生素，为用户提供了根据自身实验需求（如进行特定转染、与免疫细胞共培养或长期药物处理）灵活选择是否添加抗生素的自由度，同时也避免了抗生素可能对细胞某些生理状态、免疫特性或药物敏感性造成的潜在影响。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持KMH-2细胞以典型的贴壁方式快速生长，细胞形态均一，为后续的药物敏感性测试、迁移侵袭实验、免疫共培养研究或体内模型构建提供状态可靠且反应一致的细胞来源。这保证了实验结果的准确性和可重复性，特别是在进行涉及高通量药物筛选、关键信号通路验证、免疫疗法评估或转移机制研究等实验时至关重要。它为黑色素瘤及其他皮肤肿瘤研究领域，提供了一个稳定、高效且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行配制。其主要成分如下：
1. 基础培养基： DMEM培养基（高糖型），占比90%。
2. 血清： 优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为10%。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。本产品未预先添加抗生素，用户可根据实验需求（如常规维持培养或特定实验条件）自行添加青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin）等抗生素。该配方旨在为KMH-2细胞提供标准且充足的营养支持，以满足其快速生长和多种实验研究的需求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
保存条件与保质期：
2. 常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。
3. 冷冻保存： -20℃避光保存，保质期可延长至12个月。
4. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入推荐的保存温度（2-8℃或-20℃）下，避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理：可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持血清中生长因子活性及成分稳定。若选择-20℃保存，可根据日常实验用量进行分装，分装后也需严格避光保存。

使用前准备：使用前，请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，不影响产品正常使用。

无菌操作与抗生素添加：所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程。由于本产品未预先添加抗生素，为降低污染风险，强烈建议用户在常规细胞维持培养时，在使用前按常规浓度（如1%）向培养基中添加青霉素-链霉素双抗溶液。对于某些特定的转染实验、免疫细胞共培养或某些长期处理，可根据实验方案决定是否使用不含抗生素的培养基。

培养条件：KMH-2细胞使用本产品时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长，增殖较快，需定期在显微镜下观察其形态（通常为梭形或多边形）和融合度。

细胞传代：当细胞融合度达到80-90%时，即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后，用本专用培养基（或含血清的培养基）完全中和胰酶，离心收集细胞，用新鲜预热的本专用培养基（建议已添加抗生素）重悬，并按适当比例（通常1:3至1:6，因其增殖快）接种到新的培养容器中。

换液频率：根据细胞生长速度，通常每2-3天更换一次新鲜培养基。

药物敏感性测试（MTT/CCK-8等）：常用于评估靶向药物（如BRAF/MEK抑制剂）或化疗药物对黑色素瘤细胞的抗肿瘤活性。建议在处理前将细胞用新鲜培养基换液，并使用处于对数生长期的细胞。

迁移与侵袭实验：黑色素瘤具有高转移性，因此Transwell迁移实验和Matrigel侵袭实验是评估其转移潜能的关键方法。

免疫共培养：可用于研究与免疫细胞（如肿瘤浸润淋巴细胞、NK细胞）的共培养，以评估免疫细胞的杀伤活性或肿瘤细胞的免疫逃逸机制。

基因功能研究：可用于进行基因过表达、敲低或基因编辑等操作，以研究特定基因在黑色素瘤中的作用。

体内模型准备：可用于准备细胞悬液，以建立小鼠皮下或尾静脉注射转移模型。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持KMH-2这一重要的癌症研究模型的纯净性，以及确保涉及免疫共培养、长期药物处理或分子机制探索等关键研究结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均使用标准的KMH-2细胞进行生长验证试验。验证时，会在培养基中添加常规浓度的抗生素。验证结果表明，细胞在本专用培养基（添加抗生素后）中贴壁良好，增殖活力旺盛，细胞形态典型，确保了产品能够有效支持该黑色素瘤细胞的快速且稳定的生长，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持一致的生长状态、迁移能力和药物反应性以进行可靠的药理学、免疫学或转移生物学研究至关重要，是保证黑色素瘤研究实验结果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。

2. 外观检查：使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后，可能会有少量絮状物析出，不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。

3. 污染防控与抗生素：本产品未预先添加抗生素。 为保持产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。强烈建议用户在常规细胞培养时，在使用前按需添加抗生素（如1%青霉素-链霉素双抗），以有效预防细菌污染。同时，严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时，务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明：本产品含有血清（10% FBS），但不含抗生素。用户可根据实验需求自行添加。若进行某些特殊实验（如某些免疫共培养），可能需要根据方案使用不含抗生素的培养基。

5. 细胞特性：KMH-2细胞为贴壁生长的恶性黑色素瘤细胞系，增殖速度快，侵袭性强，具有高致瘤性和转移性。需定期观察细胞形态和生长速度，避免过度生长。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用。

6. 药物处理：进行靶向药物（特别是BRAF抑制剂）测试时，建议先确认细胞是否携带相应的敏感突变（如BRAF V600E），并设置合适的浓度梯度和作用时间。

7. 侵袭实验：进行Matrigel侵袭实验时，需注意Matrigel的铺胶均匀性和细胞接种量。

8. 免疫共培养：进行免疫细胞共培养时，需注意两种细胞的比例、共培养时间以及培养基的兼容性。

9. 生物安全：KMH-2细胞来源于人高转移性肿瘤组织，属于潜在生物危害材料，具有高致瘤性和转移性。操作时应严格遵守实验室生物安全规范，在生物安全柜内进行，所有接触过细胞的器皿和废弃物必须按照生物危害废物最高标准进行处理，操作者需做好严密的个人防护，防止气溶胶产生和接触。

10. 交叉污染：该细胞系生长迅速，需特别注意避免与其他细胞系发生交叉污染。

11. 用途限制：KMH-2细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。