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MUM2B细胞专用培养基

货号:HY-CSC-288

MUM2B细胞专用培养基(货号HY-CSC-288)是即用型RPMI-1640完全培养基,含10%FBS、双抗及20mM Hepes缓冲体系,专为葡萄膜黑色素瘤培养基优化,支持人眼黑色素瘤细胞贴壁增殖与GNAQ/BAP1突变肝转移机制研究,2-8℃避光保存。

一、产品详情

1. 货号:HY-CSC-288
2. 产品名称: MUM2B细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.2-7.4
5. 产品规格: 500mL
6. 培养基成分: RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 青霉素-链霉素双抗 + 20mM Hepes
7. 细菌检测: 阴性
8. 真菌检测: 阴性
9. 支原体检测: 阴性
10. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
11. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
12. 产品简介: MUM2B细胞专用培养基已包含 MUM2B细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于MUM2B细胞的培养。
13. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
14. 运输条件: 冰袋冷藏运输
15. 有效期: 3个月
16. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

MUM2B细胞是一种人葡萄膜黑色素瘤细胞系。葡萄膜黑色素瘤是成年人中最常见的原发性眼内恶性肿瘤,起源于眼球中富含黑色素细胞的葡萄膜(包括虹膜、睫状体和脉络膜)。与皮肤黑色素瘤相比,葡萄膜黑色素瘤具有独特的遗传背景、生物学行为和临床预后,其最常见的转移部位是肝脏。MUM2B细胞是研究葡萄膜黑色素瘤侵袭、迁移,特别是肝转移机制的核心体外模型之一。其核心应用包括:作为研究葡萄膜黑色素瘤肝转移倾向和生物学行为的代表性模型,用于探究癌细胞与肝脏微环境的特异性相互作用;评估葡萄膜黑色素瘤治疗策略(如局部放疗、肝动脉化疗栓塞、靶向治疗如MEK抑制剂、免疫治疗等)的效果及耐药性研究;研究葡萄膜黑色素瘤特异的信号通路异常和基因突变,如GNAQ/GNA11基因激活突变、BAP1基因失活突变等,及其下游的MAPK、PI3K/AKT、YAP/TAZ等通路;探索上皮-间质转化(EMT)在葡萄膜黑色素瘤侵袭和远处转移过程中的作用;用于基因功能研究,特别是BAP1等抑癌基因功能缺失对细胞增殖、迁移和转移能力的影响;用于研究肿瘤微环境,特别是癌细胞与肝窦内皮细胞、肝星状细胞、肝细胞等的相互作用,模拟肝脏转移前的生态位形成;用于高通量药物筛选,发现针对葡萄膜黑色素瘤,尤其是其肝转移特性的新型治疗化合物;建立高肝转移倾向的异种移植瘤模型,通过脾内或眼内注射等方式,用于体内评估药物的抗转移疗效。MUM2B细胞因其来源于葡萄膜黑色素瘤并具有明确的侵袭转移特性,成为眼科肿瘤和黑色素瘤研究,特别是针对其独特转移生物学研究领域的关键工具。

MUM2B细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为人葡萄膜黑色素瘤细胞的特定生长需求而进行科学优化。MUM2B细胞是一种贴壁生长的肿瘤细胞,形态上可呈梭形、上皮样或多角形。其体外培养需要提供支持其稳定贴壁、增殖并维持其高侵袭性和转移潜能的适宜环境。本产品经过精心配比,以广泛适用于多种淋巴细胞和肿瘤细胞的RPMI-1640培养基为基础,并特别优化添加了以下关键成分:提供充足生长因子和营养物质的优质胎牛血清(FBS,终浓度10%);常规工作浓度的青霉素-链霉素双抗(终浓度1%)以有效预防细菌污染;以及20mM的Hepes缓冲液。该“RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 双抗 + 20mM Hepes”的配方是针对MUM2B等葡萄膜黑色素瘤细胞系培养的优化方案。RPMI-1640培养基营养成分均衡,适用于多种肿瘤细胞。Hepes是一种优良的pH缓冲剂,能在培养箱外操作时(如显微镜观察、换液等)更有效地维持培养基pH的稳定,减少因pH波动对细胞造成的压力,这对于代谢活跃、可能对微环境变化敏感的肿瘤细胞尤为重要。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持MUM2B细胞以典型的黑色素瘤细胞形态良好贴壁生长,增殖活力旺盛,为后续的药物敏感性测试、侵袭迁移实验、肝转移相关机制研究、基因功能分析或体内转移模型构建提供状态可靠且一致的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可重复性,对于需要细胞保持稳定生长和特定恶性表型(尤其是转移倾向)的葡萄膜黑色素瘤研究至关重要。它为葡萄膜黑色素瘤研究领域,特别是针对其侵袭转移机制的研究,提供了一个稳定、高效、即用且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基,其配方经过优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下:
1. 基础培养基: RPMI-1640培养基,占比约89%。
2. 血清: 优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),终浓度为10%。
3. 抗生素: 青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin),终浓度为1%。
4. 缓冲体系: Hepes(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸),终浓度为20mM。
注:以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。该配方旨在为贴壁生长的人葡萄膜黑色素瘤MUM2B细胞提供全面的营养支持、有效的pH缓冲和污染防护。用户可根据具体的实验目的(如无血清刺激、添加特定通路抑制剂或细胞因子),在无菌条件下进行补充。

三、运输和保存方法

1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期:常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。这是推荐的常规保存方式。
                                     冷冻保存: -20℃避光储存,保质期可延长至12个月。但需注意,反复冻融可能影响血清中生长因子的活性、抗生素的稳定性以及Hepes的缓冲效果,建议根据实验用量分装后冻存,并严格避免多次冻融。
3. 使用建议:

收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入2-8℃冰箱避光保存,避免任何温度剧烈波动或长时间置于室温。

储存管理:建议在2-8℃下避光保存,并在有效期内使用。若需长期保存,可进行小体积分装后于-20℃冻存。

使用前准备:使用前,请将所需用量的培养基在37℃水浴中预热至适宜温度(若为冷冻保存,需先完全解冻)。预热时间不宜过长。请轻轻颠倒混匀后再使用。请注意,由于含有血清,冻融后可能会有少量絮状物析出,此为正常现象,轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。

无菌操作:虽然本产品已含有抗生素和Hepes缓冲体系,但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程,以最大程度降低污染风险。

特殊实验需求:对于靶向药物(如MEK抑制剂、AKT抑制剂等)处理实验,通常在此完全培养基中进行。对于研究侵袭迁移和肝转移倾向,常需进行无血清饥饿处理后再进行Transwell或划痕实验,或使用肝细胞条件培养基进行共培养模拟。对于研究EMT,需检测相关标志物的表达变化。

培养条件:MUM2B细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长,需定期在显微镜下观察其形态(梭形、上皮样)和融合度。

细胞传代:当细胞融合度达到80-90%时,即可进行传代。通常使用胰蛋白酶/EDTA消化液进行消化,消化后用本专用培养基(或含血清的培养基)完全中和胰酶,离心收集细胞,用新鲜预热的本专用培养基重悬,并按适当比例(通常1:3至1:5)接种到新的培养容器中。

换液频率:通常每2-3天更换一次新鲜培养基。

药物敏感性测试:通过MTT、CCK-8、克隆形成实验等方法评估靶向药物及化疗药对细胞增殖的抑制作用。

侵袭迁移能力评估:通过Transwell小室(基质胶包被)实验评估细胞的侵袭能力;通过划痕愈合实验评估细胞的迁移能力。

肝转移相关研究:可与肝细胞、肝星状细胞等进行间接或直接共培养,模拟肝脏微环境,研究对肿瘤细胞行为的影响。

分子生物学研究:可用于提取RNA、DNA或蛋白质,进行GNAQ/GNA11、BAP1等基因突变分析,EMT标志物以及MAPK、PI3K/AKT等信号通路的研究。

体内转移模型:可用于准备细胞悬液,通过眼内(模拟原发灶)或脾内/尾静脉注射(模拟血行转移)于免疫缺陷小鼠,建立葡萄膜黑色素瘤肝转移模型。

开封后保存:产品开封后,若需再次储存,务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染,并建议尽快使用完毕。开封后也应严格在2-8℃避光保存。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险。这对于维持MUM2B这一重要葡萄膜黑色素瘤研究模型的纯净性,以及确保涉及长期培养和药物测试的实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.2-7.4,Hepes缓冲体系保障了更好的pH稳定性)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的MUM2B细胞进行生长验证试验。验证结果表明,细胞在本专用培养基中贴壁良好,增殖活力旺盛,细胞形态典型,确保了产品能够有效支持该黑色素瘤细胞的稳定快速生长,并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞提供稳定且可重复生长特性及转移相关表型的各类机制研究和药物筛选实验至关重要。

六、注意事项

1. 储存与时效:请务必在推荐的温度条件(2℃~8℃)下避光保存产品,并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。

2. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。由于含有血清,冻融后可能会有少量絮状物析出,轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常,请勿使用。

3. 污染防控:虽然本产品已含有抗生素,但为保持产品的最佳使用效果,不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时,严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时,务必采取密封措施。

4. 即用型说明:本产品含有血清(10% FBS)、抗生素(青霉素-链霉素双抗,1%)和Hepes缓冲液(20mM),可以直接使用。如无特别需要,不需要额外添加血清、抗生素或缓冲剂。

5. 细胞特性:MUM2B细胞为葡萄膜黑色素瘤细胞,具有明确的肝转移倾向,建议在低代次时冻存足量细胞,并定期进行支原体检测和细胞身份鉴定。了解其GNAQ/GNA11等基因突变背景对于实验设计至关重要。

6. 缓冲液说明:培养基中含有的Hepes能在细胞操作过程中提供额外的pH缓冲能力,但常规培养时仍需置于含5% CO2的培养箱中。

7. 生物安全:MUM2B细胞来源于人葡萄膜黑色素瘤患者,属于潜在生物危害材料,操作时应在生物安全柜内进行,并遵守相应的生物安全规范(通常为BSL-2级)。所有接触过细胞的器皿和废弃物应进行妥善灭菌处理。

8. 交叉污染:需特别注意避免与其他细胞系(尤其是其他黑色素瘤细胞系)发生交叉污染,建议定期进行细胞身份鉴定。

9. 用途限制:MUM2B细胞专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。

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