一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-289
2. 产品名称： NALM-6细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL
6. 培养基成分： RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 青霉素-链霉素双抗
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： NALM-6细胞专用培养基已包含 NALM-6细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于NALM-6细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

NALM-6细胞是一种人前体B细胞急性淋巴细胞白血病细胞系。急性淋巴细胞白血病是一种起源于B细胞或T细胞前体阶段的恶性血液肿瘤，在儿童白血病中最为常见。NALM-6细胞来源于一名患有复发/难治性B-ALL的3岁男孩的外周血，其分子特征包括t(5；12)染色体易位及ETV6-ABL1融合基因（一种罕见的酪氨酸激酶融合基因，与BCR-ABL1功能类似），以及CD19、CD10等B细胞表面标志物的表达。该细胞系是研究B细胞急性淋巴细胞白血病，特别是针对酪氨酸激酶抑制剂敏感性、耐药机制以及免疫疗法（如CAR-T细胞疗法）的核心体外模型之一。其核心应用包括：作为研究B-ALL生物学特性、信号通路异常和药物反应的标准化模型；评估B-ALL一线及二线治疗药物（如酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼、达沙替尼、尼洛替尼，化疗药如长春新碱、阿糖胞苷、地塞米松等）的敏感性及耐药性研究，尤其是针对ETV6-ABL1等罕见融合基因的靶向治疗研究；研究B-ALL发生发展中的关键信号通路异常，如ABL激酶信号、PI3K/AKT/mTOR、JAK/STAT等通路；探索免疫治疗（如靶向CD19、CD22的CAR-T细胞疗法、双特异性抗体贝林妥欧单抗等）的作用机制和疗效评估；用于基因功能研究和信号通路分析，探究与B-ALL发生发展相关的关键基因和染色体异常；用于研究B细胞发育阻滞和恶性转化机制；用于研究肿瘤微环境，特别是白血病细胞与骨髓基质细胞、成骨细胞、破骨细胞、免疫细胞等构成的复杂骨髓微环境的相互作用；用于高通量药物筛选，发现针对B-ALL，特别是复发/难治性B-ALL的新型治疗化合物或联合用药方案；建立异种移植瘤模型，用于体内评估新药疗效和免疫疗法的效果。NALM-6细胞因其明确的B-ALL来源、携带独特的ETV6-ABL1融合基因以及对多种治疗药物（包括靶向药和免疫疗法）的敏感性，成为血液肿瘤研究，特别是儿童B-ALL研究领域不可或缺的重要工具。

NALM-6细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为人前体B细胞白血病细胞的特定生长需求而进行科学优化。NALM-6细胞是一种悬浮生长的淋巴样肿瘤细胞，呈圆形或类圆形，通常以单个细胞或小团簇形式存在。其体外培养需要提供支持其悬浮生长、高代谢活性并维持其前体B细胞白血病表型的特殊环境。本产品经过精心配比，以广泛适用于多种淋巴细胞和肿瘤细胞的RPMI-1640培养基为基础，并添加了能有效支持NALM-6细胞旺盛增殖和维持细胞活力的关键优化成分：即提供充足生长因子、激素和营养物质的优质胎牛血清（FBS，终浓度10%），以满足其高代谢需求；以及常规工作浓度的青霉素-链霉素双抗（终浓度1%）以有效预防细菌污染，这对于维持细胞系的纯净度至关重要。该“RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 双抗”的配方是针对NALM-6等B细胞白血病细胞系培养的经典且经过验证的方案。RPMI-1640培养基营养成分均衡，特别适合淋巴细胞系的培养。10%的血清浓度为细胞的快速增殖提供了必要的支持。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持NALM-6细胞以典型的白血病细胞形态良好悬浮生长（圆形，大小不一），增殖活力旺盛，为后续的药物敏感性测试（尤其是酪氨酸激酶抑制剂和免疫疗法）、信号通路研究、基因功能分析或体内模型构建提供状态可靠、活力充沛且一致的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可重复性，对于需要细胞保持高增殖活力和特定药物反应性的B-ALL研究至关重要。它为B细胞急性淋巴细胞白血病研究领域，特别是针对靶向治疗和免疫治疗的研究，提供了一个稳定、高效、即用且经过充分优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下：
1. 基础培养基： RPMI-1640培养基，占比约89%。
2. 血清： 优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为10%。
3. 抗生素： 青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin），终浓度为1%。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。该配方旨在为悬浮生长的人前体B细胞白血病NALM-6细胞提供全面的营养支持和有效的污染防护。用户可根据具体的实验目的（如药物处理、细胞因子刺激、无血清培养以评估自分泌信号等），在无菌条件下进行补充或调整。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。这是推荐的常规保存方式。
                                     冷冻保存： -20℃避光储存，保质期可延长至12个月。但需注意，反复冻融可能影响血清中生长因子的活性和抗生素的稳定性，建议根据实验用量分装后冻存，并严格避免多次冻融。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入2-8℃冰箱避光保存，避免任何温度剧烈波动或长时间置于室温。

储存管理：建议在2-8℃下避光保存，并在有效期内使用。若需长期保存，可进行小体积分装后于-20℃冻存。

使用前准备：使用前，请将所需用量的培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。预热时间不宜过长。请轻轻颠倒混匀后再使用。请注意，由于含有血清，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。

无菌操作：虽然本产品已含有抗生素，但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程，以最大程度降低污染风险。

特殊实验需求：对于酪氨酸激酶抑制剂（如伊马替尼、达沙替尼）及化疗药物处理实验，通常在此完全培养基中进行。对于研究CAR-T细胞杀伤或双特异性抗体作用，常将效应细胞与NALM-6靶细胞在此培养基中共培养。对于研究耐药性，可在此培养基中长期低剂量药物暴露诱导。

培养条件：NALM-6细胞使用本产品时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞以悬浮方式生长，需定期在显微镜下观察其形态（圆形）、活力和聚集情况。

细胞传代与计数：当细胞密度较高（通常超过1x10^6 cells/mL）、培养基颜色变黄或细胞活性下降时，即可进行传代。由于细胞为悬浮生长，通常采用直接离心法或稀释法。常用方法是离心收集细胞，用新鲜预热的本专用培养基重悬，并通过轻柔吹打分散可能的小团块，然后按适当密度（通常1:3至1:5稀释）接种到新的培养容器中。细胞生长迅速，需密切监测密度。

换液频率：根据细胞生长速度快的特点，通常每2-3天更换一次新鲜培养基或进行半量换液。

药物敏感性测试：通过MTT、CCK-8、ATP检测或流式细胞术（Annexin V/PI）等方法评估酪氨酸激酶抑制剂、化疗药及免疫疗法对细胞增殖和凋亡的影响，是B-ALL研究的核心内容。

免疫疗法评估：用于与CD19或CD22 CAR-T细胞共培养，通过流式细胞术或LDH释放等检测评估CAR-T细胞的杀伤活性。

信号通路研究：可通过Western Blot、qPCR等方法检测药物处理前后ABL激酶、PI3K/AKT/mTOR、STAT5等关键通路蛋白的磷酸化水平变化。

体内成瘤实验：可用于准备细胞悬液，通过尾静脉注射于免疫缺陷小鼠（如NOD/SCID或NSG小鼠），建立B-ALL的播散性白血病模型，用于体内药效评估。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。开封后也应严格在2-8℃避光保存。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持NALM-6这一重要B-ALL研究模型的纯净性，以及确保涉及长期培养、药物测试和免疫疗法评估的实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均使用标准的NALM-6细胞进行生长验证试验。验证结果表明，细胞在本专用培养基中生长状态极佳，增殖活力旺盛，细胞形态典型（悬浮，圆形），确保了产品能够有效支持该白血病细胞的稳定快速生长，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞提供稳定且可重复生长特性及药物反应性的各类机制研究和药物筛选实验至关重要。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。

2. 外观检查：使用前请观察培养基是否澄清。由于含有血清，冻融后可能会有少量絮状物析出，轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。

3. 污染防控：虽然本产品已含有抗生素，但为保持产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时，严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时，务必采取密封措施。

4. 即用型说明：本产品含有血清（10% FBS）和抗生素（青霉素-链霉素双抗，1%），可以直接使用。如无特别需要，不需要额外添加血清或抗生素。

5. 细胞特性：NALM-6细胞为B细胞急性淋巴细胞白血病细胞，携带ETV6-ABL1融合基因，生长迅速，建议在低代次时冻存足量细胞，并定期进行支原体检测、细胞身份鉴定和融合基因状态验证。了解其分子遗传学背景对于靶向治疗实验设计至关重要。

6. 细胞团块处理：细胞可能形成小团簇，传代或药物处理前，需轻柔吹打以适当分散，确保细胞计数准确和药物作用均匀，但避免剧烈吹打导致细胞损伤。

7. 生物安全：NALM-6细胞来源于人B-ALL患者，属于潜在生物危害材料，操作时应在生物安全柜内进行，并遵守相应的生物安全规范（通常为BSL-2级）。所有接触过细胞的器皿和废弃物应进行妥善灭菌处理。

8. 交叉污染：需特别注意避免与其他悬浮生长的细胞系（尤其是其他血液肿瘤细胞系）发生交叉污染，建议定期进行细胞身份鉴定。

9. 用途限制：NALM-6细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。