一、产品介绍

1. 产品编号： HY-CSC-179

2. 产品名称： HCT-116细胞专用培养基

3. 规格： 500mL

HCT-116细胞系（ATCC CCL-247）是一种人结直肠腺癌细胞系，最初于1979年由M.G. Brattain等人从一位成年男性结直肠癌患者（Duke's C型）的结肠组织中分离建系。该细胞具有典型的上皮样形态，呈贴壁生长方式，倍增时间约22小时。HCT-116细胞的遗传背景特征鲜明：具有近二倍体核型（染色体数目约45条），携带多个与结直肠癌发生发展密切相关的关键基因突变，包括KRAS原癌基因第13密码子突变（p.Gly13Asp）、PIK3CA激活突变、TGFBR2突变以及β-catenin（CTNNB1）突变，同时存在微卫星不稳定性（MSI）。这些遗传特征使其成为结直肠癌分子机制研究的理想模型。该细胞可表达癌胚抗原（CEA）和角蛋白（Keratin），并在裸鼠体内表现出良好的致瘤性。

HCT-116细胞在肿瘤学研究中具有广泛的应用价值。首先，在结直肠癌基础研究领域，它是探索肿瘤发生、增殖、侵袭和转移机制的经典模型；其次，该细胞携带Wnt/β-catenin信号通路关键组分突变（APC/β-catenin突变途径），是研究该信号通路在肿瘤中异常激活机制的理想工具；第三，在抗肿瘤药物筛选方面，HCT-116细胞被广泛用于5-氟尿嘧啶（5-FU）、奥沙利铂（Oxaliplatin）、伊立替康（Irinotecan）等临床一线化疗药物的敏感性测试及耐药机制研究；第四，在肿瘤增殖与凋亡研究中，该细胞常用于评估候选化合物的抗肿瘤活性；第五，凭借其稳定的遗传背景和高效的基因编辑兼容性，HCT-116细胞已成为CRISPR/Cas9基因敲除、基因敲入等基因组编辑研究的首选细胞模型之一，衍生出大量标记细胞系和基因修饰细胞系。

本培养基由Cell Factory基于HCT-116细胞的独特营养需求和生长特性进行专业配方优化，以McCoy's 5A为基础培养基，添加10%优质胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素双抗（P/S），各组分比例精准、混合均匀，经过严格的无菌过滤和质量控制，开瓶即可使用。本培养基能够有效支持HCT-116细胞的贴壁生长，维持其典型的上皮样形态和旺盛的增殖能力，批次间稳定性高，实验重复性好。

声明：本产品仅供科研使用，不可用于临床诊断或治疗。

二、产品主要成分

1. 基础培养基：McCoy's 5A培养基

2. McCoy's 5A培养基是专门为培养人正常细胞和肿瘤细胞而设计的经典培养基配方，富含多种氨基酸、维生素、无机盐及葡萄糖等营养物质，其营养成分较MEM更为丰富，特别适合消化道来源的细胞培养。本培养基中已添加L-谷氨酰胺，可满足HCT-116细胞的代谢需求。

3. 血清：优质胎牛血清（FBS），终浓度10%

4. 选用经过三级过滤的优质胎牛血清，内毒素含量低，蛋白含量高，富含细胞生长所需的生长因子、附着因子、激素和营养物质，可有效促进HCT-116细胞的贴壁、增殖和维持正常形态。

5. 抗生素：青霉素-链霉素双抗溶液（P/S），终浓度1%

6. 青霉素（100 U/mL）可有效抑制革兰氏阳性菌的生长，链霉素（100 μg/mL）可抑制革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的生长，两者联合使用可降低培养过程中的细菌污染风险。

注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用，无需额外添加任何成分。

三、运输和保存方法

1. 运输条件：采用专业冷链运输方式，使用保温箱加冰袋进行低温运输，确保运输全程温度维持在2-8℃范围内，保障培养基的活性和无菌状态。

2. 保存条件与保质期：

（1）2-8℃避光保存，保质期3个月

（2）-20℃避光保存，保质期12个月

3. 使用建议：

（1）收货处理： 收到货物后请立即检查包装是否完好，确认无破损、无泄漏后，尽快将培养基置于推荐的保存温度中。如发现包装异常，请及时联系售后。

（2）储存管理： 避免反复冻融，以免影响培养基中血清成分的活性和营养物质的稳定性。-20℃保存建议根据实验需求预先分装成小份，每次取用一份，避免整瓶反复冻融。

（3）使用前准备： 使用前将培养基从冰箱取出，置于37℃水浴中预热至适宜温度（约15-20分钟），期间轻轻摇动使内容物均匀混合。注意水浴时液面不要超过瓶盖，防止水渗入造成污染。

（4）无菌操作： 所有操作须在生物安全柜或超净工作台内完成，严格遵守无菌操作规程。使用前可用75%酒精喷洒擦拭培养基瓶身表面。

（5）开封后保存： 开封后应尽快使用完毕。如无法一次用完，请于瓶口封好封口膜，2-8℃保存并在一周内使用完毕，避免长时间存放导致营养成分降解或污染。

四、质量控制

1. 污染物检测

每批次培养基均经过严格的微生物检测程序，包括细菌培养检测（需氧菌和厌氧菌）、真菌培养检测以及支原体PCR检测，确保所有检测结果均为阴性，杜绝微生物污染对细胞实验的干扰。

2. 理化指标检测

每批次产品均经过全面的理化指标检测，确保以下参数符合标准：

（1）外观澄清度：黄色透明液体，无沉淀、无悬浮物

（2）pH值：7.2-7.4，适宜细胞生长

（3）渗透压：280-320 mOsm/kg，维持细胞正常渗透平衡

（4）内毒素含量：＜5 EU/mL，低内毒素保障细胞健康

3. 细胞功能验证

每批次培养基均使用标准HCT-116细胞株进行细胞生长试验验证，在标准培养条件下（37℃、5% CO₂饱和湿度）连续培养72小时，观察并评估以下指标：

（1）贴壁性能：接种后4小时内细胞贴壁率≥95%

（2）增殖活性：培养72小时细胞密度明显增加，倍增正常

（3）形态特征：维持典型的上皮样多边形形态，细胞边界清晰，胞质均匀

（4）生长曲线：符合HCT-116细胞的正常增殖规律

五、注意事项

1. 检查包装完好性： 收到产品后请首先检查外包装是否完好，培养基瓶身有无破损、渗漏，如发现任何异常请勿使用并及时联系Cell Factory。

2. 不要长时间储存在室温： 本产品含血清和生长因子，长时间放置于室温（尤其是夏季高温环境）会导致营养成分降解和变质，影响培养效果。收货后请立即冷藏或冷冻保存。

3. 即用型产品，无需额外添加： 本培养基已含有血清（10% FBS）和抗生素（1% P/S），为即用型完全培养基，无需额外添加任何成分即可直接使用。

4. 仅供科研使用： 本产品仅供科学研究使用，不得用于临床诊断、治疗或任何人体实验。操作人员应具备相应的细胞培养实验技能。

5. 接触后立即清水冲洗： 本产品含有生物活性成分，如不慎接触皮肤或眼睛，请立即用大量清水冲洗，必要时寻求医疗帮助。操作时请佩戴实验手套和防护眼镜。