一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-182
2. 产品名称： T98G-FLUC-puro细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL
6. 培养基成分： MEM + 10% FBS + 1% Penicillin-Streptomycin + 0.5 μg/mL Puromycin
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常，荧光素酶报告基因表达稳定
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： T98G-FLUC-puro细胞专用培养基已包含T98G-FLUC-puro细胞生长及筛选所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于T98G-FLUC-puro细胞的培养与维持。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

T98G-FLUC-puro细胞是神经肿瘤学、药物筛选和活体成像研究领域中一个经过基因工程改造的、功能强大的报告基因细胞模型。该细胞系以经典的人胶质母细胞瘤细胞T98G为背景，通过稳定转染整合了萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase, FLUC）报告基因和嘌呤霉素（Puromycin）抗性基因。T98G细胞本身来源于一名75岁男性患者的恶性胶质母细胞瘤，具有肿瘤干细胞特性、放射抵抗和高度侵袭性。通过引入FLUC基因，该改造细胞能够在体内外通过生物发光成像（BLI）技术进行实时、无创的定量监测。因此，T98G-FLUC-puro细胞是将基础肿瘤研究与先进分子成像技术相结合的“多功能工具细胞”。其核心应用包括：在体外高通量药物筛选中，通过检测荧光素酶活性快速评估化合物对肿瘤细胞增殖或凋亡的影响；建立小鼠异种移植瘤模型（CDX），通过活体成像技术无创、动态、定量地监测肿瘤的生长、转移以及对放化疗、靶向治疗或免疫治疗的反应；研究肿瘤微环境对肿瘤进展的影响；以及评估新型药物递送系统（如纳米颗粒）的靶向性和疗效。此外，培养基中加入的嘌呤霉素（Puromycin）能够持续施加选择压力，有效防止未成功整合报告基因的细胞生长，确保培养细胞群体中FLUC表达的纯度和稳定性。这为获得可靠、可重复的体内外成像数据提供了保障，极大地推动了抗胶质瘤药物的临床前研发进程。

T98G-FLUC-puro细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该报告基因细胞模型的特殊培养与筛选需求而进行科学优化。T98G-FLUC-puro细胞作为携带外源基因的胶质母细胞瘤模型，其体外培养不仅需要支持其作为肿瘤细胞的快速增殖，还必须维持筛选压力以确保持续、稳定的报告基因表达。本产品经过精心配比，采用Minimum Essential Medium (MEM)作为基础培养基，为细胞提供必需的营养。我们特别添加了三大关键成分：提供广泛生长因子和支持的优质胎牛血清（FBS，终浓度10%），用于预防细菌污染的青霉素-链霉素双抗溶液（终浓度1%），以及核心的筛选组分——嘌呤霉素（Puromycin，终浓度0.5 μg/mL）。该“MEM + 10% FBS + 1% 双抗 + 0.5 μg/mL Puromycin”的配方是维持此类报告基因细胞系的通用标准方案。其中，0.5 μg/mL的Puromycin浓度经过优化，足以有效杀死不携带抗性基因的细胞，同时又不会对稳定转染的T98G-FLUC-puro细胞造成过度的生长抑制，从而在维持筛选压力的同时保证细胞良好的增殖状态。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持T98G-FLUC-puro细胞以典型的贴壁形态良好生长，同时确保细胞群体中萤火虫荧光素酶报告基因的高水平、稳定表达，为后续的体外检测或体内成像实验提供信号强且背景低的可靠细胞来源。这保证了基于该细胞的药物评价和肿瘤生物学研究结果的准确性、灵敏度和可重复性。它为活体成像研究和抗肿瘤药物开发提供了一个稳定、高效且标准化的专用培养与筛选解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养与筛选维持，无需用户自行配制。其主要成分如下：
1. 基础培养基： Minimum Essential Medium (MEM)。
2. 血清： 优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为10%。
3. 抗生素： 青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin），终浓度为1%。
4. 筛选抗生素： 嘌呤霉素（Puromycin），终浓度为0.5 μg/mL。
注：以上所有组分，特别是嘌呤霉素，均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。该配方旨在为T98G-FLUC-puro细胞提供全面的营养支持、抗菌保护以及维持报告基因稳定性的持续筛选压力。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中，特别是其中嘌呤霉素的稳定性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。由于含有筛选抗生素，建议在此条件下保存并在有效期内使用，以确保筛选压力的有效性。
                                     冷冻保存： 可于-20℃避光保存以延长保质期，但需注意反复冻融可能影响抗生素活性。建议根据实验用量分装冻存。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入2-8℃冰箱避光保存。

储存管理：未开封的产品可存放于2-8℃。开封后，若需保存，务必拧紧瓶盖，短期内可继续存放于2-8℃，并建议在2-4周内使用完毕，以减少污染风险并保持筛选抗生素的最佳效力。

使用前准备：使用前，请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（避免剧烈摇晃）。请注意，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，不影响产品正常使用。

无菌操作：所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程。

培养条件：T98G-FLUC-puro细胞使用本产品时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长。

筛选压力维持：本产品已包含0.5 μg/mL Puromycin，可维持对T98G-FLUC-puro细胞的筛选压力。请务必使用本专用培养基进行常规培养和传代，以持续清除可能出现的低表达或无表达细胞，确保报告基因表达的均一性和稳定性。 若更换为不含Puromycin的普通培养基，可能导致抗性基因丢失或报告基因表达沉默。

细胞传代：当细胞融合度达到80-90%时，即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后，用本专用培养基（含Puromycin）完全中和胰酶，离心收集细胞，用新鲜预热的本专用培养基重悬，并按适当比例（通常为1:3至1:5）接种到新的培养容器中。

换液频率：根据细胞生长速度，通常每2-3天更换一次新鲜的本专用培养基。

成像/检测前处理：若计划进行荧光素酶活性检测（如使用荧光素底物），在检测前建议用PBS清洗细胞并更换为无酚红的检测培养基（根据检测试剂盒要求），但常规维持培养必须使用本含Puromycin的专用培养基。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必采取严格密封措施（如封口膜）以避免污染。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 关键组分效价检测：对配方中的关键组分——嘌呤霉素（Puromycin）的效价进行准确标定与生物活性验证，确保其筛选浓度（0.5 μg/mL）能有效维持对T98G-FLUC-puro细胞的选择压力。
4. 细胞功能验证：每批次产品均使用标准的T98G-FLUC-puro细胞进行生长与功能验证试验。验证结果表明，细胞在本专用培养基中贴壁良好，增殖活力正常，细胞形态典型，并且通过荧光素酶活性检测确认报告基因表达稳定、信号强度符合要求。这确保了产品在支持细胞生长的同时，能有效维持报告基因系统的稳定性，保证了卓越的批次间一致性。这对于依赖稳定生物发光信号进行定量研究的实验至关重要。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。特别注意，抗生素活性可能随时间下降，影响筛选效果。

2. 外观检查：使用前请观察培养基。培养基冻融后，可能会有少量絮状物析出，不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。

3. 筛选压力维持（关键）：严禁在常规培养和传代过程中使用不含Puromycin的普通培养基。 必须始终使用本专用培养基，以维持稳定的筛选压力，防止报告基因丢失或表达不均，确保实验数据的可靠性。

4. 污染防控：为保持产品中抗生素的最佳效力及防止污染，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。谨慎操作，避免污染。开封后应尽快使用。

5. 即用型说明：本产品含有血清（10% FBS）、常规抗生素（1% 双抗）和筛选抗生素（0.5 μg/mL Puromycin），是即用型完全筛选培养基。如无特别说明，无需额外添加任何成分。

6. 细胞特性：T98G-FLUC-puro细胞为胶质母细胞瘤来源，生长较快。需定期观察和传代，防止过度融合。保持细胞处于良好状态对维持高水平的荧光素酶表达很重要。

7. 生物安全：该细胞来源于人恶性肿瘤组织，并经过基因改造。操作时请遵守严格的实验室生物安全规范（建议在二级生物安全柜内操作），做好充分的个人防护。所有接触过细胞的耗材、培养液及废液应按照生物危害及基因工程废弃物标准进行无害化处理。

8. 用途限制：T98G-FLUC-puro细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。

9. 报告基因验证：建议用户在新收到细胞或长期培养后，定期通过荧光素酶活性检测验证报告基因的表达水平，以确保其适用于高灵敏度成像或检测实验。