一、基本信息

1. 产品编号：HY-I130

2. 产品名称：人牙龈成纤维细胞

3. 英文名称：Human Gingival Fibroblasts

4. 细胞简称：HGiF

5. 种属来源：人

6. 组织来源：牙龈组织

7. 细胞类型：原代细胞

8. 生长特性：贴壁生长

9. 细胞形态：成纤维细胞样（梭形或星形）

10. 传代次数：2-3代（不同代次细胞形态可能有差异）

11. 生物安全等级：1级

12. 产品规格：5×10⁵ cells/份

13. 鉴定方法：经波形蛋白免疫荧光鉴定，细胞纯度大于90%

14. 包被条件：不包被

15. 消化液：0.25% 胰蛋白酶-EDTA

16. 培养条件：温度：37℃；气相：5% 二氧化碳；湿度：饱和湿度

17. 冻存条件：液氮储存

18. 运输方式：冻存发货（需加干冰运输费用）

19. 供应限制：仅限于科学研究、科研或工业等非医疗目的，不得用于人类或动物临床试验、诊断或治疗等医疗目的

二、细胞特征

1. 形态特征：具有典型的成纤维细胞样形态，细胞呈梭形或星形，贴壁生长，细胞核清晰可见。

2. 组织学定位：是牙龈固有层结缔组织中的主要细胞成分，与胶原纤维等细胞外基质紧密相关，共同构成牙龈的支撑结构。

3. 功能特性：

结构维持与修复：核心功能是合成和分泌胶原蛋白（主要是I型和III型胶原）、弹性蛋白、纤连蛋白等细胞外基质成分，为牙龈提供机械强度、弹性和完整性，并参与组织损伤后的修复与再生。

免疫调节与炎症反应：在牙周健康与疾病中扮演关键角色。能够感知并响应口腔菌群及其产物，通过分泌细胞因子（如IL-1β、IL-6、TNF-α）、趋化因子和基质金属蛋白酶，积极参与并调节牙周组织的炎症反应和免疫应答。

细胞间相互作用：与牙龈上皮细胞、免疫细胞、内皮细胞及口腔微生物相互作用，共同维持牙龈微环境的稳态。

临床应用与研究价值：是研究牙周病（牙龈炎、牙周炎）发病机制、口腔软组织创伤愈合、种植体周围组织整合、口腔生物材料相容性评价以及开发新型牙周治疗策略的核心体外模型。

三、培养条件

1. 专用培养基：成纤维细胞体系

2. 培养环境：温度：37℃；气相：5% 二氧化碳；湿度：饱和湿度

3. 生长表面：普通组织培养塑料表面，无需特殊包被。

四、产品应用

1. 牙周病机制研究：用于模拟牙周致病菌（如牙龈卟啉单胞菌）感染，研究细菌及其毒力因子（如脂多糖）如何激活HGiF，诱导其产生炎症介质、基质降解酶（MMPs），从而探究牙周炎发生发展的细胞与分子机制。

2. 口腔软组织再生与修复研究：作为组织工程和再生医学的种子细胞，研究其在引导组织再生膜、生物支架材料上的生长、分化及基质合成能力，用于开发牙周缺损修复的新方法。

3. 口腔生物材料与药物评价：评价牙科种植体表面涂层、牙周塞治剂、漱口水、局部用药等对HGiF细胞的细胞毒性、生物相容性、增殖及功能的影响。

4. 细胞-微生物相互作用研究：共培养模型，用于研究HGiF与口腔益生菌或致病菌的相互作用，探索维持口腔微生态平衡的新途径。

5. 衰老与功能研究：研究年龄增长或疾病状态下HGiF的功能变化（如增殖能力下降、炎症反应改变），探索口腔组织衰老的机制。

五、产品优势

1. 组织特异性强：直接来源于人牙龈组织，能更真实地反映牙龈细胞的生理和病理状态，是口腔医学研究特异性高的模型。

2. 高品质原代制备：采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁法制备，有效分离并获得高纯度、高活力的原代细胞。

3. 严格质量保证：每批细胞均经过波形蛋白免疫荧光鉴定，确保细胞纯度大于90%，来源可靠，实验结果可信度高。

4. 配套体系完善：推荐使用配套的成纤维细胞专用培养基，为细胞提供最适生长环境，保证细胞功能稳定，实验重复性好。

六、培养方法

1. 收货与复苏处理（冻存发货）：

收货检查：收到细胞后，立即检查干冰状况及冻存管是否融化。若有异常及时联系客服。

快速复苏：为保证细胞高存活率，收到产品后应立即复苏。

复苏步骤：
a. 将冻存管置于37℃水浴中，快速摇晃至完全解冻。
b. 将细胞悬液转移至含适量预热专用培养基的离心管中，轻轻混匀。
c. 1000 rpm离心5分钟，小心弃去上清。
d. 加入1-2 mL新鲜专用培养基，轻柔重悬细胞。
e. 将细胞悬液接种至含适量专用培养基的培养器皿中。
f. 置于37℃、5% CO₂培养箱中静置培养。

换液：复苏后24-48小时进行首次全量换液，之后根据培养基颜色每2-3天换液一次。

2. 传代操作：

时机判断：当细胞融合度达到80%-90% 时进行传代。原代细胞不建议过度生长至完全融合。

洗涤：弃去旧培养基，用无菌PBS轻轻润洗细胞1-2次。

消化：加入适量0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液，覆盖细胞层，室温或37℃孵育1-3分钟。

观察与终止：显微镜下观察，待大部分细胞变圆、脱离时，立即加入等量或双倍含血清的专用培养基终止消化。

收集细胞：轻柔吹打培养面，收集细胞悬液至离心管。

离心：1000 rpm离心5分钟，弃上清。

重悬与接种：用新鲜专用培养基重悬细胞，按1:2 或 1:3的比例接种到新培养器皿中。

培养：补充足量培养基，放回培养箱。

3. 冻存操作：

选择细胞：选择对数生长期、状态良好的细胞。

消化收集：按传代方法消化并收集细胞，计数。

配制冻存液：使用商品化无血清冻存液或自配冻存液（如90% FBS + 10% DMSO）。将细胞重悬于冻存液中，密度为1×10⁶ ~ 5×10⁶ cells/mL。

分装：分装至冻存管，每管1.0-1.5 mL。

程序冻存：使用程序降温盒或按梯度降温（4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜），最后转移至液氮保存。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。