一、基本信息

1. 产品编号：HY-J145

2. 产品名称：大鼠原代主动脉平滑肌细胞

3. 英文名称：Rat Aortic Smooth Muscle Cells (RASMCs)

4. 种属来源：大鼠

5. 组织来源：主动脉组织

6. 细胞类型：原代细胞

7. 生长特性：贴壁生长

8. 细胞形态：成纤维细胞样，典型形态为长梭形，也可见不规则形、三角形或扇形

9. 传代能力：可传代，3代以内状态最佳，可传5代左右

10. 生物安全等级：1级

11. 产品规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1 mL冻存管

12. 质量检测：平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫荧光染色为阳性，纯度高于90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

13. 专用培养基：大鼠主动脉平滑肌细胞完全培养基

14. 培养条件：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；湿度：饱和湿度

15. 换液频率：每2-3天换液一次

16. 消化液：0.25%胰蛋白酶

17. 运输方式：T25培养瓶/顺丰快递（包邮）

18. 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

二、细胞特征

1. 形态特征：典型的平滑肌细胞形态。原代培养初期形态不一，贴壁伸展后多呈长梭形，胞浆丰富，常有分枝状突起。细胞可平行排列成单层，或呈旋涡状、栅栏状、网状生长，具有典型的“峰-谷”样生长特征。

2. 来源与特性：采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备，直接分离自大鼠主动脉中膜，保留了血管平滑肌细胞的收缩表型和关键功能。

3. 分子与功能特性：

收缩表型标志：高表达平滑肌特异性标志物，如α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、平滑肌肌球蛋白重链（SM-MHC）、钙调节蛋白等，是验证其功能特性的可靠依据。

表型可塑性：在体外培养条件下，平滑肌细胞具有从收缩型向合成/增殖型转化的能力。此特性使其成为研究血管损伤后修复、再狭窄及动脉粥样硬化中平滑肌细胞表型转换机制的理想模型。

功能响应性：对多种血管活性物质（如血管紧张素II、内皮素-1、血小板衍生生长因子PDGF）及机械刺激（如牵张）具有响应能力，可用于研究血管张力调节、细胞迁移、增殖及细胞外基质合成。

四、培养条件

1. 专用培养基：大鼠主动脉平滑肌细胞完全培养基

2. 培养环境：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；湿度：饱和湿度

3. 换液频率：每2-3天更换一次新鲜完全培养基。

五、产品应用

1. 血管生理与药理学研究：用于研究血管活性药物（如钙通道阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂、硝酸酯类药物）对血管平滑肌细胞收缩、舒张、增殖及迁移功能的影响。

2. 动脉粥样硬化与血管再狭窄研究：模拟病理状态，研究氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）、炎症因子（如TNF-α, IL-1β）等如何诱导平滑肌细胞表型转换、迁移至内膜并增殖，从而探究斑块形成与血管狭窄的机制。

3. 高血压与血管重塑研究：用于研究高血压相关因子（如血管紧张素II、醛固酮）诱导的血管平滑肌细胞肥大、增生及胶原沉积，阐明血管壁增厚和重塑的细胞学基础。

4. 血管损伤与修复：建立机械损伤或化学损伤模型，研究损伤后平滑肌细胞的增殖、迁移及内膜增生过程，并评估干预措施（如药物涂层支架、基因治疗）的效果。

5. 细胞外基质研究：研究平滑肌细胞合成与分泌胶原、弹性蛋白等细胞外基质成分的调控机制，及其在血管弹性、硬化中的作用。

六、产品优势

1. 高纯度与特异性：采用先进的酶联合消化与差速贴壁法制备，并经α-SMA免疫荧光染色严格鉴定，纯度高于90%，确保细胞群体的同质性与实验结果的可靠性。

2. 生理相关性高：作为原代细胞，直接来源于主动脉组织，最大程度保留了体内平滑肌细胞的收缩表型、分子标志及功能响应性，是研究血管生物学与病理学的“金标准”体外模型。

3. 模型稳定性好：细胞在体外培养生长稳定，传代后4-6天即可汇合，并保持典型的形态学和生长特征，为连续实验提供便利。

4. 配套体系专业：提供专为维持大鼠主动脉平滑肌细胞功能而优化的完全培养基，确保细胞在体外培养过程中保持良好状态与功能。

七、培养方法

1. 收货处理（T25瓶发货）：

收货检查：收到细胞后，观察细胞瓶是否完好，培养基有无漏液、浑浊。

稳定细胞：用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，将T25瓶放入37℃、5% CO₂、饱和湿度的培养箱中静置3-4小时，以稳定细胞状态。

首次观察：静置后，在显微镜下观察细胞形态、贴壁情况及密度，并拍照记录。细胞应呈现典型的梭形或不规则形。

2. 传代操作：

时机判断：当细胞密度达到80%-90% 融合时进行传代。

洗涤：吸出旧培养基，用无菌PBS轻轻清洗细胞一次。

消化：
a. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25瓶中，轻微转动使消化液覆盖整个瓶底。
b. 立即吸出大部分消化液，仅留薄层覆盖细胞（此为关键步骤，防止过度消化）。
c. 将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3分钟。

观察与终止：在倒置显微镜下观察，待细胞变圆、间隙增大时，立即加入5mL新鲜专用完全培养基终止消化。

吹打与收集：用吸管轻轻吹打瓶底，使细胞完全脱落，形成单细胞悬液。

分瓶接种：按1:2的传代比例，将细胞悬液分到新的T25培养瓶中（即1瓶传2瓶）。首次传代强烈建议按此比例。

补充培养基：向每个新瓶中加入新鲜的专用完全培养基，使总体积约为5mL。

培养：将培养瓶放回培养箱，待细胞完全贴壁后，定期观察。之后每2-3天换液一次。

3. 冻存操作（建议使用配套无血清冻存液）：

选择细胞：选择处于对数生长期（传代后2-3天）、状态良好的低代次细胞（建议P3以内）进行冻存。

消化收集：按上述传代方法消化并收集细胞，离心后弃上清。

配制冻存悬液：使用无血清细胞冻存液重悬细胞，调整细胞密度至1×10⁶ ~ 5×10⁶ cells/mL。

分装：将细胞悬液分装至冻存管，每管1.0-1.5 mL，做好标记（种属、细胞名称、代次、日期）。

程序冻存：采用程序降温法冻存（如使用程序降温盒：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜），最后转移至液氮中长期保存。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。