1. 产品编号:HY-J247
2. 产品名称:大鼠原代神经胶质细胞
3. 英文名称:Rat Brain Glial Cells
4. 种属来源:大鼠
5. 组织来源:脑组织
6. 细胞类型:原代细胞
7. 生长特性:贴壁生长
8. 细胞形态:主要为星形胶质细胞样,呈梭形或多边形,具有多个分支状突起(星形),此外可包含少量少突胶质前体细胞、小胶质细胞等。
9. 传代能力:可传代2-4代
10. 生物安全等级:1级
11. 产品规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1 mL冻存管
12. 质量检测:神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 免疫荧光染色为阳性,纯度高于90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
13. 专用培养基:大鼠神经胶质细胞专用培养基
14. 培养条件:温度:37℃;气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;湿度:饱和湿度
15. 换液频率:每2-3天换液一次
16. 消化液:0.25%胰蛋白酶
17. 运输方式:T25培养瓶/顺丰快递
18. 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
1. 形态特征:主要为星形胶质细胞形态。细胞呈梭形或多角形,具有多个细长、分支状的突起,这些突起相互交织成网状,填充于神经元之间。贴壁后细胞体扁平,突起伸展明显,形成典型的“星形”外观。
2. 来源与特性:来源于大鼠脑组织,通过酶消化法分离获得。产品细胞群以GFAP阳性的星形胶质细胞为主体,这是中枢神经系统中最主要的胶质细胞类型。在培养过程中,星形胶质细胞可能表现出一定的异质性。
3. 分子与功能特性:
星形胶质细胞标志:高表达胶质纤维酸性蛋白(GFAP),这是星形胶质细胞最特异、最常用的标志蛋白,构成其细胞骨架,是鉴定其身份的核心依据。此外,还表达S100β、谷氨酰胺合成酶(GS) 等。
神经元支持与营养功能:作为神经元的“保姆细胞”,通过其突起末端形成的“终足”包绕神经元胞体和突触,为神经元提供物理支撑。能摄取和代谢神经元释放的神经递质(如谷氨酸),维持突触微环境的稳态,并分泌多种神经营养因子。
血脑屏障(BBB)的重要组成部分:星形胶质细胞的终足与脑微血管内皮细胞紧密连接,构成血脑屏障的外层,参与BBB的形成、维持和功能调节。
离子与代谢稳态调节:负责调节细胞外间隙的K⁺、H⁺浓度,参与脑内能量代谢(如乳酸穿梭),对维持神经元正常兴奋性至关重要。
免疫调节与炎症反应:在脑损伤或疾病状态下,星形胶质细胞可被激活(反应性星形胶质细胞),表现为GFAP表达上调、细胞肥大增生,并分泌多种细胞因子和趋化因子,参与神经炎症过程,具有双重作用(神经保护与神经毒性)。
1. 专用培养基:大鼠神经胶质细胞专用培养基
2. 培养环境:温度:37℃;气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;湿度:饱和湿度
3. 换液频率:每2-3天更换一次新鲜完全培养基,以维持细胞活性及支持功能。
1. 神经炎症与胶质细胞激活研究:研究在神经退行性疾病(如阿尔茨海默病、帕金森病)、脑卒中、创伤性脑损伤等模型中,神经胶质细胞(特别是星形胶质细胞)的激活机制、表型转换及其在疾病进展中的双重角色。
2. 血脑屏障(BBB)体外共培养模型:与脑微血管内皮细胞、周细胞共培养,构建更接近生理状态的体外BBB模型,用于研究星形胶质细胞在BBB发育、功能维持及病理破坏中的作用。
3. 神经元-胶质细胞相互作用研究:与神经元进行共培养,用于研究星形胶质细胞对神经元存活、突触形成、突触可塑性及神经回路功能的影响,探讨其在学习记忆等高级脑功能中的作用。
4. 中枢神经系统药物筛选与毒性评估:作为体外模型,评估药物或化合物对神经胶质细胞的直接影响(如激活、毒性),以及通过胶质细胞介导的对神经元的间接影响。
5. 脑肿瘤微环境研究:研究在胶质瘤等脑肿瘤中,肿瘤细胞与周围反应性星形胶质细胞的相互作用,如何促进肿瘤的侵袭、生长及免疫逃逸。
1. 以高纯度星形胶质细胞为主:经GFAP免疫荧光染色严格鉴定,GFAP阳性细胞纯度高于90%,确保了产品的主体细胞为功能明确的星形胶质细胞,为相关研究提供了可靠的细胞基础。
2. 中枢神经系统研究的核心支持细胞:星形胶质细胞是中枢神经系统中数量最多、功能最复杂的胶质细胞,该产品是研究脑稳态、神经保护、神经炎症及脑疾病的关键体外模型。
3. 适用于多种共培养体系:该细胞易于与神经元、内皮细胞等多种中枢神经系统细胞进行共培养,是构建复杂体外模型(如BBB模型、神经血管单元模型)不可或缺的组成部分。
4. 配套培养基优化生长:提供专用的神经胶质细胞培养基,旨在支持星形胶质细胞的贴壁、增殖及基本功能的维持。
1. 收货处理(T25瓶发货):
收货检查:收到细胞后,立即检查T25细胞瓶是否完好,瓶内培养基有无漏液、浑浊。
稳定细胞:用75%酒精棉球彻底擦拭细胞瓶外壁消毒。在超净工作台内小心拆开封口膜,将细胞瓶平稳放入37℃、5% CO₂、饱和湿度的培养箱中静置3-4小时,使细胞充分贴壁。
首次镜检与记录:静置后,在倒置显微镜下观察细胞形态(可见星形或多角形细胞及突起)、贴壁密度及有无污染,并拍照存档。
2. 传代操作(星形胶质细胞增殖能力较强):
传代时机:当细胞密度达到80%-90% 融合,形成致密单层时,可进行传代。
洗涤细胞:小心吸弃旧培养基,加入适量预温的PBS缓冲液,轻轻冲洗细胞层后吸弃。
消化:
a. 加入0.25%胰蛋白酶消化液1mL,轻轻转动瓶身使其覆盖瓶底。
b. 可立即吸出大部分消化液,仅保留薄层(或根据细胞贴壁牢固程度,保留全部消化液消化稍长时间)。
c. 将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3分钟。
终止消化:在显微镜下观察,待细胞间隙增大、胞体变圆、部分细胞开始脱落时,立即加入5mL新鲜专用完全培养基终止消化。
收集细胞:用吸管轻柔吹打瓶底,使细胞完全脱落。星形胶质细胞可能连接较紧密,可适当吹打使其分散成单细胞或小细胞团。
接种与培养:将细胞悬液按1:2至1:3的传代比例接种到新的T25培养瓶中。加入新鲜专用完全培养基至总体积约5mL。
后续培养:将细胞瓶放回培养箱。细胞贴壁较快,待完全贴壁后,每2-3天更换一次新鲜培养基。
3. 冻存操作(建议使用低代次细胞):
选择状态佳细胞:选择生长状态良好、处于对数生长期的细胞进行冻存。
制备细胞悬液:按上述方法消化、离心收集细胞,弃上清。
配制冻存液:使用配套的无血清细胞冻存液或含10%DMSO的完全培养基重悬细胞,调整细胞密度至5×10⁵ ~ 1×10⁶ cells/mL。
程序冻存:分装至冻存管,标记清晰。采用程序降温盒进行梯度降温后,最终转入液氮中长期保存。
1. 无菌操作:所有操作在生物安全台内进行。
2. 传代时机:细胞密度达80%-90%时传代。
3. 消化控制:胰蛋白酶消化时间不宜过长。
4. 密度维持:保持适宜细胞生长密度。
5. 定期鉴定:建议定期进行STR鉴定。
6. 代次控制:建议使用低代次细胞进行实验。
7. 用途限制:仅限于科研用途。