一、基本信息

1. 产品编号：HY-J267

2. 产品名称：大鼠前体脂肪细胞

3. 英文名称：Rat Preadipocyte Cells

4. 种属来源：大鼠

5. 组织来源：脂肪组织

6. 细胞类型：原代细胞

7. 生长特性：贴壁生长

8. 细胞形态：典型的成纤维细胞样，呈梭形或不规则形，具有增殖潜能。

9. 传代能力：可传代5代左右，3代以内状态最佳。

10. 生物安全等级：1级

11. 产品规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1 mL冻存管

12. 质量检测：前脂肪细胞因子-1（Pref-1） 免疫荧光染色为阳性，纯度高于90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

13. 专用培养基：大鼠前体脂肪细胞专用培养基

14. 培养条件：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；湿度：饱和湿度

15. 换液频率：每2-3天换液一次

16. 消化液：0.25%胰蛋白酶

17. 运输方式：T25培养瓶/顺丰快递

18. 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

二、细胞特征

1. 形态特征：典型的未分化前体细胞形态。细胞呈梭形，类似成纤维细胞，贴壁生长，胞质内无明显脂滴。在特定的分化诱导条件下，细胞形态会逐渐变圆，胞质内开始积累脂滴。

2. 来源与特性：采用胶原酶消化法从大鼠脂肪组织中分离获得。前体脂肪细胞是脂肪组织中的前体/干细胞，具有自我更新和向成熟脂肪细胞分化的能力。它们位于成熟脂肪细胞之间和血管周围。

3. 分子与功能特性：

前体细胞标志：高表达前脂肪细胞因子-1（Pref-1/DLK1），这是一种跨膜蛋白，是维持前体脂肪细胞未分化状态的关键标志物。分化启动后，其表达迅速下降。

增殖与分化潜能：具有较强的增殖能力。在适当的诱导条件下（如含有胰岛素、地塞米松、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤等成分的分化培养基中），能够启动脂肪细胞分化程序，最终分化为含有大量脂滴的成熟脂肪细胞。

脂肪生成关键基因的表达：分化过程中，依次上调表达过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、CCAAT/增强子结合蛋白α（C/EBPα） 和脂肪酸结合蛋白4（FABP4/aP2） 等关键转录因子和功能蛋白，驱动脂质合成与储存。

内分泌功能前体：分化后的成熟脂肪细胞具有重要的内分泌功能，能分泌瘦素、脂联素、抵抗素等多种脂肪因子。前体脂肪细胞本身也具有一定的分泌功能，参与局部微环境的调控。

肥胖与代谢疾病研究的核心模型：作为脂肪组织增生和肥大的细胞来源，是研究肥胖发生机制、胰岛素抵抗、2型糖尿病等代谢性疾病的重要体外模型。

三、培养条件

1. 专用培养基：大鼠前体脂肪细胞专用培养基（增殖培养基）

2. 分化诱导：需使用特定的脂肪细胞分化诱导培养基（通常需另行配制或购买）。

3. 培养环境：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；湿度：饱和湿度

4. 换液频率：增殖期每2-3天更换一次新鲜完全培养基；分化诱导期需严格按照分化方案进行换液。

四、产品应用

1. 脂肪细胞分化机制研究：研究脂肪生成的分子调控网络，包括关键转录因子（PPARγ, C/EBPα）的激活、脂肪特异性基因的表达时序以及信号通路（如胰岛素、Wnt通路）的调控作用。

2. 肥胖与代谢综合征研究：作为体外模型，研究营养过剩、激素、炎症因子等如何影响前体脂肪细胞的增殖与分化，探讨其在脂肪组织扩张、异位脂肪沉积及全身代谢紊乱中的作用。

3. 药物筛选与评价：用于筛选具有促进或抑制脂肪细胞分化活性的化合物，开发抗肥胖药物、改善胰岛素增敏剂或治疗脂肪代谢障碍的药物。

4. 脂肪组织工程与再生医学：作为种子细胞，用于构建工程化脂肪组织，应用于软组织缺损修复、乳房重建等再生医学领域。

5. 脂肪因子分泌与功能研究：研究前体脂肪细胞及分化后脂肪细胞的分泌谱，探讨特定脂肪因子在能量代谢、炎症及心血管疾病中的作用。

五、产品优势

1. 高纯度与明确标志：经Pref-1免疫荧光染色严格鉴定，纯度高于90%，确保了产品细胞群为具有明确未分化特征的前体脂肪细胞，而非混杂的成纤维细胞或其他间质细胞。

2. 强大的分化潜能：细胞保持了良好的向脂肪细胞分化的能力，在标准分化诱导方案下，能够高效地分化为富含脂滴的成熟脂肪细胞，可通过油红O染色等方法清晰验证。

3. 肥胖研究的理想模型：直接来源于脂肪组织，是研究脂肪组织生物学、脂肪生成及肥胖相关疾病的最相关、最直接的原代细胞模型之一。

4. 配套培养基支持增殖：提供专用的增殖培养基，优化了细胞生长条件，支持前体脂肪细胞的快速扩增，为后续实验提供充足的细胞来源。

六、培养方法

1. 收货处理（T25瓶发货）：

收货检查：收到细胞后，立即检查T25细胞瓶是否完好，培养液有无漏液或浑浊。

稳定细胞：用75%酒精棉球彻底擦拭细胞瓶外壁消毒。在超净工作台内拆开封口膜，将细胞瓶平稳放入37℃、5% CO₂、饱和湿度的培养箱中静置3-4小时，让细胞充分贴壁。

首次观察与记录：静置后，在倒置显微镜下观察细胞形态（应为典型的成纤维样梭形）、贴壁情况及有无污染，并拍照存档。

2. 传代操作（建议使用低代次细胞进行分化实验）：

传代时机：当细胞密度达到80%-90% 融合，且细胞排列致密时，可进行传代。

洗涤细胞：小心吸弃旧培养基，加入适量预温的PBS缓冲液，轻轻冲洗后吸弃。

消化：
a. 加入0.25%胰蛋白酶消化液1mL，轻轻转动瓶身使其覆盖瓶底。
b. 可立即吸出大部分消化液，仅保留薄层覆盖细胞。
c. 将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3分钟。

终止消化：在显微镜下观察，待大部分细胞变圆、突起回缩时，立即加入5mL新鲜专用完全培养基（增殖培养基）终止消化。

收集细胞：用吸管轻柔吹打瓶底，使细胞脱落形成单细胞悬液。

接种与培养：将细胞悬液按1:2至1:3的传代比例接种到新的T25培养瓶中。加入新鲜专用完全培养基至总体积约5mL。

后续维护：将细胞瓶放回培养箱。细胞贴壁较快，待完全贴壁后，每2-3天更换一次新鲜增殖培养基。

3. 脂肪细胞分化诱导（通用流程示例）：

细胞准备：将前体脂肪细胞以较高密度接种于培养板/皿中，使用增殖培养基培养。

接触抑制：待细胞生长至100%融合（接触抑制） 并维持此状态1-2天，此步骤对同步化细胞和启动分化至关重要。

诱导分化：更换为脂肪细胞分化诱导培养基（通常含胰岛素、地塞米松、IBMX等）。培养2-3天。

维持分化：更换为脂肪细胞维持培养基（通常含胰岛素）。此后每2-3天换液一次。

脂滴形成：通常在诱导开始后4-7天，细胞内开始出现小而亮的脂滴，并逐渐融合变大。约10-14天后，大部分细胞可分化成熟，可通过油红O染色进行鉴定。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。