一、基本信息
1. 产品编号:HY-C032
2. 英文名称:Mouse Embryonal Carcinoma Cells
3. 细胞别称:ATDC-5;ATDC5;小鼠胚胎瘤细胞
4. 种属来源:小鼠
5. 组织来源:睾丸组织
6. 细胞类型:畸胎瘤来源的软骨发生细胞
7. 生长特性:贴壁生长
8. 细胞形态:多角形,上皮细胞样
9. 细胞代数:建议10代以内使用
10. 支原体检测:无支原体污染
11. 生物安全等级:1级
12. 背景介绍:ATDC5细胞是来源于畸胎瘤细胞的小鼠软骨发生细胞系
二、细胞特征
1. 形态特征:多角形上皮细胞样,排列规则
2. 分化能力:在胰岛素刺激下可分化成软骨细胞
3. 功能特性:能够形成软骨小结,表达Ⅱ型胶原和X型胶原
4. 矿化能力:具有矿化能力,反映软骨发生过程
5. 稳定性:遗传背景稳定,分化特性明确
三、培养条件
1. 基础培养基:DMEM
2. 添加成分:90% DMEM + 10% FBS + PS
3. 培养环境:温度:37℃;气相:5% CO₂ + 95%空气;湿度:饱和湿度
4. 培养基体积:T25瓶:8mL;6cm皿:4mL;换液周期:根据细胞生长情况
5. 传代比例:1:2至1:3;传代密度:80%-90%进行传代。
6. 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存。
四、产品应用
1. 软骨分化研究:软骨细胞分化机制研究
2. 组织工程:软骨组织工程和再生医学研究
3. 骨关节炎:骨关节炎发病机制研究
4. 信号通路:软骨分化相关信号通路研究
5. 基因表达:软骨特异性基因表达调控
6. 药物筛选:影响软骨分化药物评价
7. 发育生物学:软骨发育过程研究
8. 细胞治疗:软骨修复细胞治疗研究
五、产品优势
1. 分化明确:胰岛素诱导下明确向软骨细胞分化
2. 模型经典:软骨研究的经典细胞模型
3. 应用广泛:在骨科和发育生物学研究中应用广泛
4. 技术成熟:培养和分化技术路线成熟可靠
六、培养方法
1. 收货处理:T25瓶:75%酒精消毒瓶壁,37℃培养箱静置2-4小时;冻存管:收到后立即转入液氮冻存或直接复苏。
2. 传代操作:弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次,加1mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA),37℃培养箱消化1-3分钟,显微镜下观察细胞消化情况,加入2-3mL完全培养基终止消化,轻轻打匀后离心,重悬细胞,按1:2比例分到新的含8mL培养基的培养瓶中。
3. 冻存操作:收集细胞及培养液,离心4分钟,PBS清洗后,加1mL血清重悬细胞,加入无血清细胞冻存液,调整细胞密度,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,-80℃冰箱24小时后转入液氮储存。
七、注意事项
1. 无菌操作:所有操作在生物安全台内进行。
2. 传代时机:细胞密度达80%-90%时传代。
3. 消化控制:胰蛋白酶消化时间不宜过长。
4. 密度维持:保持适宜细胞生长密度。
5. 定期鉴定:建议定期进行STR鉴定。
6. 代次控制:建议使用低代次细胞进行实验。
7. 用途限制:仅限于科研用途。