一、基本信息

1. 产品编号：HY-C050

2. 产品名称：L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织细胞

3. 英文名称：Mouse Subcutaneous Connective Tissue Cells

4. 细胞别称：L Wnt-3A；小鼠皮下结缔组织细胞

5. 种属来源：小鼠

6. 组织来源：皮下结缔组织

7. 细胞类型：成纤维样细胞

8. 生长特性：贴壁生长

9. 细胞形态：成纤维细胞样

10. 产品规格：T25培养瓶或冻存管包装

11. 细胞特性：转染永生化，表达Wnt-3A信号分子

12. 支原体检测：无

二、细胞特征

1. 形态特征：典型成纤维细胞样形态

2. 功能特性：稳定表达Wnt-3A信号蛋白

3. 筛选标记：含有G418抗性基因

4. 稳定性：永生化细胞株，生长稳定

5. 特殊功能：分泌Wnt-3A蛋白，用于条件培养基制备

6. 研究价值：Wnt信号通路研究的理想工具细胞

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM

2. 添加成分：DMEM + 10% FBS + 0.4mg/mL G418 + 1% P/S

3. 培养环境：温度：37℃；气相：5% CO₂ + 95%空气；湿度：饱和湿度

4. 培养基体积：T25瓶：10-12mL；10cm皿：12-15mL

5. 换液周期：2-3天

6. 传代比例：1:2-1:4

7. 冻存条件：液氮储存

四、产品应用

1. Wnt信号通路：Wnt信号传导机制研究

2. 干细胞研究：干细胞自我更新和分化调控

3. 条件培养基：制备Wnt-3A条件培养基

4. 细胞分化：细胞分化过程研究

5. 发育生物学：胚胎发育和器官形成研究

6. 肿瘤研究：Wnt信号异常与肿瘤发生关系

7. 药物筛选：Wnt通路相关药物筛选

五、产品优势

1. 稳定表达：稳定高表达Wnt-3A信号蛋白

2. 功能明确：明确的Wnt信号通路激活功能

3. 质量可靠：严格质量控制，无支原体污染

4. 应用广泛：适用于多种Wnt相关研究领域

5. 技术成熟：成熟的培养和维持技术

六、培养方法

1. 收货处理：T25瓶：表面消毒后，37℃培养箱平衡复温2小时以上

                      冻存管：直接放入-80℃或液氮保存

2. 传代操作：吸净原培养基，加3-4mL PBS润洗细胞10-20秒，加1mL胰酶，轻轻晃动使胰酶铺匀，37℃培养箱消化至细胞间隙变大但未完全脱落，加2-3mL完全培养基终止消化，混匀细胞，900rpm离心3-5分钟，加新培养基重悬，按比例分到新培养瓶，补足培养基，继续培养。

3. 冻存液配方：新手推荐：92% FBS + 8% DMSO

                          高手推荐：92%完全培养基 + 8% DMSO

4. 冻存密度：200-300万/mL

5. 冻存方法：程序冻存盒-80℃过夜后转入液氮

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。