一、基本信息

1. 产品编号：HY-C082

2. 产品名称： E14小鼠胚胎干细胞

3. 英文名称： Mouse Embryonic Stem Cells, ES-E14TG2a

4. 细胞种属： 小鼠（129/Ola品系）

5. 组织来源： 胚胎内细胞团

6. 细胞类型： 胚胎干细胞

7. 生长特性： 贴壁生长

8. 细胞形态： 球形克隆

9. 产品规格： 1×10⁶ cells/1mL冻存管

10. 传代比例： 1:4-1:7

二、细胞特征

1. 遗传特性： 缺乏HGPRT（HPRT），对0.06 mM的6-硫鸟嘌呤有抗性

2. 分化特性： 在饲养层上保持未分化状态，无饲养层时自发分化形成胚胎结构

3. 功能特性： 可进入生殖系，用于重构小鼠胚胎

4. 质量检测： 不含细菌、真菌、支原体等污染

三、培养条件

1. 基础培养基： DMEM基础培养基

2. 添加剂配方：

3. 15%优质胎牛血清

4. 1% GlutaMAX-1谷氨酰胺

5. 必需组分：1% MEM NEAA非必需氨基酸、1%青霉素-链霉素、1.25 mL β-巯基乙醇、10 ng/mL LIF

6. 培养环境： 37℃，5% CO₂，空气95%

四、产品应用

1. 胚胎发育与干细胞生物学研究

2. 基因功能研究与基因敲除模型建立

3. 再生医学与组织工程研究

4. 疾病模型构建与药物筛选

5. 发育生物学与遗传学研究

五、产品优势

1. 多能性强： 具有完整的胚胎干细胞多能性

2. 应用广泛： 适用于多种基因修饰和发育研究

3. 质量稳定： 经过严格质检，确保细胞活性

六、培养方法

1. 饲养层准备： 建议使用KM-MEF作为饲养层细胞

2. 复苏操作： 37℃水浴快速解冻，1000rpm离心5分钟

3. 接种培养： 接种到已铺好MEF的T25培养瓶中

4. 传代时机： 复苏后第2-3天，视克隆大小和密度而定

5. 传代方法： 0.25%胰蛋白酶消化1-2分钟

6. 冻存保存： 使用含10% DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。