一、基本信息

1. 产品编号：HY-C063

2. 产品名称：MH-22A 小鼠肝癌细胞

3. 英文名称：Mouse Hepatoma Cells

4. 种属来源：小鼠

5. 组织来源：肝

6. 细胞类型：肝癌细胞/上皮样细胞

7. 生长特性：贴壁生长

8. 细胞形态：上皮细胞样

9. 细胞代数：10代以内

10. 生物安全等级：1级

11. 产品规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶 或 1 mL冻存管包装

12. 支原体检测：阴性

13. 专用培养基：MH-22A小鼠肝癌细胞专用培养基

14. 培养条件：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳

15. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

16. 运输方式：复苏发货（T25瓶，免运输费）；冻存发货（冻存管，需加干冰运输费）

17. 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

二、细胞特征

1. 形态特征：典型的上皮细胞样形态，细胞呈多角形或不规则形，贴壁生长，细胞间连接较为紧密。

2. 来源背景：MH-22A细胞是小鼠来源的肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma, HCC）细胞系。

3. 功能特性：作为小鼠肝癌模型细胞，保留了一定的肝细胞功能特征，可用于模拟肝癌的生物学行为，如增殖、迁移、侵袭等。

4. 应用定位：是小鼠肝癌研究的常用细胞模型之一，适用于基础肿瘤生物学研究和药物筛选。

三、培养条件

1. 专用培养基：MH-22A小鼠肝癌细胞专用培养基

2. 培养环境：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳

3. 生长模式：贴壁生长

四、产品应用

1. 肝癌基础研究：用于研究肝癌细胞的增殖、凋亡、周期、迁移、侵袭、上皮-间质转化（EMT）等基本生物学行为及相关分子机制。

2. 抗肿瘤药物筛选与评估：作为体外模型，用于筛选和评估针对肝癌的候选化疗药物、靶向药物、中药单体或天然产物的抗肿瘤活性（抑制增殖、诱导凋亡等）。

3. 信号通路研究：用于研究与肝癌发生发展密切相关的信号通路，如Wnt/β-catenin, PI3K/Akt/mTOR, JAK/STAT, MAPK等通路在MH-22A细胞中的活性与调控。

4. 肿瘤免疫研究：可与小鼠免疫细胞（如淋巴细胞、巨噬细胞）共培养，用于研究肿瘤微环境中肿瘤细胞与免疫细胞的相互作用。

5. 体内成瘤实验：MH-22A细胞可在免疫缺陷小鼠（如裸鼠、NOD/SCID小鼠）皮下或肝脏原位接种，构建小鼠肝癌移植瘤模型（CDX模型），用于体内药效评价。

五、产品优势

1. 标准化小鼠肝癌模型：提供性状相对稳定、易于培养的小鼠肝癌细胞资源，是肝癌研究，特别是涉及小鼠模型实验的重要体外环节。

2. 与体内实验衔接性好：该细胞系常用于构建小鼠CDX模型，使得从体外机制研究到体内药效验证的转化更为顺畅。

3. 专用培养体系：配套MH-22A细胞专用培养基，优化了细胞生长条件，简化实验操作，有利于维持细胞状态稳定。

4. 研究工具：作为经典的啮齿类动物肝癌细胞系，在探究物种特异性或比较医学研究中有一定价值。

六、培养方法

1. 收货与复苏处理：

（1）T25瓶（复苏发货）：收到细胞后，观察细胞瓶是否完好，用75%酒精消毒瓶壁。将T25瓶置于37℃、5% CO₂培养箱中静置2-4小时，以便稳定细胞状态。之后可更换为新鲜的MH-22A细胞专用培养基，继续培养。

（2）冻存管（冻存发货）：收到细胞后，应立即转入液氮冻存或直接复苏。复苏时，将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。加入4 mL专用培养基混合均匀。1000 rpm离心3分钟，弃去上清液。加入1-2 mL新鲜专用培养基重悬细胞。将细胞悬液加入含适量专用培养基的T25瓶或10cm培养皿中，置于培养箱培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2. 传代操作（贴壁细胞）：

时机判断：当细胞密度达到80%-90%，细胞融合成片时进行传代。

洗涤：弃去旧培养上清，用不含钙、镁离子的PBS轻轻润洗细胞1-2次。

消化：加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA），使之浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3分钟（具体时间视细胞贴壁紧密程度而定）。

观察与终止：在显微镜下观察，待大部分细胞变圆并开始脱落时，迅速拿回操作台，轻敲瓶壁使细胞脱落，加入2-3 mL专用培养基终止消化。

收集细胞：轻轻吹打均匀，将细胞悬液转移至无菌离心管，1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

重悬与接种：加入1-2 mL新鲜专用培养基重悬细胞，按1:2的比例接种到含8 mL新鲜专用培养基的新培养瓶中。

培养：置于37℃、5% CO₂培养箱中继续培养。

3. 冻存操作：

收集细胞：按传代方法收集处于良好生长状态（对数生长期）的细胞。

洗涤与计数：离心后弃上清，用PBS清洗一遍，弃尽PBS。加入1 mL血清或专用培养基重悬细胞并进行计数。

配制冻存液：根据细胞数量加入预冷的无血清细胞冻存液，使细胞密度达到5×10⁶ ~ 1×10⁷ cells/mL，轻轻混匀。

分装：将细胞悬液分装至冻存管，每管1 mL，并做好清晰标识。

程序冻存：将冻存管放入程序降温盒或直接放入-80℃冰箱，24小时后转入液氮中长期储存。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。