一、基本信息

1. 产品编号：HY-D005

2. 产品名称：悬浮中国仓鼠卵巢细胞ExpiCHO（种属鉴定）

3. 英文名称：Chinese Hamster Ovary Cells, ExpiCHO-S

4. 别称：ExpiCHO

5. 种属来源：仓鼠

6. 组织来源：仓鼠卵巢

7. 细胞类型：改造细胞系

8. 生长特性：悬浮生长

9. 细胞形态：圆形细胞样

10. 倍增时间：每周2-3次

11. 生物安全等级：1级

12. 产品规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶

13. 质量检测：提供STR种属鉴定报告，确保细胞来源正确无误。

14. 专用培养基：CHO悬浮专用培养基

15. 培养条件：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；湿度：培养箱湿度为70%-80%

16. 换液频率：根据细胞密度和代谢情况，通常每2-3天进行传代或补液。

17. 传代比例：建议1:2传代

18. 冻存条件：冻存液：90% FBS + 10% DMSO；或使用非程序冻存液

19. 运输方式：T25培养瓶/干冰或常温运输（视协议而定）

20. 供应限制：仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

二、细胞特征

1. 形态特征：典型的悬浮生长细胞，细胞呈圆形或类圆形，单个或呈小团簇存在于培养液中。

2. 系统背景：ExpiCHO表达系统是一个高度优化的蛋白表达平台。该细胞系经过基因工程改造，具有高效、稳定的蛋白表达特性。

3. 功能特性：

高效蛋白表达：核心优势在于能够实现高水平、高滴度的重组蛋白表达，特别适合于单克隆抗体、Fc融合蛋白、酶等复杂蛋白的大规模生产。

人源化翻译后修饰：能够实现与人源细胞相似的蛋白翻译后修饰，如正确的糖基化模式，这对于治疗性蛋白（尤其是抗体类药物）的生物活性和药代动力学至关重要。

高密度悬浮培养：适应无血清、化学成分限定的悬浮培养基，可实现高密度培养，易于放大至生物反应器，适用于从研发到生产的全流程。

应用价值：是生物制药行业，特别是抗体药物、疫苗、基因治疗载体等生物大分子生产的黄金标准宿主细胞。

三、培养条件

1. 专用培养基：CHO悬浮专用培养基（化学成分限定、无动物源成分）

2. 培养环境：温度：37℃；气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；湿度：70%-80%

3. 培养容器：适用于摇瓶、生物反应器等悬浮培养系统。

四、产品应用

1. 重组蛋白与抗体生产：作为ExpiCHO表达系统的核心，用于实验室规模至中试规模的重组蛋白、单克隆抗体、双特异性抗体、Fc融合蛋白的高效表达与生产。

2. 生物工艺开发与优化：用于培养基筛选、补料策略优化、培养工艺参数（pH、DO、温度）研究，以最大化蛋白表达量和质量。

3. 蛋白糖基化工程研究：研究不同培养条件或基因改造对ExpiCHO细胞表达的蛋白糖型的影响，以优化治疗性蛋白的疗效和安全性。

4. 瞬时转染与稳定细胞株构建：利用高效的ExpiCHO转染试剂，进行高滴度的瞬时蛋白表达；也可用于筛选和构建高表达的稳定细胞株。

5. 病毒载体生产：用于生产用于基因治疗的病毒载体，如腺相关病毒（AAV）、慢病毒（Lentivirus）等。

五、产品优势

1. 表达系统集成优势：提供完整的ExpiCHO表达系统解决方案，包括高性能细胞系、优化的无血清培养基和高效转染试剂，确保获得极高的蛋白表达水平。

2. 高产量与高密度：细胞生长快速，可实现极高的活细胞密度和蛋白表达滴度，显著缩短研发周期，降低生产成本。

3. 产品质量优越：表达的蛋白具有正确的人源化糖基化修饰，保证了治疗性蛋白（尤其是抗体）的生物学功能和临床有效性。

4. 使用便捷：细胞为悬浮生长，无需胰酶消化，简化了培养和放大操作，易于进行高通量筛选和工艺放大。

六、培养方法

1. 收货与启动（T25瓶发货，悬浮细胞）：

收货检查：收到细胞后，观察培养瓶是否完好，培养基是否澄清。

转移细胞：将T25瓶内的全部细胞悬液转移至无菌离心管中。

离心收集：以200-300 ×g 离心5分钟，小心弃去上清。

重悬与接种：加入适量新鲜的、预热的CHO悬浮专用培养基，轻柔重悬细胞。将细胞接种至新的摇瓶或培养容器中，起始接种密度建议为3-5×10⁵ cells/mL。

培养：将容器置于37℃、5% CO₂、湿度70-80%的摇床培养箱中，以合适的转速（如120-140 rpm）进行培养。

2. 传代/维持培养：

监测密度：定期取样进行细胞计数和活力检测（如台盼蓝染色）。

传代时机：当活细胞密度达到2-4×10⁶ cells/mL，或细胞活力开始下降时，进行传代。

传代操作：
a. 取适量细胞悬液，离心（200-300 ×g，5分钟）收集细胞。
b. 弃去上清，用新鲜培养基重悬细胞至目标接种密度（通常为3-5×10⁵ cells/mL）。
c. 将重悬后的细胞接种到预先装有新鲜培养基的新容器中。
d. 放回摇床继续培养。
注意：请勿直接倒掉培养液，必须离心收集细胞。

3. 冻存操作：

选择细胞：选择处于对数生长期中期、活力>90%的细胞进行冻存。

收集细胞：离心收集细胞，弃上清。

配制冻存液：使用推荐的冻存液（90% FBS + 10% DMSO 或 商品化无血清冻存液JY-H040）重悬细胞，调整细胞密度至5-10×10⁶ cells/mL。

分装：将细胞悬液分装至冻存管，每管1.0-1.5 mL。

冻存：立即将冻存管置于程序降温盒中，放入-80℃冰箱过夜，然后转移至液氮中长期保存。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。